枯草杆菌碱性蛋白酶Ki 2基因的序列测定及M222A定点突变

含有枯草杆菌碱性蛋白酶Ｋｉ-２基因的１.９ｋｂＤＮＡ片段用限制酶切成几个小片段,将这些片段分别插入Ｍ１３ｍｐ１８或Ｍ１３ｍｐ１９中,用通用测序引物测得全序列。所得全序列与蛋白酶Ｅ相比较,在结构基因部分仅有８个碱基不同,由此而导致两个氨基酸的差异。此１.９ｋｂ的片段插入枯草杆菌大肠杆菌穿梭质粒Ｐｂｅ-２,得到的重组质粒转化蛋白酶缺陷型的枯草芽孢杆菌ＤＢ１０４,结果表明枯草杆菌碱性蛋白酶Ｋｉ-２基因在ＤＢ１０４中能利用自身的调控元件表达并分泌到胞外。将Ｋｉ-２蛋白酶的２２２位甲硫氨酸突变成丙氨酸,突变后的Ｋｉ-２蛋白酶具有抗氧化性,但比活性比野生型的约低１倍     

凤眼莲总黄酮最佳提取条件的探讨

目的：研究从凤眼莲（Eichhornia crassipes）中提取总黄酮的最佳提取条件。方法：以乙醇为溶剂,采用浸提法和超声波法提取凤眼莲总黄酮,通过单因素实验比较两种提取方法;并对黄酮提取物的抗氧化性进行了研究。结果：浸提法提取凤眼莲中总黄酮的最佳工艺条件：乙醇50%、提取温度70℃、提取时间3h、料液比1：40,总黄酮提取率4.30%;超声波法提取凤眼莲总黄酮的最佳工艺条件：乙醇50%、提取时间30min、料液比1：40、超声功率320W,提取率5.09%;凤眼莲总黄酮清除.OH的能力比甘露醇强,而清除.O2-的能力低于Vc。结论：超声波法是提取黄酮类物质较为理想的途径,凤眼莲总黄酮具有一定抗氧化活性。     

具有八肽重复区突变的朊蛋白其抗氧化性降低

抗氧化性被认为是细胞朊蛋白的主要生理功能之一,研究显示它的抗氧化性主要与朊蛋白序列中的八肽重复区有关．但是迄今为止它的抗氧化机制仍旧不清楚．我们构建表达了野生型朊蛋白（PrP-PG5）和它的不同八肽重复区突变体0（PrP-PG0）,9（PrP-PG9）和12（PrP-PGl2）．各种原核表达突变体蛋白在H202氧化后出现分子量的增加,并可导致羰基产生．MTT和细胞计数实验显示表达各种突变体的细胞存活率明显低于表达野生型朊蛋白（PrP—PG5）的细胞．细胞内ROS检测发现表达各种突变体的细胞内ROS水平明显高于表达野生型朊蛋白（PrP-PG5）的细胞．此外,谷胱甘肽过氧化物酶检测显示表达野生型朊蛋白（PrP-PG5）的细胞内谷胱甘肽过氧化物酶水平明显高于表达各种突变体的细胞．H2O2处理细胞后,转染突变体的细胞总的羰基产物数量明显高于转染野生型朊蛋白（PrP-PG5）的细胞,而表达突变体细胞及转染空载体的细胞较表达野生型朊蛋白（PrP-PG5）的细胞对氧化物质的抵抗性明显减弱．这些结果提示,具有正确八肽重复区数目对于朊蛋白（PrP）的抗氧化作用起关键作用,PrP的抗氧功能的丢失可能参与家族性朊病毒病的病理过程．     

不同品系甘孜州梨果仙人掌果多糖的含量及初步生物活性研究

目的：比较不同品系甘孜州梨果仙人掌果果皮和果肉多糖的抗氧化活性及体外对α 葡糖糖苷酶活性的作用。方法：将新鲜仙人掌果果皮和果肉分离、干燥、打粉、热水浸提、过滤、80%乙醇醇沉、脱蛋白、脱色、透析、旋转蒸发浓缩。苯酚 硫酸法测定多糖含量,并通过羟自由基清除实验、还原力实验（FRAP）、ABTS清除实验测定多糖抗氧化活性,测定其对α 葡萄糖苷酶的作用。结果：品系1、2梨果仙人掌果果肉多糖含量分别为6.59±0.12、6.95±0.28g/100g,品系1、2果皮的多糖含量分别为5.53±0.22、6.46±0.18g/100g;品系1、2对ABTS自由基清除能力的IC50分别是果肉0.23、0.60mg/mL和果皮0.85、0.88mg/mL,品系1果肉多糖的IC50值最小（P＜0.05）;品系2果肉多糖还原力较强（P＜0.05）;品系2果皮多糖有较强的羟自由基的清除能力和较强的α 葡萄糖苷酶促进作用（P＜0.05）。结论：两品系梨果仙人掌果多糖含量较高（5%～7%）且无差别。两品系梨果仙人掌果多糖都表现出一定的抗氧化能力和对α 葡萄糖苷酶活性的促进作用。     

葡聚糖糖基化处理对绿豆蛋白抗氧化性影响研究

以绿豆分离蛋白（MBPI）和葡聚糖为原料,通过湿热法制备MBPI-Dextran共价复合物。本研究通过测定产物的还原力、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子自由基、羟自由基清除能力共同评价糖基化反应对MBPI抗氧化能力的影响。结果表明：MBPI-Dextran共价复合物具有一定的抗氧化能力,特别是90℃条件下反应得到的产物,抗氧化能力较80℃产物显著提升,这与美拉德反应程度有关,较高温度下美拉德反应进程加快,促使更多具有抗氧化能力的物质生成。因此,糖基化改性后的绿豆蛋白在抗氧化能力研究上具有一定的应用价值。     

灵芝-银杏双向液体发酵条件优化及抗氧化的研究

本研究采用双向液体发酵技术,以灵芝作为出发菌株,银杏叶为药性基质,以发酵产物的抗氧化活性为检测指标,通过单因素及正交实验,对双向发酵条件进行了优化,并进一步对发酵后的活性物质进行了检测。结果表明,灵芝‐银杏双向液体发酵的最佳条件为:银杏叶接种量为0.15g/100m L、初始p H 8.0、发酵时间9d、添加银杏叶的发酵时间为第2天,在此基础上,菌株的还原力达到0.731;活性物质多糖含量为245.20mg/g,三萜含量为70.96mg/g,总黄酮质含量为10.98mg/g,分别是对照的2.38倍、1.96倍和2.10倍。     

番茄红素的功能性质及其应用的研究

番茄红素是一种广泛存在于红色水果蔬菜中的类胡萝卜素。番茄红素具有许多生理功能,它具有较强的单线态氧清除能力,具有较好的防癌、抗癌能力。本实验比较了番茄红素和VE的抗氧化能力,研究了番茄红素对肝癌小鼠H22的抑制作用及番茄红素在食品中的应用。     

桂丁、草蔻挥发油抗氧化性研究

采用脂质过氧化方法和DPPH方法分别检测了2种植物挥发油抗脂质过氧化活性和清除自由基活性.且通过和阳性对照Vitamin E和Vitamin C的比较发现2种植物挥发油均有不同程度的抗脂质过氧化活性和清除自由基的活性.草蔻的抗脂质过氧化活性在低浓度下抑制率很高,在浓度为0.097～1.2 mg/mL之间其抗氧化能力强于桂丁.用IC50和EC50来评价抗脂质过氧化能力和清除自由基活性,则草蔻挥发油的抗脂质过氧化活性最强,且强于阳性对照Vitamin C,即草蔻的IC50为0.099 mg/mL.对于草蔻和桂丁的清除自由基的能力是相似的,EC50分别为4.50和4.46 mg/mL.