不同黑稻品种黑米和谷壳的花青素产量及其抗氧化性比较

该研究以5个黑稻品种籽粒为材料,通过单因素实验探究树脂吸附法中各因素对黑米花青素纯化效果的影响,优化花青素纯化工艺,比较分析对不同黑稻品种黑米和谷壳的花青素纯化后的产量;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法比较其抗氧化活性,并采用PCR方法检测花青素生物合成代谢途径中关键结构基因,以明确不同黑稻品种中黑米和谷壳花青素产量及其抗氧化特性,为黑稻花青素开发利用提供技术支撑。结果表明:(1)黑稻花青素提取液的最佳纯化条件为:静态吸附平衡时间4 h,解吸时间1.5 h,吸附液pH为2.5,温度30℃,70%乙醇洗脱。(2)黑稻黑米中花青素产量最高的品种是‘辐黑香糯’(213μg/g),谷壳中花青素产量最高的品种是‘固城黑糯’(226μg/g),且‘固城黑糯’黑米和谷壳的总花青素产量最高(432μg/g)。(3)黑米花青素的DPPH清除率为65.1%,黑色谷壳花青素的DPPH清除率为73.7%,每克黑米和黑色谷壳的花青素冻干粉对DPPH自由基清除能力分别相当于3.694和4.208 mmol维生素E,谷壳花青素抗氧化能力比黑米花青素高13.9%。(4)对5个黑稻品种的花青素合成途径的5个关键基因检测发现,仅‘矮血糯’中无黄酮-3′-氢化酶基因(OsF3′H),而且其谷壳中的花青素产量(125μg/g)也显著低于其余4个品种,表明OsF3′H基因可能与黑稻谷壳的花青素含量有关。     

鲟鱼鱼肠抗氧化肽的提取及抗氧化性

探讨酶法制备具有抗氧化活性的鲟鱼鱼肠抗氧化肽的方法,并进行体外抗氧化活性的测定。结果表明,比较4种蛋白酶酶解产物的抗氧化能力,确定胃蛋白酶为制备鲟鱼鱼肠抗氧化肽的最佳水解用酶;通过单因素试验和正交实验分析得出最适酶解工艺是:胃蛋白酶加酶量3 200 U/g,酶解时间1.5 h,料液比1∶20,温度35℃。其体外抗氧化能力随肽质量浓度增大而增大,在浓度为1.5 mg/mL时,鲟鱼鱼肠抗氧化肽清除DPPH·能力达到Vc的83.64%,对·OH清除率为78.06%,还原力大小约为Vc溶液的1/3。胃蛋白酶酶解鲟鱼鱼肠制备的抗氧化肽具有较好的抗氧化活性,其作为一种潜在的商业抗氧化剂具有良好的应用前景。     

雪松松针多糖超声波酶法提取及其抗氧化性

为优化雪松松针多糖超声波酶法的提取工艺,并研究多糖结构及其抗氧化性。通过响应面法分析确定最佳提取参数为:3. 0 g松针粉末,液料比20∶1(m L∶g),提取温度80℃,超声功率560 W,超声时间47 min,纤维素酶用量12 FPU/g原料,提取两次,多糖得率高达10. 39%。采用高效液相色谱、红外光谱和核磁共振光谱等对松针多糖进行了结构表征,松针多糖以β-糖苷键为主要连接方式,并由葡萄糖、果糖、阿拉伯糖和半乳糖等单糖组成。体外抗氧化性研究结果表明:松针粗多糖对羟基自由基(·OH)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)的清除能力远高于纯化多糖,呈现出良好的量效关系,粗多糖对·OH和DPPH·的半抑制浓度IC50分别为0. 47 g/L和0. 076 g/L。     

余甘子活性成分含量与抗氧化性研究

研究了不同产地余甘子的总多酚、黄酮和多糖含量,同时测定了各产地余甘子提取物的抗氧化活性。结果表明,广东野生品种鲜果的总多酚含量、总黄酮含量和水溶性多糖含量最高,它们在每克干果中的含量分别为(204.15±6.85)mg没食子酸当量、(81.11±8.67)mg芦丁当量和(19.78±1.22)mg葡萄糖当量。广东野生品种提取物的抗氧化活性较高,其还原力为1.344±0.14,羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除力分别为91.50%±3.53%,92.31%±1.30%。广东栽培种提取物的DPPH自由基清除力最高,达到92.09%±1.52%。     

荷叶黄酮的溶剂热提取及其抗氧化作用研究

研究利用溶剂热法提取荷叶中黄酮类化合物的最佳工艺条件,考察了提取温度、时间、料液比、乙醇的体积分数及提取级数5个单因素对荷叶黄酮提取率的影响,并在单因素的基础上进行正交实验得到荷叶黄酮提取的最佳工艺条件:料液比1:40、乙醇体积分数为60%、提取2.5 h、提取温度80℃,提取2次。并研究了荷叶提取物在新榨豆油中的抗氧化作用,效果良好。     

枯草杆菌碱性蛋白酶Ki 2基因的序列测定及M222A定点突变

含有枯草杆菌碱性蛋白酶Ｋｉ-２基因的１.９ｋｂＤＮＡ片段用限制酶切成几个小片段,将这些片段分别插入Ｍ１３ｍｐ１８或Ｍ１３ｍｐ１９中,用通用测序引物测得全序列。所得全序列与蛋白酶Ｅ相比较,在结构基因部分仅有８个碱基不同,由此而导致两个氨基酸的差异。此１.９ｋｂ的片段插入枯草杆菌大肠杆菌穿梭质粒Ｐｂｅ-２,得到的重组质粒转化蛋白酶缺陷型的枯草芽孢杆菌ＤＢ１０４,结果表明枯草杆菌碱性蛋白酶Ｋｉ-２基因在ＤＢ１０４中能利用自身的调控元件表达并分泌到胞外。将Ｋｉ-２蛋白酶的２２２位甲硫氨酸突变成丙氨酸,突变后的Ｋｉ-２蛋白酶具有抗氧化性,但比活性比野生型的约低１倍     

用蛋白质工程的方法改良枯草杆菌蛋白酶E(Subtilisin E)的抗氧化性

以含有蛋白酶E基因(aprE)的单链M13mp18-aprE DNA为模板,合成的寡核苷酸5′-3′为诱变引物,用缺口双链法对aprE进行Met-222-Ala点突变。经菌落印迹杂交筛选,选出阳性噬斑。用SaⅡ酶解M13mp18-aprE得到aprE,将它和pPZW103重组,转化中性、碱性蛋白酶缺失宿主菌DB104。经含卡那霉素和脱脂奶粉板筛选和比较aprE限制性内切酶NcoⅠ和SacⅡ水解电泳图谱分析,完成构建一个分泌抗氧化的枯草杆菌蛋白酶E的工程菌PW8888。     

不同品系甘孜州梨果仙人掌果多糖的含量及初步生物活性研究

目的：比较不同品系甘孜州梨果仙人掌果果皮和果肉多糖的抗氧化活性及体外对α 葡糖糖苷酶活性的作用。方法：将新鲜仙人掌果果皮和果肉分离、干燥、打粉、热水浸提、过滤、80%乙醇醇沉、脱蛋白、脱色、透析、旋转蒸发浓缩。苯酚 硫酸法测定多糖含量,并通过羟自由基清除实验、还原力实验（FRAP）、ABTS清除实验测定多糖抗氧化活性,测定其对α 葡萄糖苷酶的作用。结果：品系1、2梨果仙人掌果果肉多糖含量分别为6.59±0.12、6.95±0.28g/100g,品系1、2果皮的多糖含量分别为5.53±0.22、6.46±0.18g/100g;品系1、2对ABTS自由基清除能力的IC50分别是果肉0.23、0.60mg/mL和果皮0.85、0.88mg/mL,品系1果肉多糖的IC50值最小（P＜0.05）;品系2果肉多糖还原力较强（P＜0.05）;品系2果皮多糖有较强的羟自由基的清除能力和较强的α 葡萄糖苷酶促进作用（P＜0.05）。结论：两品系梨果仙人掌果多糖含量较高（5%～7%）且无差别。两品系梨果仙人掌果多糖都表现出一定的抗氧化能力和对α 葡萄糖苷酶活性的促进作用。     

羧甲基化虎奶多糖的制备及抗氧化性研究

通过对从虎奶菌菌核中提取的虎奶多糖（HNP）进行羧甲基化修饰,制备了一种水溶性羧甲基化虎奶多糖（CM-HNP）,并对其抗氧化性进行了初步研究.结果表明CM-HNP能有效抑制Fe2+-Vit C引起的大鼠肝线粒体脂质过氧化、膜流动性的降低和线粒体的肿胀,清除邻苯三酚自氧化产生的超氧自由基O-·2并呈一定的剂量-效应关系.