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991.
992.
993.
本文以GST-UVS.2抗体和卵黄膜为检测手段,采用凝胶过滤和离子交换等方法将非洲爪蟾(Xenopuslaevis)孵化酶纯化了90倍以上,并研究了其酶活性和生化特性。实验发现,孵化酶分子量为60kD,有很强的蛋白酶活性和卵黄膜溶解活性;它很不稳定,在纯化时极易降解为40kD分子,40kD分子没有卵黄膜溶解活性,但仍有很强的蛋白酶活性。40kD分子很可能只代表60kD分子中的蛋白酶功能区,而丢失了两个CUB重复区。孵化酶对EDTA和金属离子非常敏感、又为p-APMSF等胰蛋白酶抑制剂所强烈抑制,表明它是属于胰蛋白酶类型的一种金属蛋白酶。其特异性MCA-底物为Boc-Leu-Gly-Arg-MCA。 相似文献
994.
弗氏链霉菌丝氨酸蛋白酶基因的克隆及表达 总被引:5,自引:0,他引:5
从一株具有极强的降解羽毛能力的弗氏链霉菌菌株(Streptomyces fradiae var.k11)中纯化得到了一种丝氨酸蛋白酶SFP2。经蛋白测序,得到部分氨基酸序列,设计简并引物,PCR扩增得到部分基因序列,通过构建基因文库,获得了包括信号肽序列在内的完整的基因sfp2(EMBL收录号AJ784940),开放阅读框全长924bp,包括114bp的信号肽编码序列和810bp的酶原编码序列, 其中成熟蛋白编码基因长576bp,编码191个氨基酸,理论分子量为19.112kD。酶原编码基因和成熟蛋白编码基因均在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中得到了表达,酶原编码基因表达产物具有正常的生物学活性,证明了克隆基因的生物学功能。 相似文献
995.
CD147可以促进基质金属蛋白酶(MMPs)的表达,与肿瘤的生长和浸润有关。为了研究CD147在大肠癌中的作用,利用RT-PCR从一健康人克隆了cd147基因,测序发现该基因存在两个碱基突变,其中C634T造成了CD147跨膜区212位氨基酸由L突变为F。分别构建CD147的原核(pGEX-5x-147)和真核(pEGFP-147)表达系统,在宿主菌BL21和CCL229细胞中均获得了稳定表达。Western印迹显示原核表达产物比真核CD147分子量小,说明原核CD147缺乏糖基化。荧光显微镜显示真核CD147表达定位于CCL229细胞膜,表明突变L212F不影响CD147的膜定位。用明胶电泳检测表达的CD147对MMPs表达的影响,结果显示原核产物不能诱导MMPs表达上调,而真核产物能够明显诱导MMPs表达上调,说明糖基化对于CD147活性是必需的,真核系统能够表达具有生物功能的CD147,并且突变L212F不会影响蛋白质的活性。 相似文献
996.
草菇蛋白酶的分离、纯化及等电点的测定 总被引:5,自引:0,他引:5
草菇是我国食用菌主要栽培品种之一,属典型高温真菌。低温将诱导草菇细胞内的蛋白质降解,导致草菇菌丝自溶、死亡。蛋白酶在草菇低温自溶过程中起了重要作用。在分离、纯化草菇蛋白酶的基础上,采用等电点聚焦电泳测定了蛋白酶的等电点,为草菇低温自溶与蛋白酶之间的关系的研究奠定了基础。 相似文献
997.
998.
本文利用实验室保存的枯草杆菌发酵产生枯草杆菌蛋白酶,并经(NH4)2SO4盐析和CM-sepharose Fast Flow对枯草杆菌蛋白酶进行纯化,用SDSPAGE检测纯化效果,显示该酶分子量低于14kDa,并对蛋白酶的酶学性质、体外溶栓特性及溶栓机理进行初步探讨,其最适反应温度为60-70℃,但50℃以下稳定性良好,最适反应pH为7,pH6-8稳定。 相似文献
999.
1000.
鼠伤寒沙门菌经口进入消化道,穿过小肠上皮屏障侵入宿主。其重要特征是能在黏膜下层的巨噬细胞和树突细胞中繁殖,随之从胃肠道向肝、脾等网状内皮组织扩散。细菌迁移时,丝氨酸纤维蛋白酶在细胞外基质(ECM)降解过程中起重要作用。此酶由丝氨酸蛋白酶抑制剂α2AP负调控。沙门菌的表面蛋白酶PgtE可通过蛋白水解作用使α2AP失活, 相似文献