黄颡鱼Wnt家族4个基因的克隆、组织表达及对铜的响应

为探究Wnt家族成员在黄颡鱼卵巢发育中的作用, 研究首先采用RT-PCR和RACE技术获取了黄颡鱼Wnt5a、Wnt5b、Wnt7a和Wnt9b基因的全长cDNA序列, 即1984、2905、2158和1622 bp, 其中ORF长度分别为1124、1124、1049和1073 bp, 编码375、375、350和358个氨基酸。氨基酸序列比对和系统树分析显示, 这些基因十分保守, 黄颡鱼WNT与墨西哥丽脂鲤和斑马鱼比较接近。组织表达分析表明, 这些基因的mRNA在脑、脾脏、肾脏、鳃、心脏、肌肉、脂肪、肝脏及卵巢等组织中都有表达, 但表达水平不尽相同。Wnt家族基因对铜的响应研究表明: 在暴露28d时, Wnt7a mRNA水平随着铜浓度先上升后下降, 但是Wnt5a、Wnt5b和Wnt9b基因表达各个处理组无显著性差异; 在56d, Wnt5b在60 μg Cu/L组最低, 其他2个组差异不显著, Wnt9b mRNA水平随着铜浓度先上升后下降, 但是Wnt5a和Wnt7a基因表达各个处理组无显著性差异, 表明Wnt家族这些基因的功能发生了分化, 部分成员介导了铜影响黄颡鱼卵巢发育的调控。研究首次揭示了黄颡鱼Wnt家族部分成员的基因结构和功能, 为深入探讨他们在卵巢发育中的作用奠定了基础。     

三疣梭子蟹PtToll-1受体的原核表达及组织、细胞分布研究

为深入研究三疣梭子蟹Toll受体的功能, 在前期工作的基础上构建了PtToll-1胞外结构域原核表达载体, 并成功获得其重组蛋白。将获得的重组蛋白免疫小鼠获得抗此重组蛋白免疫抗血清用于后续研究。SDS-PAGE结果表明, 体外诱导表达重组蛋白rPtToll-1以包涵体的形式出现在大肠杆菌裂解液的沉淀中, 分子量大小约为87.18 kD; Western-Blot分析表明, 小鼠抗血清能与rPtToll-1特异性结合。利用免疫荧光及细胞免疫化学方法对三疣梭子蟹PtToll-1在消化道、肝胰腺、鳃、心脏和肌肉等组织及血淋巴细胞中的分布进行研究。此外成功构建PtToll-1完整蛋白的真核表达载体pEGFP-N2-PtToll-1, 并转染HEK293T细胞研究其在哺乳动物细胞HEK293中的表达。组织免疫荧光结果显示, PtToll-1在三疣梭子蟹消化道、肝胰腺、鳃、心脏及肌肉等组织中均有分布, 但在鳃及消化道的组织结构中表达较强; 细胞免疫荧光及免疫化学结果均表明PtToll-1主要分布在血淋巴的细胞膜上; 激光共聚焦显微技术观察发现, pEGFP-PtToll-1融合蛋白也主要在HEK-293T细胞膜上表达。研究结果将为三疣梭子蟹Toll受体蛋白的免疫学功能的研究奠定基础。     

肠道菌群对肠道病毒感染的影响

肠道病毒(enterovirus)作为危害婴幼儿健康的主要病原体之一,给世界各国带来沉重的医疗和经济负担。近年来,随着对肠道菌群研究的不断深入,越来越多的证据表明,肠道菌群在肠道病毒感染过程中发挥着重要作用。本文就肠道菌群对肠道病毒感染的影响及其相关机制作一综述,为深入开展肠道病毒感染的防控研究提供参考。     

基于功率谱信息熵与GK模糊聚类的生物组织变性识别方法

本文提出了一种基于功率谱信息熵和GK模糊聚类相结合的方法,应用于生物组织变性识别判定中。利用高强度聚焦超声辐照离体新鲜猪肉来改变其特性,并用热电偶测量声焦区温度,同时采集了不同温度时的超声回波信号。通过对采集的信号进行截取,研究了分段数对功率谱信息熵辨识性能的影响。研究发现当分段数为26至32时,功率谱信息熵的准确度、灵敏度和特异度均有较高的值。本研究计算了分段数为30时的功率谱信息熵,此时的变性组织对应的功率谱信息熵比未变性组织对应的功率谱信息熵平均高出约0. 094,大约为7. 99%。采用功率谱信息熵作为特征参数时,GK模糊聚类效果优于模糊C均值聚类;采用GK模糊聚类方式,功率谱信息熵比小波熵具有更高的辨识率。     

柑桔碎叶病毒研究

用汁液摩擦接种方法对柑桔碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)进行了进一步的生物学鉴定.结果表明,该病毒除在豇豆上引起枯斑外,还侵染克里芙兰烟(Nicotianaclevilandii)产生系统斑驳和轻花叶,侵染昆诺藜(Chenopodium quinoa)和苋色藜(C.amaranticolor)引起系统坏死和花叶,侵染鸡冠花(Celosia cristata)引起局部环斑.这些草本寄主均可作为CTLV的指示植物.在发病的柑桔叶汁液中,测得CTLV的稀释限点为10~(-5).经汁液摩擦接种,可以将CTLV从克里芙兰烟传播到木本指示植物柑桔和枳橙上.感病植物材料的组织超微结构观察结果表明:CTLV感染柑桔、枳橙、克里芙兰烟和昆诺藜均使其叶肉薄壁细胞的叶绿体出现淀粉沉积、叶绿体片层结构解体和消失;病毒在受感染的植株叶脉韧皮部细胞中紧密聚集,形成病毒结晶体;这种结构也出现在叶肉薄壁细胞中.这是关于该病毒组织病变的首次报道.用直接负染方法从感染CTLV的柑桔(枳橙)、克里芙兰烟和昆诺藜病叶中均能检查到线状病毒粒子,用改良的Deriick’s免疫电镜方法和琼脂双扩散方法测定均显示该病毒…     

Changes of macromolecular organizations in nonjunctional sarcolemmas after cross—innervation—a study of fast—and slow—twitch muscle fiberes in rats

The purpose of the present study was to analyse the changes of macromolecular organizations in nonjunctional sarcolemmas of different types of skeletal muscle fibres after cross-innervation.In normal rate the mean density of square arrays(6nm particles organized in orthogonal of square arrays(6nm particles organized in othogonal arrays)was 9.02/μm^2 for the nonjunctional sarcolemmas of fast-twitch extensor digitorum longus(control EDL,CE)muscle fibres and 0.34/μm^2 for the nunjunctional sarcolemmas of slow-twitch soleus(control SOL,CS)muscle fibres.After cross-innervation between the fast-twitch EDL and slow-twitch SOL muscle fibres by slow and fast muscle nerves respectively for three months ,the mean density was 0.45/μm^2 for the nonjunctional sarcolemmas of the operated EDL(OE)and 8.3/μm^2 for the nonjunctional sarcolemmas of the operated SOL(OS).This indicates that the cross-innervation causes a reciprocal transformation of the number and distribution of such macromolecular organizations in the electrically excitable nonjunctional sarcolemmas.     

豌豆间期细胞核内核仁组织者区排列的非放射性原位杂交定位

以异羟基洋地黄毒甙(digoxigenin)标记的rRNA为探针与多聚甲醛固定的植物根尖振动切片原位杂交。结合免疫荧光检测分析了豌豆(Pisum sativum)间期细胞核内核仁组织者区的数目、分布和排列。研究结果发现豌豆根尖分生组织间期细胞核内有1—6个被探针分子强烈标记的位点。这些位点呈大小不等(0.24-1.98μm~3)的斑点状,分布在核仁的周边,并且与核仁相连。探针标记位点在核仁周边的排列方式随标记位点的数目不同而异。在具有四个标记位点的细胞核内,它们呈四面体,梯形或平行四边形排列。在显示原位杂交阳性的细胞核中,59.5%显示4个标记位点,少于或多于4个标记位点的细胞分别占35.7%和4.76%。探针标记位点的数目与标记位点本身的大小无明显联系,而与核仁的体积大体上呈负相关趋势。文章讨论了这些被rRNA探针标记的位点与核仁组织区及核仁形成的关系。     

水稻离体体细胞胚与合子胚的某些生化特性的比较

水稻离体培养的体细胞胚（ＳＥ）与整体植株合子胚（ＺＥ）的蛋白质组分相似,约有１７条多队的分子量相同,其中６７～９１ｋＤ范围的多肽在非胚性愈伤组织（ＮＥ）中均很弱,３９、１７、６０ｋＤ多肽在ＮＥ中未发现。ＳＥ的游离氨基酸组成与ＺＥ也相似,占优势的氨基酸为Ａｓｐ,Ｇｌｕ,Ａｌａ,Ｌｙｓ,在分化后期Ａｒｇ含量也有提高,而在ＮＥ中这些内源氨基酸的含量均较低。此外,在两种类型的胚中都存在凝集素类的物质,而在无胚状体形成的ＮＥ中则未发现。     

去包埋剂制片术揭示小麦珠被组织中微丝的跨胞分布

以ＤＧＤ包埋,去包埋剂制片法,结合常规电镜制备术,观察研究了小麦珠被组织中胞产连丝的结构与分布特征及其与微丝的关系。试验结果表明,同层珠被细胞间壁上胞间连丝的分布密度比上下层珠被间的要显著地高得多;珠被中是连丝保持因有的正常结构,孔径３０－４０ｎｍ,变动幅度不大,观察不到如作者以前２在小麦珠心和所见的那种甩镜连丝经结构个性而扩大,转变为开放态的景观。以去包埋剂制的进一步揭示,从胞南骨架网络表层有纤     

蛇内脏组织制剂治疗皮肤病13817例

几年来我们用蛇内脏组织制剂对冬夏常见皮肤病的治疗取得满意效果,现将系统资料报导如下.1 资料与方法1.1 一般临床资料13817例患者大多数为医院、卫生所门诊病人,少数为住院病人.用蛇油霜治疗皲裂,冻疮、泪裂,皮肤干燥、粗糙9928例,其中男7135例,女2793例,年龄5岁～62岁,病程15天～23年,用舒尔肤治疗蚊虫叮咬,刺毛虫螫伤,接触性过敏性皮炎,痱子3889例,年龄10岁～6O岁.病程2天～5年.1.2 药物来源及用法 蛇油霜系南通宇翔公司蛇