谷胱甘肽的测定方法进展

谷胱甘肽参与动植物体内的各种代谢活动,起着重要的作用。谷胱甘肽的测定方法有多种,如碘量法、纸层析法、高效液相色谱法等,但目前为止还没有一种快速、简便、准确、经济的方法。本文就谷胱甘肽的测定方法进展进行了简要概述。     

tPA突变体在哺乳动物细胞中的表达

利用携带有二氢叶酸还原酶(dhfr)基因的pCI载体,实现tPA突变体(FrGGI)在CHO-dhfr^-细胞中的高效表达,获得高表达细胞株。采用分子克隆常规技术,将去除3’端非蛋白编码区的tPA突变体cDNA与pCI载体连接,构建真核表达载体pCI—tPA;采用阳离子脂质体转染法转染CHO-dhfr^-胞。经酶切及测序鉴定,证明所构建的质粒正确,转染CHO—dhfr细胞后,经过MTX加压筛选,得到了10株表达水平较高的细胞株,其活性可达每106细胞4000U／24h。以上结果为进行tPA突变体工程细胞株的筛选奠定了基础。     

油桐的组织培养与快速繁殖

1植物名称 油桐[Vernicia fordii（Hemsl．）Airy-Shaw],又称光桐、三年桐。 2材料类别 成熟种子。     

一种快速鉴定转基因植物纯合体的新方法

植物转化中鉴定转基因植物的整合性是一个很重要的步骤,常规方法是对独立分离的转基因T1代植株产生的T2代进行转基因分离比率研究,以检测T1代的转基因整合状态,不仅费时费力,而且浪费了T1代资源。本介绍一种应用双重定量实时PCR技术鉴定转基因植物纯合子的新方法：以T1代植物DNA为模板,根据转基因后代的Ct表型值鉴定其转基因整合状态,Ct值接近2的为转基因纯合型,Ct值接近1的为转基因杂合型。用这种方法,可以同时对数十个T1代转基因幼苗的整合状态进行快速鉴定,准确率为100％。     

高效养蛇方法

1　蛇住“楼房”最理想　　蛇类与人类一样 ,需要有个安全、舒适的居住环境。能否给蛇造个理想的窝 ,是人工养蛇成功的关键之一。因蛇是比较惰懒成性的野生动物 ,饱食一顿后盘踞在窝内连续几天 ,甚至十几天不动 ,直到腹内的食物完全消化掉 ,才会再次爬出窝外去喝水和觅食。鉴于这种情况 ,我们在多年的养蛇基础上设计了这种楼房式的“多层立体地下 (土 )蛇房”,蛇房深入地下 1～ 2 m左右 ,用砖有规律的层叠在一起 ,形成 9～ 1 4层的地下 (土 )蛇房 ,供蛇自由的选择它理想居住层次。此蛇房的应用不仅扩大了原有养殖面积 ,也扩大了存蛇量 ,储蛇…     

超级白太镐组织培养及快速繁殖

以超级白太镐的幼苗叶片为外植体进行组织培养,结果表明,其叶片可以诱导不定芽。经试验筛选出各阶段最适培养基为:(1)诱导:MS+6-BA 2.0mg/L(单位下同)+NAA 0.2; (2)增殖:MS+6-BA 1.0+NAA 0.1;(3)生根:MS+6-BA 0.2+NAA 0.5+IBA 0.2+活性炭0.1%。     

乌头类双酯型生物碱水解产物-苯甲酸的含量测定研究

目的:建立RP-HPLC测定乌头类双酯型生物碱水解产物苯甲酸含量的方法.方法:色谱柱:Waters C18(150×4.6 mm),流动相:甲醇-0.02 mol/L乙酸铵溶液(5∶95),检测波长:230 nm,流速:1.0 ml/min,柱温:30℃.结果:苯甲酸在0.432～3.888μg(r=0.9999)之间呈线性关系,苯甲酸加样回收率为98.62%(RSD=1.89%).结论:该方法简便、稳定、准确,可做为乌头类双酯型生物碱水解产物苯甲酸含量测定的方法.     

马齿苋的组织培养与快速繁殖

马齿苋又名长命菜 ,长寿菜 ,为马齿苋科 1年生肉质草本植物。全草入药 ,具清热、凉血、解毒之功效 ,用于湿热泄泻、疔疮肿毒、蛇虫咬伤、痔疮肿痛、湿疹等。据现代医学研究报道 ,马齿苋中含有较高浓度的去甲肾上腺素 (每 g鲜品含量达 2 .5 mg) ,对糖尿病具有食疗作用 ;含有 ω- 3脂肪酸 ,对心血管有保护作用 ;含有较丰富的铜元素 (每 g干品含 2 1μg) ,可作为白癜疯患者和因缺铜元素而造成白发的患者的辅助食疗菜肴 ;还含有大量的钾盐 ,对维持心肌功能、参与细胞新陈代谢 ,维持渗透压 ,维持神经肌肉正常功能等 ,具有良好的保健作用。作为野…     

莲藕的组织培养与快速繁殖

1　植物名称　莲藕 (Ｎｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａ)鄂莲 4号。2　材料类别　茎尖。3　培养条件　 ( 1 )芽分化培养基 :ＭＳ 6 ＢＡ1 .0～ 2 .0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＮＡＡ 0 .2 3.0 %蔗糖 ;( 2 )增殖培养基 :ＭＳ 6 ＢＡ 0 .5～ 1 .0 ＩＢＡ0 .2 3.0 %蔗糖 ;( 3)生根培养基 :ＭＳ ＩＢＡ 0 .5～1 .0 ＡＣ 1 50 0 蔗糖 5.0 %。以上各培养基加0 .6%琼脂 ,ｐＨ 5.8。 ( 4 )移栽用营养液 :1 /4ＭＳ。培养温度 2 5～ 2 8℃ ,每天光照 1 0ｈ ,光照度 1 0 0 0～ 1 50 0ｌｘ。4　生长与分化情况4.1　茎尖的切取与分化　切取健康…     

用重组酶介导扩增技术快速扩增核酸

体外核酸快速扩增技术是一种可使微量核酸在体外高效快速扩增的技术, 自问世以来, 被广泛应用于分子生物学、医学和法理鉴定等领域, 并被不断改进, 以使其功能和适应性更为广泛. 重组酶介导扩增法是在现有体外核酸扩增原理的基础上发展起来的恒温体外快速扩增核酸技术. RAA法利用重组酶、单链结合蛋白和DNA聚合酶代替了传统PCR的热循环解链过程, 实现了在37℃恒温下的核酸快速扩增, 无需特殊的辅助仪器, 对操作人员的要求也不高, 具备简单、节能、便携、快速等特点, 有望在不远的将来取代传统的热循环PCR反应.