冷拘束应激对大鼠心脏和肝脏HSP70表达及血清中CK、ALT含量的影响

目的通过研究冷拘束应激中大鼠心脏和肝脏组织热休克蛋白（HSP70）表达量以及血清中肌酸激酶（CK）、谷丙转氨酶（ALT）含量的变化,探讨冷拘束应激对心脏和肝脏的影响和差异。方法选取50日龄清洁级大鼠77只,随机分为7组,即0h,0.5h,1.0h,1.5h,2.0h,2.5h,3.0h。采用拘束冷应激法,应激相应时间后,用免疫组织化学方法观察大鼠心脏和肝脏组织HSP70的表达,并检测血清中CK和ALT含量。结果 （1）心脏中HSP70表达量随着应激时间的延长而增加,1.5h组较0h组有明显的增加（P〈0.05）,而2.0h后有极明显的增加（P〈0.01）。（2）肝脏中HSP70表达量随应激时间的延长呈缓慢增加,仅3.0h组有较明显的增加,与0h组、0.5h组及1.0h组比较有显著差异（P〈0.05）。（3）应激开始阶段大鼠血清中的CK含量迅速上升,之后平缓升高;大鼠血清中的ALT含量呈现上升趋势,2.5h以前上升较平缓,2.5h以后急骤升高。结论冷拘束应激可使大鼠心脏中HSP70的表达量和血清中CK含量在较短的时间内显著上升,且随着时间的增加而递增,而肝脏中HSP70的表达量和血清中ALT含量在较短的时间内无明显变化,只有在3.0h时才显著增加,提示心脏对冷拘束应激较敏感,而肝脏对冷拘束应激有较强的耐受性。     

Gi／0蛋白介导的信息转导通路在低氧预处理心肌保护中的作用

实验以低氧３ｈ后复氧期间心肌细胞的生存率和ＬＤＨ的释放量为指标,观察Ｇｉ／ｏ蛋白及其下游成分在低氧预处理（ｈｙｐｏｘｉｃ ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ,ＨＰ）心肌保护中的作用。与单纯低氧组相比,ＨＰ组（２５ｍｉｎ低氧＋３０ｍｉｎ复氧作为ＨＰ）细胞生存率增高,ＬＤＨ释放减少（Ｐ＜０．０１）。用ＮＥＭ预处理,能完全模拟ＨＰ的心肌细胞保护作用;而用ＰＴＸ阻断Ｇｉ／ｏ蛋白,或Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ和８－Ｂｒ     

心脏A激酶锚定蛋白AKAP概述

A激酶锚定蛋白是一组结构各异但功能相关的蛋白质.因其具有与PKA结合的特性而得名.目前研究发现AKAP除了作为A激酶锚定分子外,还是会聚和传播高度有序的细胞信号的一个平台,是细胞生命活动的重要调控者.AKAP在心肌细胞的收缩、能量代谢、离子通道的启闭、基因表达等方面均扮演重要角色.     

克氏原螯虾一种诱导型HSP70基因克隆及分析

克氏原螯虾是我国淡水虾类养殖的重要品种,具有很强的抵御各种环境胁迫和各种刺激的能力。本文以该虾为对象,通过基因克隆以及从基因水平探讨HSP70s与环境应激之间的关系,为深入研究水生无脊椎动物HSP70s功能提供基础。采用RT-PCR和RACE方法从克氏原螯虾（Procambarus clarkii）心脏组织中克隆得到一种HSP70 cDNA（scHSP70）,其全长为2271bp,包括1902bp的完整编码序列、142bp的5′及221bp的3′端非翻译区, GenBank登陆号DQ301506。基因组DNA扩增表明该基因仅由一个外显子组成。根据cDNA序列推导出scHSP70由635个氨基酸组成,分子量为69.6kD,理论等电点为5.34。该序列存在真核细胞HSP70家族的三个特征标签。SWISS-MODEL蛋白三维结构预测显示scHSP70在N端形成ATP酶结构域,在近C端形成底物肽结合结构域。克氏原螯虾在系统发生树上的进化地位与传统分类学相一致。半定量RT-PCR实验表明,scHSP70有广泛的组织分布,在心脏中表达量最高,在血液中最少。热激后该基因大量表达,说明该基因是一种诱导型HSP70。这为从蛋白水平研究克氏原螯虾HSP70与环境应激之间的关系提供基础。     

睾丸注射法制备携带山羊H-FABP基因的转基因小鼠

为探究睾丸注射法制备转基因动物的可能性,文章将携带有山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)和绿色荧光蛋白标签的重组载体经脂质体包裹后随机打点注射小鼠睾丸。对实验小鼠进行睾丸切片、精子荧光检测以及精子DNA检测,证实外源基因在亲代小鼠体内成功表达。睾丸注射后小鼠与正常母鼠交配产生的F1代,以及F1代自交产生的F2代在不同水平均可检测到外源基因的成功表达,阳性率分别为4%和30.23%。研究结果说明睾丸注射是一种制备转基因动物行之有效的方法,且外源基因可以稳定遗传。该方法的完善和成熟对于动物转基因以及动物性状改良和育种具有理论和实践意义。     

HEY转录因子的研究进展

Hey属于bHLH(碱性螺旋-环-螺旋)转录因子,具有bHLH和Orange两个结构域.Hey蛋白是Notch信号通路的直接靶基因,在发育决定中起着很重要的作用,例如神经系统、骨骼、骨骼肌、血管、心脏等的发育.研究Hey的发育调控的机制,可以帮助我们更好地理解它们的生物学功能及其在临床诊断和治疗中的重要作用.     

“心脏的结构与功能”实验改进与创新

以“心脏的结构与功能”为例,改进心脏注水实验、创设心脏内瓣膜的动态演示实验,使学生直观地观察瓣膜的动态开闭方向,进而深入理解心脏内部的血液流动方向,帮助学生认同“心脏的结构与功能相适应”这一生命观念。     

线粒体钙单向转运体在心肌低氧/复氧损伤中的作用

目的:观察线粒体钙单向转运体在心肌低氧/复氧损伤中的作用并探讨其机制。方法:应用Langendorff大鼠心脏灌流模型,低氧/复氧(H/R)采用冠脉前降支结扎30 min、复灌120 min的方法。用生物信号采集系统记录左室发展压(LVDP)、左室压最大上升/下降速率(±dP/dtmax)、左室舒张末压(LVEDP);分光光度法分别检测冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量和线粒体活性氧(ROS);TTC染色法检测心肌梗死面积。结果:与单纯低氧/复氧组相比,复氧起始给予线粒体钙单向转运体抑制剂钌红(5μmol/L)明显改善左心室各项功能指标,减小心肌梗死面积,降低线粒体ROS和冠脉流出液中LDH含量;而在复氧期起始给予线粒体钙单向转运体激动剂精胺(20μmol/L),显著升高了线粒体ROS活性,冠脉流出液中LDH含量在复氧5 min、20 min、30 min时显著增多,左心室各项功能指标与心肌梗死面积与单纯低氧/复氧组相比无显著差异。ROS清除剂MPG(1 mmol/L)与精胺联合应用则取消了精胺的作用。结论:抑制线粒体钙单向转运体可能通过减少线粒体ROS的生成减轻心脏低氧/复氧损伤。     

胆汁酸对哺乳动物心脏功能的影响及调节机制研究进展

胆汁酸作为胆固醇代谢的副产物,除具有调节脂质消化及胆固醇代谢等功能外,对心脏功能也有一定的影响。不同的胆汁酸对心脏功能的影响及作用程度不同,熊去氧胆酸对心肌细胞具有保护作用,可改善心力衰竭病人的心血管功能。牛磺胆酸及甘氨胆酸均可影响心肌细胞的收缩,使心肌细胞发生负性变时性、变力性传导作用。未成熟心肌细胞较成熟心肌细胞更易受到胆汁酸的影响。此外发现,心肌细胞上具有毒蕈碱受体(muscarine receptor,MR)及胆汁酸转运体,且胆汁酸可通过M2型毒蕈碱受体抑制心肌细胞的收缩。现就胆汁酸对心功能的影响及调节机制的研究进展从动物水平、细胞水平、分子水平做一综述。     

肌源性雌二醇在C2C12成肌细胞氧化损伤中的预防作用

该文探讨低雌激素培养环境下,机械牵张对小鼠C₂C₁₂成肌细胞内源性雌二醇(estradiol,E₂)生成的影响及潜在的抗氧化作用。研究以小鼠C₂C₁₂成肌细胞为对象,分为对照组、牵张组(15%,0.5 Hz,6 h)、H₂O₂组(400μmol/L,4 h)、牵张+H₂O₂组和芳香化酶抑制剂(200μg/m L,24 h)+牵张+H₂O₂组。所有组别均使用活性炭吸附后的FBS和无酚红的DMEM高糖培养基建立低雌激素培养环境;CCK8法检测细胞活力;Elisa法检测胞内E₂水平;WST-1法测定SOD活性;钼酸铵法测定CAT活性;比色法测定GSH-Px活性;TBA法测定MDA生成情况;Western blot检测细胞内Akt/Nrf2/HO-1蛋白表达情况。结果显示,牵张组较对照组芳香化酶活性及蛋白表达水平上升,细胞内E