MKP-1在血管紧张素Ⅱ导致心肌肥大反应中的调控作用

本研究主要从丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶 1(MKP 1)角度 ,研究丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)信号途径在血管紧张素Ⅱ介导的新生大鼠心肌细胞肥大反应中的作用及调控机制。实验以心肌细胞蛋白合成速率、蛋白含量及细胞表面积作为心肌肥大反应的指标 ,以凝胶内MBP原位磷酸化测定MAPK活性 ,以免疫印迹法 (Westernboltting)分别测定MKP 1及磷酸化p44MAPK、p42MAPK蛋白表达。结果发现 :(1)AngⅡ (10 -7mol/L)处理 48h ,心肌细胞 3H 亮氨酸掺入率、蛋白含量及细胞表面积明显增加 ,AngⅡ增加 3H 亮氨酸掺入的作用可被血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1受体 )拮抗剂CV11974(10 -6mol/L)明显抑制 (抑制 85 % ) ,被MAPK激酶 (MEK)特异性抑制剂PD0 980 5 9(5× 10 -5mol/L)部分抑制 (抑制 32 5 % ) ;(2 )CV11974或PD0 980 5 9可明显抑制AngⅡ介导的磷酸化MAPK蛋白表达及MAPK酶活性 (以γ 32 P ATP掺入表示 ) ;(3)以磷酸化MAPK蛋白表达反映MAPK活性 ,可见AngⅡ处理心肌细胞5min ,MAPK活性即开始增加 ,30min左右达到高峰 ,2h后基本恢复正常 ;而MKP 1蛋白表达 30min即见增加 ,持续 2h以上 ;(4 )用放线菌素D (actinomycinD)处理心肌细胞 30min可明显抑制MKP 1的表达 ,同时使AngⅡ致磷酸化MAPK蛋白表达时间延长至 2h以上。以上结果     

热应激对乳鼠心肌细胞损伤作用的研究

目的：探讨热应激对心肌细胞的损伤作用及其机制。方法：用胰酶消化法分离Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心肌细胞,使其暴露于３９℃、４１℃和４３℃水浴进行热应激。用生物化学法测定培养液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性的变化,用流式细胞仪（ＦＣＭ）测定心肌细胞调经的变化,用台盼蓝（ｔｒｙｐａｎ ｂｌｕｅ）染色法测定细胞坏死率的变化,用荧光分光光度法测定细胞内和培养液中活性氧（ＲＯＳ）含量的变化。结果：３９℃、４１℃、和４     

LPS诱导乳鼠心肌细胞p38蛋白激酶的激活与转位

探讨p38蛋白激酶信号传导通路在细胞中的特异性作用机制。应用共聚焦激光扫描技术观察心肌细胞中p38蛋白激酶的分布及LPS对其分布的影响。结果提示未受刺激静止的及EGF刺激的心肌细胞中,p38在胞浆和胞核中荧光强度呈散性分布。LPS刺激30分钟后,细胞核区的荧光强度明显增强,而胞浆区域的荧光强度降低,心肌细胞受LPS刺激激活后,其p38蛋白激酶由胞浆转位到胞核。     

钙与心肌缺血再灌注诱发的心肌细胞凋亡

细胞凋亡 ( Apoptosis)是最基本的细胞死亡过程 ,是一种普遍存在的生命现象。细胞凋亡与细胞增殖的动态平衡是多细胞生物维持其结构稳定及内环境动态平衡和生长发育所必有的最基本的生物学现象。不适当的细胞凋亡所致的凋亡失调性疾病( Disease of Disregulated Apoptosis,DDA)正受到人们的关注 [1]。这些疾病包括细胞凋亡减弱性疾病和细胞凋亡增强性疾病 ,前者如肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染及慢性炎症性疾病。后者包括神经元退行性疾病、造血衰竭性疾病、缺血性损伤等。在心血管系统疾病中 ,心肌梗塞、心肌缺血再灌注损伤、心肌炎、…     

心肌细胞自律性与磁场、液晶的关系及临床研究

心肌细胞的自动节律功能,一直是医学界研究的一个重要课题。笔者结合临床病理生理学,粗略地探讨了磁场、液晶、细胞生命体在自动节律性中的地位及其相互的关系。从生物磁学的角度,在磁场、液晶、生命体的层次上,又作了进一步的研讨,似乎为临床病生理研究,提供了又一较富魅力的空间。希望在临床病症研究上更具实力的人们,能够建立一个更新、更充实的操作平台。     

胚胎干细胞定向分化为心肌细胞研究进展

胚胎干细胞在体外可分化为 3个胚层的所有组织细胞。诱导人类胚胎干细胞定向分化为心肌细胞可为心肌梗死、心肌坏死等重大心脏疾病患者实施细胞治疗 ,也可作为种子细胞 ,用于构建供器官移植用的人造心脏 ;进一步可研究心肌细胞发育分化的分子机理及更直观的用于体外筛选人类心血管药物等。对人类胚胎干细胞及其定向分化为心肌细胞分子机理的研究进展及其所面临的问题作一综述。     

丹参酮Ⅱ-A磺酸钠对异丙基肾上腺素引起的心肌线粒体积蓄钙离子的保护作用

 临床报道丹参酮Ⅱ-A磺酸钠(T)对冠心病心绞痛和胸闷症状有一定疗效,并能改善缺血性心电图。药理研究证明,具有抗钙和抗钙调蛋白(CaM)作用。本文进一步研究了T对正常的和异丙基肾上腺素(Isp)兴奋的家兔心肌线粒体摄取~(45)Ca~(2+)的影响。本文制备的心肌线粒体经透射和扫描电镜检查证明形态和内部结构均正常。线粒体蛋白在0.1mg/ml以下时其钙摄取与浓度呈线性关系。Isp10~(-6)mol/L可使线粒体钙摄取提高20±5％。T在10μg/ml时对正常的和Isp兴奋的线粒体摄取钙的抑制率分别为61.2±3.9％和54.2±5.1％。已知大剂量Isp可引起心肌线粒体钙超载和细胞坏死。戊脉安可减少以上病理性损害。本文结果表明T也具有类似戊脉安的保护心肌的作用。     

心肌细胞内外离子活度,跨膜电位,肌张力的连续记录

细胞内普通玻璃微电极记录是心肌电生理学研究的常用方法之一。目前虽已能同时进行心肌张力的测量,但以往由于在标本制备、灌流、微电极技术、张力测量等方面因素的限制,微电极在细胞内的稳定时间仍是实验成功与否的关键。近年来利用离子选择性微电极对心肌进行研究,除遇到上述问题外,还由于     

培养心肌细胞内的SDH图象分析——大豆磷脂脂质体对缺血再灌心肌膜损伤的影响

琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性在判断心肌缺血,再灌性损伤中起重要作用。本文通过IBAS图象分析系统对缺血再灌的培养心肌细胞内的SDH定量评估,以求探讨大豆磷脂脂质体对心肌缺血再灌性损伤的保护作用。结果表明,在缺血及再灌组的心肌细胞内出现较强的SDH损伤性反应,大豆磷脂脂质体能明显减轻这种反应,提示大豆磷脂脂质体对缺血及缺血/再灌心肌具有明显的保护作用。     

外源性精胺对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制

目的：观察外源性精胺对缺氧所致的乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法：复制原代培养乳鼠心肌细胞缺氧损伤模型（使用pH=6.8的Hank's平衡盐溶液作为细胞培养基,排出氧气,然后在缺氧箱中培养24 h）,细胞随机分为正常对照（Control）组、缺氧（Hypoxia）组和精胺干预（Hypoxia+Sp）组。Western blot检测心肌细胞多胺代谢关键酶（ODC、SSAT）蛋白质表达;CCK-8,Hoechst 33342染色观察细胞凋亡情况;光吸收法检测细胞（或培养液）内T-SOD和Caspase-3/-9活性,MDA、GSH含量;DCFH-DA染色观察细胞内活性氧（ROS）生成。结果：与正常组相比,Hypoxia组SSAT蛋白质表达、细胞凋亡率、MDA含量以及细胞内ROS生成增加,而ODC蛋白质表达、SOD活性、GSH含量降低;与Hypoxia组比较,Sp处理可减轻上述指标的变化。结论：外源性精胺可减轻缺氧引起的乳鼠心肌细胞损伤和凋亡,其机制与恢复多胺稳态和清除活性氧有关。