应用微量玻片凝胶双扩散技术鉴定马铃薯卷叶病毒

应用常规免疫双扩散不能鉴定马铃薯植株中的卷叶病毒(PLRV)。我们用微量玻片凝胶双扩散技术对马铃薯植株汁液中的PLRV进行了鉴定。试验说明,用这种方法可测出马铃薯茎的汁液最高稀释度为1:4,微量玻片凝胶双扩散与普通免疫双扩散灵敏度的比较试验表明,两者可测出提纯PLRV的最低浓度分别为1μg/ml和6μg/ml,但后者不能测出植物汁液中的PLRV。微量玻片凝胶双扩散是目前能够用于检测感病植物汁液中PLRV的最简便易行和可靠的血清学方法。     

提高制备转基因小鼠效率的研究

目的提高制备转基因动物的效率.方法着重对注射DNA的制备,高质量受精卵的获得,显微注射及胚胎移植各步骤中的主要影响因素进行了优化.结果移植后出生的小鼠经PCR及Sonthern-Blot检测,从最初的146只仔鼠中检测到2只阳性鼠,提高到由34只仔鼠中检测到10只阳性鼠,阳性鼠概率由1.4%基本稳定增加到30%.结论通过技术改良后,转基因效率得到明显提高,为从事转基因动物方面的研究建立了稳定的技术平台.     

一种适宜微量全血检测HBV—DNA裂解液的评价

通过核裂解液与氯仿／酚处理法以及与另四个生产厂家的裂解液对指法全血处理法的比较,检测ＨＢＶ－ＤＮＡ的结果表明：该裂解液可更有效除去全血中对Ｔａｑ酶有抑制性作用的血卟啉、扩增结果与用血清作标本结果一致,表明指尖全血用这种裂解液处理完全替代血清标本用于ＨＢＶ－ＤＮＡ的ＰＣＲ检测。     

水稻转录因子WRKY42的转录、表达及其与W-box的结合特征分析

WRKY是植物中最大的转录因子家族之一.本文对水稻WRKY42基因的转录分析发现,该基因在水稻苗期和花药中转录,其蛋白质可在各时期的叶片中检测到.在Xa21介导的抗白叶枯病过程中,接菌后期可检测到明显的诱导表达条带,比较其在抗、感和对照反应中的表达丰度发现,在抗、感反应中的表达相似但均明显大于对照反应,推测WRKY42蛋白质在水稻-白叶枯病菌互作反应中发挥作用.我们克隆并在细菌中表达了WRKY42蛋白质,采用微量热泳动(microscale thermophoresis)技术,调查了WRKY42与病程相关基因PR1a和PR1b启动子区顺式元件W-box的互作,发现它们之间可发生特异结合,其解离常数分别为73.3μmol/L和58.3μmol/L.上述数据提供了WRKY42调控下游基因的直接证据,支持WRKY42在水稻抗病过程中发挥作用.文章提出了WRKY转录因子在水稻与白叶枯病菌互作过程中的作用模式.     

尿微量白蛋白ELISA诊断试剂盒稳定剂效果研究

目的:观察尿微量白蛋白诊断ELISA试剂包被稳定剂和酶结合稳定剂的效果。方法:定期检测分别保存于37℃和4℃的尿微量白蛋白试剂盒,并对其稳定性进行评估。结果:该尿微量白蛋白诊断试剂包被稳定剂和酶结合稳定剂可以使尿微量白蛋白试剂盒在2~8℃条件下放置6个月以上。     

应用引物延伸预扩增提高微量DNA拷贝数

采用引物延伸预扩增方法 ,可普遍提高微量模板DNA的拷贝数 ,便于进行基因分析时克服标本量少、来源困难的制约。采用常规扩增、检测 2 4 8bp的DYZ1片段体系为观察对象 ,其最小模板量需 1.5ng/2 0 μl体系。以 15个碱基随机寡核苷酸为引物 ,对最小模板量进行预扩增 ,再以其产物 1/10为模板 ,特异扩增DYZ1片段。进行相对定量分析 ,判断原模板DNA拷贝数增加的程度。结果 1.5ng男性DNA经随机扩增后 ,此DYZ1片段拷贝数增加了 10倍以上 ,大大地提高了特异DNA片段扩增的模板量。表明经随机引物延伸预扩增后 ,微量标本DNA片段拷贝数获得普遍提高 ,增加了微量DNA扩增的敏感度     

优化黄姜中甾体皂甙元测定的研究

对传统的黄姜中甾体皂甙元的测定方法进行了改进。提取甾体皂甙元时采用微量样品以氯仿浸提代替传统的回 流抽提法,以Liebemann-Barcharad试剂显色,用分光光度法测定。测定结果准确,高效低成本且步骤简单,应用广泛。     

糖尿病肾脏病与血纤溶酶原激活物抑制剂-1的相互影响

目的:观察糖尿病肾脏病进展过程中血纤溶酶原激活物抑制剂-1的水平变化及应用药物干预其变化后产生的对糖尿病肾脏病的影响。方法:选择于聊城市人民医院就诊的糖尿病肾脏病患者88例,DKDⅢ期43例,DKDⅣ期45例。分别检测各期患者血PAI-1水平,观察其变化趋势。针对DKDⅢ期患者分为对照组(DKDⅢ-C组)和观察组(DKDⅢ-O组),对照组给予常规降糖、保护肾脏及血管紧张素转化酶抑制剂等药物治疗。观察组在对照组治疗的基础上给予尿激酶5万U加入100ml生理盐水静脉滴注,每天1次,共14d。比较两组治疗前后血PAI-1水平、24 h尿白蛋白量、血肌酐、空腹血糖和凝血酶原时间的变化。结果:DKDⅣ期患者血PAI-1水平明显高于DKDⅢ期患者(P<0.001)。DKDⅢ-O组患者治疗后血PAI-1水平下降(P<0.01),且尿白蛋白减少程度有统计学意义(P<0.01),空腹血糖、血肌酐、凝血酶原时间影响无统计学差异(P>0.05)。DKDⅢ-C组治疗前、后血PAI-1、24h尿白蛋白量、空腹血糖、血肌酐、凝血酶原时间变化均无统计学差异(P>0.05)。结论:随糖尿病肾脏病进展,血PAI-1水平呈上升趋势,应用药物降低其水平后可减少早期DKD患者尿白蛋白量,对保护肾功能、延缓肾脏病进展有积极意义。     

血清胱抑素C和尿微量白蛋白在慢性肾小球肾炎早期肾功能损害评估中的意义

目的:探讨血清胱抑素C和尿微量白蛋白在慢性肾小球肾炎早期肾功能损害评估中的意义。方法:选取2010年9月至2013年7月我院收治的86名慢性肾小球肾炎患者,设为观察组。另选取同期在我院体检的年龄、性别等资料与之匹配的66名健康者设为对照组。分别对患者的CysC以及mALB的含量进行测定,并进行统计分析。结果:观察组和对照组的Cys C含量分别为(2.68±1.19)mg/L、(0.83±1.04)mg/L,观察组明显高与对照组;mALB的含量观察组为(38.16±4.25)mg/L,相比于对照组的(6.87±3.93)mg/L明显升高;Cys C及mALB阳性指标的检出率分别为75.58%、76.74%,而Cys C与mALB进行联合检测,检出率为91.86%,相比于单指标的检出率明显提高。差异具有统计学意义(P0.05)。通过对慢性肾小球肾炎患者的两项指标进行相关性分析,发现血清Cys C和尿mALB的含量呈显著的正相关(r=0.941,P0.05)。结论:将CysC与mALB相结合检测用以对慢性肾小球肾炎患者早期肾功能损害进行评估,检出率和敏感性均明显高于单指标检测。     

用微量升华法鉴定僵蚕

首次用微量升华法证明了药材白僵蚕中含有大量的具有升华性质的化合物,在显微镜下呈现霜花状结晶。这为白僵蚕的鉴定研究增添了新内容。