放线菌环二肽类活性天然产物生物合成研究进展

环二肽(cyclodipeptide,CDP)是一类由2个α-氨基酸缩合而成的最小环肽分子,也可称为二酮哌嗪类化合物(diketopiperazines,DKPs)。CDP具有稳定的DKP环状骨架结构,活性广泛而显著,药用前景良好,发掘意义重大。放线菌是重要的CDP生产菌,同时具有非核糖体肽合成酶(nonribosomal peptide synthetase, NRPS)与环二肽合酶(cyclodipeptide synthase, CDPS)两种DKP骨架合成催化酶,并从中发现多种骨架结构修饰酶,研究开发价值巨大。本文系统介绍了放线菌CDP类活性化合物的DKP骨架合成途径及其结构修饰机制两方面的研究工作,以期为新型CDP类天然产物的发掘、新颖CDP分子生物合成机制的阐明及合成生物学设计与应用等领域的研究与实践提供参考。     

洋葱鳞茎茎肉细胞原生质体胞质骨架的荧光和电子显微镜观察

结合ＴｒｉｔｏｎＸ－１００选择性处理,使用ＴＲＩＴＣ－Ｐｈ探针标记和整装电子显微镜技术研究了洋葱鳞茎茎肉细胞原生质体胞质骨架的结构与形态。所研究细胞的细胞质中有丰富的的蛋白质纤维,这些蛋白质纤维缰直而分支,相邻的纤维之间存在有联丝。它们或平行地排列,或相互缠绕交织在一起构成一个复杂的立体网络。网络系统保持球形,细胞核位于网络的一侧,并与网络内的蛋白质纤相连,向外,网络系统中的纤维与质膜上的结合位点     

银杏花粉微管蛋白的纯化及鉴定

采用丙酮粉抽提,ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－５０、Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－３００、ＭｏｎｏＱ柱层析,从银杏花粉中分离纯化出微管蛋白,其两个亚基的分子量分别为５４ｋＤ和５２ｋＤ纯化的微管蛋白可与鸡脑微管蛋白抗体发生免疫交叉反应。     

体外细胞核组装中核纤层与核膜的关系

采用非洲爪蟾卵提取物非细胞体系,以外源Lambda DNA诱导细胞核的体外组装,以此实验模式为基础,研究了细胞核体外组装过程中核纤层的组装,结果表明核纤层蛋白参与细胞核的体外组装过程,核内骨架的组装与核纤层的组装在时间上是有序的,核内骨架的组装可能为核纤层的装配提供了先决条件.在非洲爪蟾卵提取物非细胞体系中加入抗核纤层蛋白抗体,抑制核纤层的正常装配过程,核膜组装发生异常.结果提示核纤层的组装与核膜的组装是密切相关的.     

小鼠胚胎干细胞(ES-M_(13))核骨架-核纤层-中间纤维结构体系的研究

本文使用细胞的选择性抽提、DGD包埋去包埋电镜制样、免疫荧光和免疫印迹技术研究了小鼠胚胎干细胞(ES-Ml_(13))的核骨架-核纤层-中间纤维(NM-L-IF)结构体系。在电镜下可以看到,ES细胞存在精细发达的核骨架结构,核骨架纤维同核纤层结构相连接,细胞质中有许多直径为10nm的中间纤维单丝。在免疫荧光分析中,使用角蛋白单克隆抗体有阳性反应,细胞质区域可以看到较强的荧光,没有极性分布现象,也没有观察到纤维状的荧光染色。ES细胞对波形蛋白和结蛋白抗体呈阴性反应,同对照组一样,只能看到非特异性的很微弱的荧光染色。在免疫印迹分析中,使用角蛋白单克隆抗体AF6检测到三条角蛋白多肽,分子量分别为65KD,62KD和52KD。     

苏联猛犸象的研究

猛犸象(Elephas primigenius)是最著名的动物化石之一。在欧洲,西伯利亚,中国北部以及其他区域内的许多地方,都曾发现过大批这种动物的遗体,而且它们的庞大的躯体与奇特的形状早就吸引了人们的注意。此外,在亚洲及欧洲的冻土带内,曾发现过这种动物的,连皮,肉和毛都保存着的完整的尸体。古代极北地区的居民,当他们发现了这些由于海岸崩裂而从地下深处露出来的尸体后,曾企图寻求关于这些奇怪动物的外貌的解释。在耶库     

微丝骨架动态参与花粉萌发的研究

利用改进的Alex-phalloidin活细胞染色方法和激光共聚焦显微镜技术,观察川百合(Lilium davidii Duch)花粉原生质体极性形成及萌发过程中微丝骨架的列阵变化.结果表明,花粉原生质体从贮存状态,经过水合、极性形成至萌发花粉管,其微丝结构从短小的梭形体,经过形成均匀的网状结构、向细胞边缘汇集的平行排列的束状结构,逐渐变成多层连续环绕细胞的微丝束结构.用酪氨酸磷酸酶抑制剂苯胂化氧(PAO)处理花粉原生质体,在微丝的汇合处,肌动蛋白聚集成小的团块,花粉的萌发受到抑制;而利用酪氨酸磷酸激酶抑制剂genistein处理细胞,微丝结构的列阵变化与对照相似.结果说明,在川百合花粉萌发过程中,有某种酪氨酸磷酸酶参与了反应.     

红细胞膜蛋白与膜骨架

近10多年红细胞膜领域的研究取得了可观的进展,在红细胞膜蛋白的结构-功能相关和相互作用以及红细胞膜障碍多方面都有新的发现和开拓．现主要就国内外有关报道作一扼要综述,涉及红细胞膜蛋白的组成、功能及其相互作用,红细胞膜骨架和红细胞膜蛋白疾病等研究进展．