全文获取类型
收费全文 | 2394篇 |
免费 | 167篇 |
国内免费 | 1664篇 |
出版年
2024年 | 29篇 |
2023年 | 126篇 |
2022年 | 132篇 |
2021年 | 131篇 |
2020年 | 129篇 |
2019年 | 128篇 |
2018年 | 81篇 |
2017年 | 89篇 |
2016年 | 111篇 |
2015年 | 132篇 |
2014年 | 166篇 |
2013年 | 131篇 |
2012年 | 159篇 |
2011年 | 148篇 |
2010年 | 138篇 |
2009年 | 160篇 |
2008年 | 186篇 |
2007年 | 159篇 |
2006年 | 131篇 |
2005年 | 137篇 |
2004年 | 141篇 |
2003年 | 124篇 |
2002年 | 138篇 |
2001年 | 113篇 |
2000年 | 85篇 |
1999年 | 104篇 |
1998年 | 97篇 |
1997年 | 93篇 |
1996年 | 86篇 |
1995年 | 81篇 |
1994年 | 70篇 |
1993年 | 64篇 |
1992年 | 75篇 |
1991年 | 63篇 |
1990年 | 69篇 |
1989年 | 84篇 |
1988年 | 17篇 |
1987年 | 31篇 |
1986年 | 18篇 |
1985年 | 38篇 |
1984年 | 15篇 |
1982年 | 1篇 |
1981年 | 3篇 |
1980年 | 2篇 |
1966年 | 2篇 |
1963年 | 3篇 |
1958年 | 1篇 |
1957年 | 1篇 |
1954年 | 1篇 |
1953年 | 1篇 |
排序方式: 共有4225条查询结果,搜索用时 31 毫秒
61.
在硅胶G薄层板上用氯仿:1,2-二氯乙烷:甲醇:氨水为展开剂分离中草药复方曲氏传药中生物碱,并有和改良碘化铋试剂显色后对其中的乌头碱进行直接扫描测定。此法简便、快速、准确、灵敏且稳定。 相似文献
62.
酪氨酸羟化酶基因载体-pCMVTH 质粒的构建及在大鼠骨骼肌内的表达 总被引:4,自引:0,他引:4
为用转基因方法治疗巴金森氏病大鼠模型,本研究采用分子克隆技术,将合成多巴胺的关键酶-酪氨酸羟化酶(TH)的基因,克隆进入以巨细胞病毒CMV为启动子的载体质粒内,经限制性内切酶定位分析证实该重组的DNA质粒的可靠性。携带TH基因的PCMVTH质粒以LIPO-FECTIN介导,在培养的原代骨骼肌细胞中高效表达。本研究为进一步用转基因的细胞植入脑内以治疗巴金森氏病打下一定基础。 相似文献
63.
尹翠凤 《微生物学免疫学进展》1995,23(4):220-226
由于B群脑膜炎奈瑟氏球菌的荚膜多糖成份不能提供有效的免疫保护力,人们把希望寄托在脑膜炎球菌的蛋白成份上。目前人们对该菌在限铁环境中表达的一类新的蛋白成份—铁调蛋白研究较多。铁调蛋白已知有6类:FeRP-70铁结合蛋白,转铁结合蛋白1(TBP1),转铁结合蛋白2(TBP2),乳铁结合蛋白及血红素结合蛋白。其中研究比较清楚的是FeRP-70及TBP1、TBP2。TBP1是跨膜蛋白,部分暴露于细胞表面。TBP2是外膜蛋白,由N末端的类脂尾巴锚合在膜上。二者均为脑膜炎球菌铁吸收所必需。TBF1及TBP2在分离层析时往往以复合体的形式一同被纯化,该复合体能诱导保护性抗体的产生,并能提供一定的保护力。进一步的实验证实了TBP2的免疫原性。FeRP-70也为铁吸收所必需,并有菌株特异的抗原保护性。TBP1、TBP2、FeRp-70及其它一些胞内蛋白有机组成了脑膜炎球菌的一条吸收铁的路径,而TBP2则有希望成为脑膜炎球菌的新型菌苗抗原成份。 相似文献
64.
妥布霉素产生菌诱变育种的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本实验以妥布霉素产生菌黑暗链霉菌(S.tenebrarius)ATCC17920为出发菌株,经紫外线处理,获得一株产量较高且稳定的菌株UV-59,其抗生素效价比原株提高92.3%对UV_59菌株进行高温处理,得到一株T-541菌株,所产抗生素只有两个组分,比原出发株减少一个组份,不再含有出发株产生的氨甲酸卡那霉素;再对T-541菌株进行原生质体制备,分别用紫外线和紫外线加氯化锂以及亚硝基胍诱变处理原生质体,获得四株高产菌株,效价比原株提高115~150%,且稳定。此外还研究了变异菌株的形态与产量的关系。 相似文献
65.
地衣霉素对细胞膜表面运铁蛋白受体功能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
应用抑制糖蛋白N-糖链合成的地衣霉素处理SMMC-7721人肝癌细胞,3H甘露糖掺入实验显示细胞膜表面糖蛋白N-糖链的合成受到显著抑制,但细胞膜表面运铁蛋白受体内吞再循环的过程无显明变化,进一步的研究表明受体与运铁蛋白的亲和力亦无改变,但细胞膜表面运铁蛋白受体数减少。结果提示用地衣霉素处理细胞后,在内质网合成的无N-糖链的运铁蛋白受体影响其运输到细胞膜表面表达。 相似文献
66.
细脚拟青霉菌菌种保藏与复壮 总被引:1,自引:0,他引:1
细脚拟青霉菌在人工培养条件下容易退化。通过菜粉蝶虫体的人工接种感染后再分离,可使其复壮。人工诱发感病的菜粉蝶蛹在4℃条件下保藏期长,不易退化。温度处理试验表明,31-35℃处理1小时有刺激菌丝生长的作用。 相似文献
67.
葡萄霜霉病离体接种方法的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
用葡萄霜霉菌孢子囊悬浮液接种于葡萄叶盘,一般接种后3-4天,叶盘上可见孢子囊,接菌后5-6天,侵染率可达95-100%。 相似文献
68.
诺卡氏菌属GS-17(Nocardia sp.GS-17)的耐热茁霉多糖酶(Pullulanase EC.3.2.1.41)的粗酶液经中空纤维柱超滤浓缩、羟基磷灰石柱层析和Pullulan-Sepharose 6B亲和层析,得到凝胶电泳均一的纯酶,比活提高264倍.酶作用最适温度为55℃,最适PH6.2,分子量140000,等电点pI为6.0.该酶水解茁霉多糖、支链淀粉和可溶性淀粉,但不水解糖原.酶在50℃作用于茁霉多糖的米氏常数K_m为0.90mg/ml,最大反应速度V_(max)为57μmol·min~(-1)·mg~(-1).Zn~(2 )、Fe~(3 )、Hg~(2 )、Cu~(2 )、Pb~(2 )和环状糊精对酶有抑制作用,Ca~(2 )对酶有激活作用.经蛋白质侧链化学修饰研究表明,色氨酸残基位于酶的活性位区.该酶是由1129个氨基酸残基组成的单肽链,酶的N末端序列经测定为:Ala-Gly-His-Gly-Pro-Asp-Val-Gln-Asp-Gly- 相似文献
69.
采用Rotofor等电聚焦和分子筛技术纯化大肠杆菌表达的重组链激酶(r—SK),其纯度为97%。比活性1×106IU/mg,回收率41%。分析所纯化的r—SK N端氨基酸顺序证实其1—15个氨基酸顺序与SK基因的核苷酸顺序所示3联密码子一致。以纯化r—SK为抗原,通过杂交瘤技术构建了分泌抗r—SK单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞(4D11),该McAb属IgG1亚型.特异地作用于r-SK和C组口溶血性链球菌分泌的SK。用底物显色法测定该McAb可抑制SK对纤溶酶原的激活。Western blot法证实该McAb能识别分子量为16 250Da的r—SK的CNBr裂解片段。推测SK蛋白中第71残基至第237残基间的氨基酸顺序参与SK与纤溶酶原的结合。 相似文献
70.
利用鸡马立克氏病病毒(MDV)1型特异单克隆抗体H19致敏Sepharose 4B—cNBr,从感染重组病毒BP38Ⅱ的昆虫细胞中提纯鸡马立克氏病毒pp38基因重组产物,获得良好效果。提纯的蛋白质在SDS—PAGE中表现出一条分子量约为38kDa的蛋白质条带,在免疫印迹试验中该蛋白质条带也能被单克隆抗体H19识别。利用该提纯的重组pp38免疫小鼠,所制备的小鼠抗血清在免疫荧光染色试验中不仅能与感染重组病毒的昆虫细胞Sf9反应,也能和Ⅰ型MDV型感染的鸡胚成纤维细胞反应。 相似文献