小鼠胰腺大部分切除后再生集中区来源的初步探索

目的：探讨胰腺在某些损伤或病理条件下,由于细胞活跃增殖产生再生集中区域的细胞来源。方法：将27只成年ICR系小鼠分为9组,每组3只,其中1组进行假手术,其余8组进行小鼠胰腺大部分切除,分别在切除后12h,24h、36h、48h、3d、5d、7d、10d取材及冰冻切片,采用H-E染色、免疫荧光染色方法检测损伤后各时间段胰腺组织的形态变化和细胞增殖率。结果：H-E染色发现,胰腺手术72h后,剩余胰腺中就出现由细胞角蛋白阳性导管样结构组成的再生集中区,此区域细胞随后分化为功能性细胞类型,10d后消失检测不到。对胰腺再生集中区的定位研究表明,它们仅出现于切除后的伤口边缘。BrdU标记表明,胰腺再生集中区为细胞快速增殖区域,其出现与总导管增殖率提高同时发生,主/大导管和小导管增殖率上升都晚于再生集中区的出现。结论：小鼠胰腺大部分切除后再生集中区可能来源于腺泡细胞的快速增殖,而不是经由总-主/大-小导管-快速增殖区这一途径引起的来源于导管上皮细胞。     

子宫特殊部位妊娠18 例分析

目的:探讨子宫特殊部位妊娠的临床诊断及处理。方法:回顾性分析2005年7月至2010年12月我院收治的18例子宫特殊部位妊娠患者的临床表现、诊断、处理及预后。结果:宫颈妊娠6例、宫角妊娠6例、残角子宫妊娠2例、子宫剖宫产瘢痕处妊娠4例。宫颈妊娠通过子宫动脉介入栓塞后清宫术治愈;宫角妊娠经MTX保守治疗后在超声或宫腔镜引导下清宫术痊愈。残角子宫妊娠均行残角子宫切除术治愈。子宫剖宫产瘢痕处妊娠根据分型分别行超声引导下清宫+水囊压迫、局部注射MTX保守治疗治愈。结论:子宫特殊部位妊娠病情凶险,临床表现各异,但有其特异性,超声辅助检查有助于早期诊断,MTX、子宫动脉介入栓塞治疗后刮宫是有效治疗手段。     

胰腺创伤的诊断和治疗进展

胰腺创伤的早期诊断是根据详细的询问病史、全面的体格检查,结合淀粉酶指标、B超、CT扫描、逆行胰胆管造影(ERCP)及磁共振下胰胆管成像(MRCP)等检查做出诊断,必要时应及时行剖腹探查,剖腹探查术是最可靠的早期诊断方法。依据损伤部位及严重程度,选择最佳的手术方式,可提高治愈率,减少并发症的发生,通畅引流是改善预后的关键措施,本文对胰腺创伤的诊治进展作一综述。     

通过G418 处理离体纯化小鼠胰腺上皮细胞

目的:探索一种能有效去除成纤维细胞,筛选有较强增殖能力上皮细胞的方法。方法:本研究利用成纤维细胞对G418敏感的特性,在成体小鼠胰腺细胞分离后,采用悬浮细胞直接接种到含30μg/mL G418的培养基中,或细胞贴壁生长汇合至50-70%后用30至100μg/mL之间不同浓度G418处理24h、48h或72h两种方案进行上皮细胞的纯化。结果:在直接接种法培养处理中,存活的大部分细胞为成纤维细胞,上皮细胞的生长受到抑制,无法得到纯化的胰腺上皮集落;而在细胞贴壁生长汇合至50-70%后经G418处理,成纤维细胞随着处理浓度的增加死亡率也在逐渐上升,其中50μg/mL G418处理72小时对去除成纤维细胞效果最佳。结论:G418处理能够有效去除成纤维细胞,分离纯化出一群在离体条件下具有强增殖能力、形成大上皮细胞集落的细胞。该分离纯化方法为今后进一步研究成体胰腺干/祖细胞增殖与分化调控机制等问题奠定基础。     

胰腺α-细胞可以自发变成β-细胞

胰腺中产胰岛素的β-细胞寿命很长,在健康条件下β-细胞几乎终生不复制。然而在代谢增强以及β-细胞受到损伤时它可以表现自我复制。在β-细胞几乎完全被去除的转基因小鼠模型的研究中发现,α-细胞可以自发变成β-细胞,这一发现让试验者看到了糖尿病可能的治疗新方法:通过差异化环境在体外生成β-细胞,或在体内诱导β-细胞再生。     

PanK4 inhibits pancreatic beta-cell apoptosis by decreasing the transcriptional level of pro-caspase-9

Dear Editor： Coenzyme A （CoA） is a primary and predominant acyl group carrier involved in a wide variety of important biochemical processes. The CoA biosynthetic pathway is composed of five enzymatic steps, of which Pantothenate kinase （PanK） is a key regulatory enzyme. The multiple isoforms of PanK are encoded by four different genes [1,2]. In our previous studies of SNP markers by genotyping the case-controlled DNAs, we found that one SNP within the hPANK4 gene on chromosome 1 was associated with type 2 diabetes [3-5]. We subsequently showed that rat PanK4 （rPanK4） was up-regulated when rats were challenged by high concentration of glucose [6]. M2-type pyruvate kinase （Pkm2） was found, both in vitro and in vivo, to be associated with rPanK4 [7]. These data suggest that PanK4 may have a role in diabetes pathogenesis. The development of type 2 diabetes is due partly to the loss of the pancreatic β-cell mass, therefore the secreted amount of insulin is insufficient to maintain the glucose homoestasis [8]. In the present study, we evaluated the effect ofrPanK4 on β-cell apoptosis. We aimed to determine the potential ofrPanK4 gene in β-cell apoptosis induced by the cytotoxic agent streptozotocin （STZ）.[第一段]     

miR-124a在胰腺发育及疾病中的作用

microRNA(miRNA)是一类长度为18~25个核苷酸非编码小分子RNA,广泛存在于真核生物中并高度保守,主要参与基因转录后调控。miR-124a在中枢神经系统和胰腺中含量最为丰富,在其他器官中的表达量约低100倍。近年研究显示,miR-124a参与胰腺发育、生理及病理多种过程的调节,包括:(1)通过阻断TGFβ途径诱导人胎盘间充质干细胞向胰腺祖细胞方向分化(2)靶向调控Foxa2、iGluR等与胰岛激素分泌相关的重要转录因子,介导胰岛激素的释放(3)通过与下游靶基因Rac1的相互作用在胰腺癌细胞生长,侵袭和转移中起关键作用(4)通过调控CHSY1及其下游靶点CASP1的表达水平参与慢性胰腺炎CP的发生等。研究miR-124a对于深入了解胰腺发生及疾病机理及其治疗具有重要意义。     

视黄酸促进限定性内胚层细胞向胰腺前体细胞分化

研究视黄酸（RA）在限定性内胚层细胞向胰腺前体细胞诱导过程中的最佳作用方式。在无饲养层培养体系下联合多因子分阶段诱导经历10天时间获得胰腺前体细胞。获得的细胞不仅表达胰腺前体细胞的标记pdx1,但是也同时表达肝脏前体细胞的标记afp。有研究表明在胰腺特化过程中RA能起到抑制afp的作用,因此在不同的时间点添加RA并持续不同的作用时间来调节内胚层细胞向肝胰分化的命运。收集d7到d10的细胞用免疫组化和RT—PCR检测pdx1和afp的表达情况。结果显示RA从d3开始持续作用到d10可以获得更高的pdx1阳性细胞同时能有效的抑制afp的表达,并且在d9可以获得最高比率的pdxl阳性细胞,提示RA持续作用促进限定性内胚层细胞向胰腺前体细胞分化。