Cloning, expression and identification of a new trehalose synthase gene from Thermobifida fusca genome

Trehalose is a disaccharide with two glucose mole-cules linked in an α,α-1,1-glycosidic linkage. The onlyreducing group in each of its glucose molecules has beenused up for the formation of α,α-1,1-glycosidic linkage,therefore trehalose is a nonreducing disaccharide withhigh stability against the disruption caused by such factorsas temperature and extreme pH of environment [1]. Ithas been well established that many organisms will copewith external stress conditions by increasing the levelo…     

棉花MADS框基因GhMADS3的克隆及其组成型表达对烟草花器官决定的影响

MADS框基因在植物花器官发育中发挥着关键性作用。为研究棉花花器官发育的机理,以徐州142花蕾为材料,利用EST数据库资料,通过EST序列整合,克隆出了一个MADS域蛋白的编码区段,GenBank登录号为AY083173。该片段(GhMADS3)包含一个732 bp的开放阅读框,推导的氨基酸序列(244氨基酸)与可可,黄瓜,烟草,矮牵牛,金鱼草等的AG亚家族基因的序列相似性高。进化树重建分析将GhMADS3基因归入MADS框基因AG亚家族C功能分支的euAG分支。RT-PCR分析显示,该基因在雄蕊和心皮中表达,在根、茎、叶等营养器官,萼片,花瓣,花器官变异体chv1(所有花器官均变为苞叶状器官)的花蕾中不表达。将GhMADS3与35S启动子融合构建成嵌合基因转化烟草,转基因烟草植株花朵出现萼片(轮1)向心皮,花瓣(轮2)向雄蕊的转变,花器官表现明显的白化倾向。同时,在轮1观察到丝状结构的出现,该结构在此前类似的研究中尚无报道。这些结果说明,实验中克隆了一个有生物学功能的棉花的AG亚家族MADS框基因,该基因可能在棉花花器官发育中有重要的功能。     

输尿管镜钬激光碎石术与开放手术对输尿管上段结石患者氧化应激和炎性因子的影响

目的:探讨输尿管镜钬激光碎石术与开放手术对输尿管上段结石患者氧化应激和炎性因子的影响。方法:选取2015年8月～2018年9月期间安徽省中医药大学第一附属医院收治的输尿管上段结石患者117例为研究对象,根据手术方式的不同将患者分为对照组(n=58,开放手术)和观察组(n=59,输尿管镜钬激光碎石术),比较两组患者的治疗效果、氧化应激指标以及炎性因子指标变化情况,观察两组术后并发症发生情况。结果:两组患者结石清除率、结石复发率比较无差异(P0.05),观察组手术、术后下床、住院的时间均明显短于对照组,术中出血量少于对照组(P0.05)。两组患者术后3d、术后7d丙二醛(MDA)、皮质醇(Cor)水平均高于术前,且先升高后降低(P0.05),超氧化物歧化酶(SOD)水平低于术前,且先降低后升高(P0.05),术后3d、术后7d观察组MDA、Cor水平低于对照组,SOD水平高于对照组(P0.05)。两组患者术后3d、术后7d白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均高于术前,且先升高后降低(P0.05),术后3d、术后7d观察组IL-2、IL-6、TNF-α水平低于对照组(P0.05)。观察组术后并发症发生率低于对照组(P0.05)。结论:输尿管镜钬激光碎石术治疗输尿管上段结石安全有效,同时还可改善临床指标,减轻机体氧化应激与炎性应激反应。     

单侧外固定架对胫腓骨严重开放性骨折的临床疗效

目的:探讨单侧外固定架对不同部位胫腓骨严重开放性骨折的临床治疗效果及关节恢复功能情况。方法:回顾性分析我院自2013年1月至2015年1月共收治胫腓骨严重开放骨折行单侧外固定术治疗患者,根据骨折部位的不同将所有病例分为三组,A组12例,为胫腓骨近端骨折或波及膝关节,固定时需要跨膝关节固定,B组30例,为胫腓骨中段骨折,固定时不跨关节,C组18例,为胫腓骨远端骨折或波及踝关节,固定时需跨踝关节固定。分别对其进行单侧外固定架手术治疗,术后对所有患者骨折愈合情况及膝、踝关节活动度统计,对比观察各组手术疗效。结果:所有手术均获得成功,无不良事件发生,A组下肢功能优良率为83.3%;B组为96.7%;C组为83.3%。下肢功能恢复情况B组与A、C组相比差异具有统计学意义(P0.05),A组与C组相比差异无统计学意义(P0.05)。A组膝、踝关节功能恢复优良率分别为膝66.7%,踝91.7%;B组为膝93.3%,踝96.7%;C组为膝94.4%,踝72.2%。膝关节功能恢复情况A组与B、C组相比差异具有统计学意义(P0.05),B组与C组相比差异无统计学意义(P0.05)。踝关节功能恢复情况C组与A、B组相比差异具有统计学意义(P0.05),A组与B组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论:单侧外固定架对不同部位胫腓骨严重开放性骨折的治疗效果良好,关节恢复情况满意,值得临床推广。     

基于新课标课堂教学有效性视角下高中语文现代文阅读教学模式探究

本文从当前高中语文现代文阅读教学问题及误区分析出发,包括对高中语文现代文阅读教学理解错误及课堂教学误区以及对高中语文现代文阅读内容缺乏切身体会及课堂教学误区两个方面。然后就基于新课标课堂教学有效性视角下高中语文现代文阅读教学具体对策搭建进行了全面、深入的论述,涵盖了以学生为本、贯彻"分层教学、分类辅导、分组讨论"教学模式,提升课堂教学效率及坚持教学反思,强化自我评价三个方面的内容。其主要的写作目的在于为提高今后高中语文现代文阅读课堂教学的有效性提供参考。     

p57与同源框基因HOXA10在子宫内膜基质细胞体外蜕膜化过程中的表达

本文旨在从mRNA和蛋白水平研究子宫内膜基质细胞(endometrial stromalcell,ESC)体外蜕膜化过程中p57和同源框基因HOXA10(homeobox A10 gene)的表达变化以及HOXA10的亚细胞定位,从而推测其在蜕膜化过程中的作用。本实验联合使用0.5mmol/L8-溴-cAMP和1×10?6mol/LMPA(medroxyprogesterone acetate)作用1、2、4d(D1、D2、D4)诱导ESC发生蜕膜化,相应时间点提取mRNA和蛋白质行半定量RT-PCR和免疫印迹,同时以2%低血清培养ESC1、4d作为对照(C1、C4)。用间接免疫荧光和基因转染的方法,观察蜕膜化过程中HOXA10的亚细胞定位。结果显示:(1)蜕膜化过程中HOXA10的表达进行性下降,D2开始与对照组(C4)比较具有显著性差异(P<0.05)。(2)相反,蜕膜化过程中p57的表达进行性上升,D2开始与对照组C4比较也有显著性差异(P<0.05)。(3)低血清培养ESC1、4d后,p57和HOXA10的表达没有显著性差异(P>0.05)。(4)蜕膜化过程中HOXA10始终定位于胞核,不发生胞浆胞核穿梭。以上观察结果表明:(1)p57的高表达是ESC脱离细胞周期走向分化的因素之一。(2)HOXA10的低表达可能是p57上调的原因之一。(3)孕激素受体(progesterone receptor,PR)途径参与了促进ESC脱离细胞周期而走向分化的过程。     

LncRNA MALAT1在视网膜母细胞瘤组织中的表达及靶向miR-145-5p/SOX9轴对Y79细胞生物行为的影响

该文旨在探讨长链非编码RNA(LncRNA)肺腺癌相关转录本1(MALAT1)在视网膜母细胞瘤(RB)组织中的表达情况,及靶向微小RNA(miRNA)-145-5p/性别决定区Y框蛋白9(SOX9)轴对Y79细胞生物行为的影响。qRT-PCR检测RB组织和Y79细胞中MALAT1、miR-145-5p、SOX9mRNA相对表达量;荧光原位杂交(FISH)实验、双荧光素酶报告基因实验验证MALAT1、SOX9与miR-145-5p的靶向关系;将Y79细胞分为sh-NC组、sh-MALAT1组、sh-MALAT1+miR-NC组、sh-MALAT1+miR-145-5p inhibitor组、mimics-NC组、miR-145-5p mimics组、miR-145-5p mimics+pcDNA组、miR-145-5p mimics+SOX9组, MTT法和细胞克隆实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡; Transwell小室检测细胞迁移和侵袭; Western blot检测SOX9、Ki67、MMP9、Bcl-2、Cleaved Caspase-3蛋白表达情况。体内肿瘤形成实验验证...     

m6A修饰在植物生长发育和抗逆境胁迫中的功能

真核生物mRNA存在多种甲基化修饰,其中N⁶-腺苷酸甲基化(N⁶-methyladenosine, m⁶A)修饰是最为常见的一种动态内部修饰。m⁶A是指RNA腺嘌呤的第6位氮原子上发生甲基化修饰,它能够动态的被甲基转移酶添加,被去甲基化酶去除,以及被甲基化阅读蛋白识别。近年来,植物m⁶A修饰相关的酶被陆续鉴定,研究发现m⁶A修饰调控植物胚胎发育、茎尖分生组织分化、开花等生长发育过程,在植物抗逆境胁迫响应中也具有重要调控作用。本文就m⁶A修饰相关酶的组成及其在植物生长发育和植物抗逆境胁迫过程中的功能相关研究进展进行综述,并对甘蓝型油菜中m⁶A修饰相关的酶进行了生物信息学分析。     

慈姑花的开放式样及其花粉流

对一野生慈姑（ＳａｇｉｔａｒｉａｔｒｉｆｏｌｉａＬ．）居群的性表达状态及其花粉流散布规律进行了观测。慈姑雌雄同株,单株雄花数是雌花数的３．６倍。雌雄花单花期均为１ｄ,但二者开放式样不同。尽管雌花的数目较少,但在１ｄ内开放较多的花,其花的开放速率比雄花快。在居群水平上表现出雌雄花比例随时间大幅度波动。在传粉者进行的２６１２次访花活动中,传粉者表现出偏“雌性”访问,对每朵雌花的访问是雄花的１．４倍。用番红染色法标记慈姑的花粉运动表明,花的不同开放式样影响花粉流的散布。当雄花数占高比例时,花粉主要在邻近的个体间散布;而雄花的比例较低、雌花相对较多时,花粉远距离散布的强度加大。     

青岛文昌鱼LIM类同源框基因反义寡核苷酸对其胚胎发育的影响

研究了青岛文昌鱼LIM类同源框基因Bblim反义寡核苷酸对文昌鱼胚胎发育的影响。根据已克隆的Bblim基因序列 ,设计并合成了对应于该基因同源框区的两条反义寡核苷酸链 ,用电脉冲方法将其导入文昌鱼受精卵。结果表明 :反义寡核苷酸与随机序列寡核苷酸都不影响胚胎细胞分裂 ,而反义寡核苷酸能抑制胚胎细胞Bblim基因的表达。还发现只存在于导入反义寡核苷酸的幼体中的两种畸形———一是在幼体的腹侧近咽部有一圆形突起的结构 ;另一是在幼体色素与尾鳍之间约二分之一处的腹侧有一距状突起。这两种畸形均发生于文昌鱼幼体腹侧的近体表部位 ,因此文昌鱼Bblim基因可能与外胚层的发育有关