靶向Bcl-2克服非小细胞肺癌EGFR-TKIs获得性耐药

摘要 目的：探讨靶向抗凋亡蛋白Bcl-2克服非小细胞肺癌EGFR-TKIs耐药的作用及重定位Bcl-2靶向抑制剂用于克服耐药的可行性。方法：通过药物浓度梯度递增法构建非小细胞肺癌多代EGFR-TKIs耐药株,根据亲本细胞和多代EGFR-TKIs耐药的非小细胞肺癌细胞的RNA-seq数据筛选出潜在耐药相关基因Bcl-2,通过Western blot 检测其在耐药细胞中的蛋白水平。为了探讨Bcl-2诱导耐药的作用,采用siRNA干扰和使用Bcl-2的抑制剂ABT199抑制Bcl-2,通过CCK8法、IncuCyte实时监测和Western blot等方法检测其对亲本和耐药细胞的细胞活力、药物敏感性、增殖和凋亡的影响。随后使用奥希替尼分别处理亲本及耐药细胞,通过Western Blot检测NRF2受到药物作用后及在耐药细胞中的蛋白水平,并以临床公共数据库分析辅助验证。使用siRNA干扰或NRF2抑制剂ML385敲低或抑制NRF2功能,借助Western Blot和CCK8法检测其对Bcl-2表达水平及对EGFR-TKI敏感性的影响;通过加入NRF2的激动剂Ki696探究其对Bcl-2的诱导作用、对EGFR-TKI敏感性的影响及取消靶向Bcl-2逆转耐药的作用。结果：Bcl-2在EGFR-TKIs耐药细胞中上调;敲低或抑制Bcl-2后,可选择性抑制耐药细胞的生长和活力,并诱导凋亡,且能逆转包括第三代药物奥希替尼在内的多代EGFR-TKIs耐药;EGFR-TKI可在敏感细胞中诱导NRF2的上调,且耐药细胞中上调的Bcl-2受NRF2调控。结论：EGFR-TKIs耐药细胞通过上调抗凋亡分子Bcl-2获得耐药,该分子的上调受NRF2的调控,靶向Bcl-2则可以逆转耐药。     

余倍体小滨麦与普通小麦杂交后代的细胞遗传学研究

本文对八倍体小滨麦与普通小麦杂交后代的细胞遗传学及附加染色体的传递及丢失规律进行了研究和讨论。结果表明,ＢＣ１Ｆ１与Ｆ２相比较,染色体分离范围小,并且分离向染色体数目减少偏移,有利于４３、４４条染色体的分离;双单体附加和单体附加后代异染色体丢失严重,分别为６５．７９％和６１．９９％,双单体附加分离出单体附加占１０．５３％,单体附加的传递率为２６．９２％,单体附加后代分离出的二体附加为５．５６％,二     

天兰冰草染色体对小冰麦外植体再生能力的影响及基因的染色体定位

本文研究了天兰冰草（Ａｇｒｏｐｙｒｏｎｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｍ２ｎ＝４２）染色体导入小麦后对小冰麦外植体再生能力的影响,从而分析调控再生能力的基因所在天兰冰草染色体的定位。对异源八倍体小冰麦的研究表明,与天兰冰草强再生能力有关的基因主要分布在附加到中２的冰草染色体组上;对７个异附加系小冰麦的研究进一步表明,冰草强再生能力的性状由多基因调控,这些基因主要分布在附加到ＴＡＩ－１１、ＴＡＩ－１２、ＴＡＩ－１３的冰草染色体上。此外,小冰麦杂种Ｆ１的研究表明,在组织培养中同样能够表现出杂种优势。     

小细胞肺癌肿瘤抗原相关基因的克隆

用肿瘤抗原特异的单抗２Ｆ７筛选人小细胞２肺癌细胞株ＮＣＩ－Ｈ１２８ｃＤＮＡ 士对其中Ｎｏ．４阳性克隆进一步研究。该克隆的溶源菌经４２℃ＩＰＴＧ诱导产生１６５ＫＤ的融合蛋白。它能同时被单抗２Ｆ７和抗－β－半乳糖苷酶抗体识别。     

应用超声波技术显示组织中粘多糖的研究

应用超声波技术来显示组织所含的粘多糖,经反复实验证明,它比传统应用的方法效果好,颜色鲜艳,定位准确,还可节省４～６倍的时间。奥申兰（Ａｌｃｉａｎｂｌｕｅ）原法染色需１ｈ,ＰＡＳ需２０ｍｉｎ左右,用超声波技术前者仅需１０ｍｉｎ,后者只需５ｍｉｎ左右。奥申兰是一类铜欧花青染料,含有带正电荷的盐键,它可与组织中含有的阴离子基因如合羧基和硫酸根的酸性粘液物的反应,生成不溶性复合物,ＰＡＳ是靠过碘酸氧化组织中粘多糖的乙二醇基和氨羟基,致使其产生暴露出游离醛,与Ｓｃｈｉｆｆ氏试剂起反应,产生新的复合物,这两类染色法,都能在超声彼技术的作用下来加速染色过程。超声波的主要工作原理是：利用仪器上所发出的超声波,以每秒钟８０万次的高频振谐下作缩张运动。由此而带动了染色液中正负电荷,游离醛基等物质的缩张运动,从而加速了它们的结合,加速了染色的完成。     

纵纹腹小鸮繁殖生态

１９８２－１９９１年的３月到９月,在山西庞泉沟自然保护区对纵纹腹小的繁殖生态进行了研究。繁殖前（３月）种群密度为０．１００（只／ｋｍ）,繁殖后（８月）为０．１１８。４月初产卵,窝卵数３－５枚,孵化期２２天左右,巢内、巢外育雏抚幼３５－４０天,食物以鼠类为主。     

喜马拉雅灰包菇──相传是“喜马拉雅雪人”的一种食物

喜马拉雅灰包菇ＳｅｃｏｔｉｕｍｈｉｍａｌａｉｃｕｍＺａｎｇｅｔＤｏｉ,由Ｄｒ．ＴｅｉｚｏＯｇａｗａ采于尼泊尔境内的喜马拉雅山带,据当地居民云：该菌为喜马拉雅雪人的一种食物。所谓雪人可能是高山雪线一带的动物。本文对该菌的分类特征和雪人的有关讨论作了介绍。原模式存日本国立科学博物馆。     

甜玉米籽实含糖量的配合力分析

采用不完全双列杂交设计研究了 6个母本3个父本甜玉米自交系籽实含糖量的配合力效应。结果表明,父母本一般配合力和特殊配合力效应均方都显著。根据各亲本的表现把亲本5033归为一般配合力高而特殊配合力方差大的最理想类型;亲本5012和5011属一般配合力高而特殊配合力方差小的类型;亲本5018、5034、5028和5024为一般配合力低,但特殊配合力方差高的类型; 亲本5023和5009属一般配合力效应和特殊配合力方差都低的类型,最缺少实用价值。     

四种锚首虫科包括一新种的描述(单殖纲:指环虫目:锚首虫科)

本文报道采自广东阳江闸坡中华海鲶鳃上的锚首虫科四个虫种。包括一新种瘤钩小沙汉虫Chauhanellustuberhamatussp．nov.。它以背中央大钩钩尖基部内侧具瘤状结构而区别于本属已记述的21个种。其余为弯曲小沙汉虫C．flexiosus、海鲶血梗虫Hamatopedunculariaarii、和简单血梗虫H．simplex。     

标志技术在研究小皱蝽成虫种群特征中的应用

应用标志－释放－回收技术研究小皱蝽成虫的主要种群特征,结果如下：（１）成虫扩散的偏离度Ｋｕ＝２．４,为一阶峻开曲线;（２）分别用Ｐｅｔｅｒｓｏｎ和Ｊａｃｋｓｏｎ方法对种群蜜度进行了估计,结果表明,Ｊａｃｋｓｏｎ的方法较好;（３）雄虫平均寿命４０－４５,虫平均寿命１２０－１３０。天。