45株幽门螺旋菌的生物性状研究*

本文对胃镜活检标本分离的45株幽门螺旋菌进行涂片染色、细菌培养、生化反应、药敏试验等方面的研究。表明用TTC—WCG培养基作Hp的微需氧35℃培养可加快细菌的生长;触酶(cata-lase)、氧化酶(Oxidase)、脲酶(Urease)和水解胆汁七叶苷(Bile-aescu|in)四联检在筛选Hp上有重要意义,配合染色特性,培养条件等可作为初步鉴定Hp常规使用。报告时间由原来的7—10天缩短为96小时。药敏琼脂作Hp的药敏试验效果良好。     

双歧三联活菌散剂根治幽门螺杆菌的临床疗效观察

目的 :观察双歧三联活菌散剂根治幽门螺杆菌的疗效。方法 :设对照组 (三联疗法 )和治疗组 (双歧三联活菌散剂 )进行胃镜检查并作尿素酶试验和 1 4C尿素呼气试验。结果 :两组对幽门螺杆菌的根除差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :双歧三联活菌散剂对幽门螺杆菌有一定的根治疗效。     

幽门螺杆菌表面抗原免疫保护作用的体外与活体研究

目的：调查幽门螺杆菌（Hp)几种表面蛋白体外对T细胞增殖的影响和在小鼠体内的免疫保护作用。方法：评价Hp全菌抗原、尿原酶（Urease)、黏附素（hpaA)、外膜蛋白25（Hop25)和38（Hop38)对人外周血T细胞及小鼠CD4^ T细胞增殖的影响;与佐剂合用,评价上述重组蛋白对小鼠Hp感染的免疫预防作用。结果：Urease和Hop25可刺激人及鼠T细胞增殖,hapA只能刺激Hp^ PBL增殖,而Hop38则有毒性作用;Hop25和Hop38均可产生60％的完全保护,hpaA可产生100％的部分保护即降低细菌定植密度,而Urease只能产生40％的部分保护。结论：外膜蛋白可能是一组高效的Hp疫苗免疫原;其长期免疫效果及对T细胞功能的活体调节作用尚需进一步评价。国际上尚未见相关报道。     

幽门螺杆菌动物模型研究进展

幽门螺杆菌动物模型用于H.pylori相关疾病和H.pylori疫苗作用的研究。常规实验动物包括翻生猪、悉生狗、非人类灵长动物、猫、雪貂、小鼠、大鼠、沙鼠等。猫螺杆菌和雪貂螺杆菌感染也被用于模型研究。最近,转基因小鼠和基因敲除小鼠也被用作幽门螺杆菌动物模型研究。     

利用杆状病毒表达幽门螺杆菌cagA基因

幽门螺杆菌cagA基因克隆到杆状病毒表达系统的pBlueBacHis2A转移载体中,将重组质粒pBlueBacHis2A-CagA与亲本病毒Bac-N-blue DNA共转染Sf9细胞,以空斑法纯化获得的重组杆状病毒.经PCR法鉴定后进行扩增培养,SDS-PAGE和Western bolt检测结果证实所表达的蛋白为CagA蛋白,间接ELISA分析表明,表达产物可与Hp感染者血清发生特异性的免疫反应.     

幽门螺杆菌(SS1)感染及其胃炎的小鼠模型

目的 :建立感染幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,H pylori)SS1株BALB/c小鼠感染模型 ,研究H pylori胃内定植及胃黏膜病理变化。 方法 :BALB/c小鼠胃内分别接种体外培养的H pyloriSS1株 (实验组 )或PBS(对照组 ) ,组织学方法评价H pylori定植及胃黏膜病理变化。结果 :所有对照组小鼠胃组织未见H pylori定植 ,胃组织也未见明显的炎症反应 ;而所有实验组小鼠在感染H pylori 12周后 ,胃黏膜表面的黏液层及胃小凹顶端可见大量H pylori,胃体及胃窦交界处、胃体及胃底交界处最多 ;胃组织可见到不同程度的炎性反应 ,感染H pylori 2 4周后 ,胃组织炎性反应加重。结论 :用胃内接种方法建立了小鼠H pylori感染及其相关性胃炎的模型。     

冠心病患者幽门螺杆菌感染与血清Ghrelin、同型半胱氨酸水平的相关性研究

目的探讨冠心病患者幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染与血清Ghrelin、同型半胱氨酸(Hcy)水平的相关性。方法选择2013年1月至2014年12月行冠状动脉造影确诊冠心病患者136例作为冠心病组,另选择同期健康体检人员60例作为对照组。运用14 C尿素呼气试验方法测定H.pylori感染情况,观察组患者的冠状动脉病变程度进行Gensini评分,测定血清Ghrelin和Hcy水平,分析H.pylori感染与Ghrelin、Hcy水平及Gensini积分之间的关系。结果冠心病组血清Ghrelin水平明显低于对照组,差异有统计学意义(t=10.65,P0.05);冠心病组血清Hcy水平明显高于对照组,差异有统计学意义(t=6.08,P0.05)。冠心病患者中,H.pylori感染组血清Ghrelin明显低于H.pylori未感染组,差异有统计学意义(t=7.58,P0.05);H.pylori感染组组血清Hcy明显高于H.pylori未感染组,差异有统计学意义(t=5.63,P0.05)。随着冠心病H.pylori感染程度的加重,血清Ghrelin水平逐渐下降,血清Hcy水平、Gensini积分逐渐升高。H.pylori感染根治后血清Ghrelin水平较治疗前明显升高,而Hcy水平明显下降,差异均有统计学意义(t=14.84、6.25,P0.05)。结论 H.pylori感染能够影响冠心病患者血清Ghrelin、Hcy水平,H.pylori感染可能参与冠心病发生发展。H.pylori感染程度与冠心病患者冠状动脉病变程度相关。     

利用杆状病毒表达幽门螺杆菌cagA基因

幽门螺杆菌cagA基因克隆到杆状病毒表达系统的 pBlueBacHis2A转移载体中 ,将重组质粒 pBlueBacHis2A CagA与亲本病毒Bac N blueDNA共转染Sf9细胞 ,以空斑法纯化获得的重组杆状病毒。经PCR法鉴定后进行扩增培养 ,SDS PAGE和Westernbolt检测结果证实所表达的蛋白为CagA蛋白 ,间接ELISA分析表明 ,表达产物可与Hp感染者血清发生特异性的免疫反应     

幽门螺杆菌HspA融合蛋白口服疫苗的构建

构建表达幽门螺杆菌的保护性抗原分热休克蛋白A亚单位(HspA）和霍乱毒素B亚单位（CtxB）的重组融合蛋白的生物工程菌株,以此制备幽门螺杆菌的口服疫苗。用PCR方法扩增hspA和ctxB两个目的的基因片段,将它们分别克隆至pSK（＋）质粒上,然后插入含T7启动子ET－22b（＋）的表达载体中,构建嗓基因的表达质量pET－hct,转化E.coliBL21(DE3）,经IPTG诱导表达融合蛋白HCT。经测序,hspA-ctxB(hct)融合基因片段由726bp组成,可以编码242个氨基酸残基的多肽。经SDS－PAGE和免疫印迹分析检测发现,融合基因表达的蛋白质相对分子质量约为30kD。融合蛋白经镍离子柱纯化、复性后,和HspA共同标记同位素^125I,然后给小鼠灌胃,结果观察到HCT组小鼠血清中的^125I的放射量要明显高于HspA组（P＜0．001）,且吸收峰值时间明显提前。融合蛋白中的CtxB可明显促进小鼠对HspA的吸收,HCT融合蛋白可以作为预防和治疗幽门螺杆菌感染的侯选口服疫苗。     

幽门螺杆菌毒力因子

全球至少有一半人口感染了幽门螺杆菌(Hpylori)。与发达国家(20％～50％)相比,幽门螺杆菌的发病在发展中国家发生率较高(约80％),这与社会经济的发展密切相关。这种细菌一般是幼年时期通过摄食而感染,除非进行特异的抗菌治疗,否则将终身携带,