多酚氧化酶及其生理功能

就多酚氧化酶的存在和定位,遗传学特性,生理功能,酶活性的影响因素,经济价值等方面近年来研究成果进行了总结。     

植物中草酸积累与光呼吸惭醇酸代谢的关系

对几种Ｃ３和Ｃ４植物中草酸含量及相应的乙醇酸氧化酶活性测定结果表明,叶片光呼吸强度及其着急酶活性大小与草酸积累量没有相关性;植物根中均能积累草酸,但未测出乙醇酸氧化酶活性。烟草根、叶中的草酸含量在不同生长时期差异明显,且二者呈显著正相关（ｙ＝２．５６５ｌｎｘ＋２．１３７,ｒ＝０．７４９,Ｐ〈０．００１）,说明振中到可能来自叶片。氧化乙醇酸的瓣活性与氧化乙醛酸的酶的活性呈极显著线性正相关（ｙ＝０．２     

AMF对弱光及盐胁迫下甜瓜生长和抗氧化酶活性的影响

以甜瓜(Cucumis melo L.)品种"中蜜3号"为试材,摩西球囊霉菌(Glmous mosseae,GM)为供试菌种,采用温室盆栽试验研究接种丛枝菌根真菌(AMF)对弱光及盐胁迫下甜瓜生长和抗氧化酶活性的影响,以明确AMF对甜瓜复合逆境下的增抗作用并探讨其生理机制。结果显示:(1)在弱光及盐胁迫条件下,甜瓜幼苗生长受到明显抑制,其株高、干重和鲜重均明显降低,同时体内可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸和MDA含量以及SOD、POD、CAT活性均比对照显著升高。(2)弱光及盐胁迫下,接种AMF可显著促进甜瓜幼苗的生长,菌根侵染率随胁迫时间延长与盐浓度呈负相关关系。(3)弱光及盐胁迫下,接种AMF进一步提高了甜瓜幼苗体内可溶性糖、可溶性蛋白、淀粉和脯氨酸含量及SOD、POD、CAT活性,显著降低了MDA含量,且叶片SOD、POD活性变化大于根系,CAT则相反。研究表明,AMF可通过促进弱光及盐胁迫下甜瓜生长和抗氧化酶活性的提高,有效降低体内膜脂过氧化水平,从而增强植株对弱光及盐胁迫的耐性。     

PCR-mtDNA技术鉴别检测不同动物肌肉组织和饲料中鸭源性成分

以鸭肌肉组织DNA为模板,利用PCR-mtDNA技术成功克隆出了鸭mtDNA COIII基因(GenBank Accession No.DQ655706).对所克隆的序列分析表明.其序列包括鸭细胞色素C氧化酶III(COIII)基因全序列784 bp,通过同源性分析可知,动物的线粒体DNA COIII基因是相对保守的,利用此特性设计PCR-mtDNA方法鉴别检测鸭源性成分的特异性引物;以各种动物肌肉组织及饲料DNA为模板进行PCR扩增、经反复验证筛选出只能扩增出鸭DNA的目的片段,而不能扩增出其他动物DNA片段的特异性强、稳定性好的引物P3、P4;利用此引物PCR扩增鸭DNA的特异性片段为226 bp,对PCR产物进行测序分析可知与已克隆的鸭mtDNA COIII基因同源性达到100%,证明了所筛选引物的准确性.通过对不同含量的DNA模板溶液进行PCR扩增的方法,对筛选出的特异性引物P3、P4进行灵敏度试验,结果分析表明灵敏度约为0.001%,证明该PCR方法具有特异性强、灵敏度高的特点,完全可作为鉴别不同动物肌肉组织和饲料中鸭源性成分的方法.     

川芎、白芷萃取物下调大鼠硬脑膜COX-2及PGE2的表达

目的:观察川芎、白芷提取物对实验性偏头痛大鼠模型COX-2及PGE2表达的影响,为都梁软胶囊治疗偏头痛提供实验依据.方法:48只健康成年Sprague-Dawley大鼠随机平均分为3组(每组16只):阳性对照组(M组)、空白对照组(CO组)(生理盐水加10%DMSO,1ml/100g灌胃三天);实验组(CBM组)(川芎白芷提取物,15mg/kg灌胃三天).除空白对照组外,各组电刺激三叉神经节30min.刺激完毕取硬脑膜测定待测物质.免疫组化、蛋白质印迹(WB)法观察大鼠脑膜COX-2的表达,酶联免疫吸附法(Elisa)观察脑膜中PGE2含量的变化.结果:与CO组相比,M组、CBM组的脑膜COX-2蛋白表达、阳性颗粒数和PGE2含量显著增加(p＜0.05).与M组相比,CBM组COX-2蛋白表达、阳性颗粒数及PGE2的含量显著降低(p＜0.05).结论:川芎、白芷提取物可以抑制脑膜中COX-2、PGE2表达,推测这可能是川芎白芷控制偏头痛急性发作的重要机制之一.     

重组E．coli胆固醇氧化酶的分离纯化及其酶学性质研究

对重组E.coli产生的胆固醇氧化酶采用70%硫酸铵盐析、CM Sepharose FF离子层析、Phenyl Sepharose 6 Fast疏水层析、Sephadex G-75凝胶过滤,得到的胆固醇氧化酶在SDS-PAGE上呈单一蛋白质条带,酶的纯化倍数为93,收率为21%.部分酶学性质表明:酶的最适反应温度为37℃,最适反应pH7.5,热稳定范围在40℃以下,酶的pH稳定范围为6～9,分子量分别为50 kD和52 kD.酶动力学参数Km值及Vmax分别为8.2×10-5 mol/L和0.21 mmol/(L.min).     

黄化处理促进绿豆下胚轴插条生根的研究（简报）

黄化处理后绿豆下胚轴插条的生根数、生根范围、根的鲜重及干重、以及插条基部的可溶性糖含量和多酚氧化酶活性都增加,而酚类物质含量和过氧化物酶活性则减少。     

百合ACC氧化酶基因全长cDNA的克隆及序列分析

以亚洲百合Polyanna(Liliumspp.)花瓣为材料,根据已报道的百合ACC氧化酶基因片段设计1对末端扩增特异引物,采用RACE方法,获得百合ACC氧化酶基因的全长cDNA(GenBank登录号为EU296623).该cDNA全长1 152 bp,具有一个954 bp的开放阅读框,编码318个氨基酸.Blast搜索结果显示,百合ACC氧化酶基因核苷酸序列与其它植物已报道的ACC氧化酶基因具有71%~82%的相似性,氨基酸序列有70%~87%的相似性,聚类分析表明,与单子叶植物百合科郁金香首先聚类,其次与双子叶植物聚类,最后与单子叶禾本科和兰科植物聚类.     

'德抗961'小麦耐盐生理特性研究

以常规高产小麦品种山农215953为对照,在室内200 mmol/L NaCl胁迫条件下,对小麦品种德抗961的耐盐生理特性从水分状况维持和抗氧化保护系统两方面进行了研究.结果显示,盐胁迫条件下,德抗961较对照山农215953可保持较低的膜脂过氧化程度、较好的膜完整性以及较高的SOD、CAT、POD等抗氧化酶活性,从而保持细胞膜的有序性和稳定性;同时,德抗961通过主动积累如游离脯氨酸、可溶性糖、蛋白质以及甘氨酸甜菜碱等渗透调节物质,降低渗透势,提高渗透调节能力,从而保持相对良好的叶片水分状况.表明德抗961的渗透调节能力强及相对较高的抗氧化水平可能是其耐盐性强的主要生理因素.     

ROS与造血干细胞损伤研究进展

辐射可以通过引起造血干细胞（hematopoietic stem cell,HSC）内活性氧（reactive oxygen species,ROS）系统水平升高导致HSC损伤。HSC损伤患者出现难治性血液系统疾病,严重影响患者生存质量,甚至威胁患者生命。ROS可以通过多种机制引起组织、器官和细胞损伤。ROS的来源包括：线粒体、NOX（NADPH oxidases）、细胞色素P450酶、黄嘌呤氧化酶、非偶联NO合酶。已证实HSC内ROS来源于NOX。ROS升高后影响HSC在成骨细胞微环境定位,导致HSC与微环境相互作用减弱,从而影响HSC功能。此外,ROS升高后通过激活P38MAPK-P16Ink4途径,损伤HSC自我更新能力,并且使HSC定向分化产生更多的髓系克隆而不是红细胞系克隆;P13K—Akt-mTOR途径可能也是ROS诱导HSC损伤途径。ROS对细胞周期影响为：促使HSC离开G0期进入细胞周期,导致干细胞池的耗尽。基于NOX在氧化还原信号传递过程中的重要作用,证实辐射通过NOX产生的ROS以及鉴定产生ROS的NOX亚型,这一工作会为临床靶向治疗辐射诱发的血液系统疾病提供重要的价值。