鼠伤寒沙门菌六型分泌系统效应蛋白Clpv对巨噬细胞极化的影响北大核心

【目的】探讨Ⅵ型分泌系统(typeⅥsecretion system,T6SS)效应蛋白Clpv在鼠伤寒沙门菌(Salmonella enterica serovar Typhimurium)致病过程中的功能。【方法】以鼠伤寒沙门菌SL1344基因组为模板克隆clpv基因,并比较与其他革兰氏阴性菌台湾假单胞菌(Pseudomonas taiwanensis)、植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)、鳗利斯顿氏菌(Listonella anguillarum)、菠萝多源菌(Pantoea ananatis)、粘放线菌(Actinomyces viscosus)和大肠埃希菌(Escherichia coli)的同源性;将clpv基因克隆至pEGFP-N1载体构建重组质粒pEGFP-Clpv,利用Western blotting、实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,q-PCR)、荧光显微镜以及流式细胞术检测蛋白表达、定位及诱导小鼠巨噬细胞M1型和M2型极化水平。【结果】clpv基因全长为2637 bp,与台湾假单胞菌的同源性最高;Western blotting、qPCR和免疫荧光检测表明重组蛋白大小约120 kDa,在细胞中有明显绿色荧光并且主要定位于细胞膜;q-PCR和流式细胞术结果发现Clpv转染组巨噬细胞M1型极化显著增加(P<0.01),M2型巨噬细胞极化显著减少(P<0.01)。【结论】成功克隆表达鼠伤寒沙门菌T6SS效应蛋白Clpv,并明确其胞内表达定位以及对巨噬细胞极化的影响。     

水稻OsNramp4介导锰离子吸收和转运的功能分析

锰(Mn)是植物生长发育必需的矿质营养元素。水稻天然抗性相关巨噬细胞蛋白(natural resistance-associated macrophage protein, OsNramp)家族有7个成员,其中4个具有Mn²⁺转运活性。OsNramp4已被鉴定为一个铝离子转运蛋白,但尚未报道其是否具有Mn²⁺转运活性。本文利用Mn²⁺吸收突变株Δsmf1进行OsNramp4功能互补实验,分析OsNramp4对Mn²⁺的响应,研究环境Mn²⁺胁迫对敲除突变体nramp4的生长势以及Mn²⁺吸收和转运的影响。结果显示:OsNramp4能互补Δsmf1的Mn²⁺吸收缺陷表型;水稻根部OsNramp4的表达受Mn²⁺的诱导;高Mn²⁺胁迫下, nramp4的长势明显优于野生型对照,突变体地上部Mn²⁺含量显著低于野生型,且根-茎Mn²⁺转运率明显低于野生型...     

巨噬细胞极化在单纯疱疹病毒1型感染中的作用研究进展

巨噬细胞具有功能可塑性，使其能够根据微环境线索不同极化为不同表型，主要分为两种类型，即促炎M1型巨噬细胞和抗炎M2型巨噬细胞，它们在单纯疱疹病毒1型（Herpes simplex virus-1, HSV-1）感染的疾病发展中行使不同的功能。当巨噬细胞出现极化失衡时，可以通过多种因素对其失衡状态进行调节，靶向调节巨噬细胞的极化状态对于治疗HSV-1感染具有重要意义。本文对巨噬细胞极化及其在HSV-1感染中的作用研究进展进行总结，以期为HSV-1感染的进一步研究及治疗提供参考依据。     

肾上腺素能受体信号调控巨噬细胞参与疾病微环境的研究进展

肾上腺素能受体(adrenergic receptors, ARs)作为神经系统功能调控的关键受体之一,在多种疾病的免疫微环境形成以及疾病进展中扮演重要角色。近年来ARs及其信号对巨噬细胞功能的调控成为研究热点。在不同疾病微环境中,ARs通过对巨噬细胞的分化与发育发挥不同的调节功能,进而影响肿瘤、肥胖、急性损伤与感染性疾病、心力衰竭以及妊娠相关疾病的发生和发展。本文从ARs的分型及激活途径,ARs在巨噬细胞的表达、功能调控及在不同疾病微环境中的作用等方面进行综述,以期为相关疾病的干预和治疗提供新思路。     

重组人过氧化物还原酶-5通过诱导巨噬细胞极化提高抗肿瘤免疫

肿瘤细胞能够采用不同的策略抑制人体免疫系统，使其不能正常杀伤肿瘤细胞。前期研究表明，重组人过氧化物还原酶-5 (human peroxiredoxin-5, hPRDX5)能够激活机体正常的抗肿瘤免疫反应，从而控制与清除肿瘤，然而，其确切的作用机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨hPRDX5是否通过激活或者逆转小鼠巨噬细胞RAW264.7的极化状态，从而发挥其抗肿瘤活性。CCK8法检测结果显示，与对照组相比，不同剂量hPRDX5均能显著增强巨噬细胞活力(P<0.001);一氧化氮(nitric oxide, NO)检测试剂盒检测结果显示，hPRDX5显著增强RAW264.7细胞NO分泌水平(P<0.001);ELISA检测结果揭示，hPRDX5促进RAW264.7细胞TNF-α (P<0.01)和IL-6 (P<0.001)的分泌；流式细胞术结果揭示，hPRDX5能够升高RAW264.7细胞抗原分化簇(cluster of differentiation, CD) 80 (P<0.01)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide sy...     

预防性使用维生素C可通过调节巨噬细胞极化和肺泡上皮细胞凋亡缓解放射性肺损伤

随着新冠肺炎在我国的持续流行和放射疗法普遍开展，放射性肺损伤(RILI)也逐渐成为了一个备受关注的临床问题。放射性肺损伤的发病机制十分复杂，该过程涉及到肺泡巨噬细胞极化状态的失衡以及肺泡上皮细胞凋亡水平的上调。既往的研究表明，维生素C是重要的抗氧化物质，预防性使用维生素C可有效治疗急性肺损伤。然而，预防性使用维生素C是否可有效预防或治疗放射性物质导致的肺损伤，以及其具体分子机制尚待研究。该研究旨在探讨预防性使用维生素C处理肺泡巨噬细胞系RAW 264.7,以及人肺上皮细胞BEAS-2B是否能有效控制巨噬细胞的异常极化及其肺上皮细胞的异常凋亡，并研究该过程中的分子机制。本研究发现，放射性X线照射4周、8周后，巨噬细胞M1极化状态标志物例如iNOS会发生显著的表达上调(P<0.05),预防性使用维生素C处理巨噬细胞以及肺上皮细胞，能缓解放射性外照射导致的巨噬细胞极化状态紊乱以及肺泡上皮细胞凋亡，具体表现为切割胱天蛋白酶(cleaved caspase3)水平的表达下调。此外，预防性应用维生素C处理能抑制放射性外照射激活的MAPK信号通路。进一步的研究结果表明，对MAPK通路的抑制作用...     

蛇胸腺巨噬细胞的形态学研究

近年的研究表明，哺乳动物胸腺巨噬细胞具有一定的异质性。巨噬细胞不仅具有吞噬凋亡的Ｔ淋巴细胞的功能，而且还具有分泌细胞因子和呈递抗原的作用，是构成胸腺微环境的一种重要的免疫调节细胞。但是，对非哺乳动物胸腺巨噬细胞异质性和生理功能方面的探讨还未见报道。本...