HMGB1在缺血-再灌注损伤中的作用机制研究进展

高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)是一类核内非组蛋白,人HMGB1含有215个氨基酸残基,定位于人染色体13q12,它在核内主要参与维持核小体的结构、识别和结合DNA、调控DNA的复制转录等.HMGB1主要通过两种途径释放到细胞外,与Toll样受体、晚期糖基化终产物受体等受体相互作用激活核因子κB、有丝分裂原激活蛋白激酶p38信号通路,释放炎症介质参与缺血-再灌注损伤的发生发展.对HMGB1作用的生物学基础的深入研究,将提供治疗缺血-再灌注损伤的新靶点.     

HepA-相关蛋白——一种复制叉结合因子

HepA-相关蛋白(HepA-related protein,HARP),又名SMARCAL1(SWI/SNF-related,matrix-associated,actin-depen-dent regulator of chromatin,subfamily a-like 1),是一种ATP驱动的退火解旋酶,催化解旋的单链DNA重新缠绕成双螺旋。HARP突变可造成一种多系统常染色体隐性疾病——Schimke免疫-骨发育不良(Schimke immuno-osseous dysplasia,SIOD)的发生。HARP可与复制蛋白A(replication protein A,PRA)直接相互作用而被招募到DNA损伤位点以稳定停滞的复制叉,从而保持基因组的完整性。这些研究展示了HARP是DNA损伤反应中的一个关键元件,并且对SIOD发病机制的理解具有重要意义。     

cAMP在急性胃粘膜损害中的作用的研究

本研究应用ＲＩＡ法,观察了大鼠胃组织的ｃＡＭＰ含量与急性胃粘膜损害之间的关系。结果表明：（１）由消炎痛或失血性休克引起的急性胃粘膜损害时,胃组织ｃＡＭＰ含量明显降低;事先使用异搏定（１０ｍｇ／ｋｇ）可使胃组织ｃＡＭＰ含量明显增加,并使由消炎痛引起的急性胃粘膜损害相应减轻。（２）在正常情况下,胃窦、、胃体组织间ｃＡＭＰ含量并非相等,胃窦部组织ｃＡＭＰ含量高于胃体部组织,与此相应的是急性胃粘膜损害主要     

缺血-再灌注过程中心肌肌浆网钙摄取和Ca~(2 )-ATPase活性的变化

本实验用离体大鼠心脏Langendorff灌流模型,观察缺血及缺血——再灌注对大鼠心肌肌浆网[SR]钙转运功能的影响。结果表明:缺血25min引起SR钙摄取初速率下降,摄取量降低;缺血40min,使其进一步加重。缺血25min后再灌注15min,SR的钙转运功能进一步降低,与缺血40min后果类似;同时SR上的Ca~(2 )-ATPase活性也显著降低。用不同pH的灌流液进行再灌注,对SR钙转运功能的障碍无显著影响。这提示:心肌缺血可引起SR的钙转运功能障碍,并随缺血时间的延长而加重;再灌注加重缺血造成的SR功能的损伤。偏酸或偏碱的K-H液再灌注均不能改善SR钙转运功能的抑制,表明pH变化不是缺血-再灌注时引起SR功能障碍的重要因素。     

RAGE与肝缺血再灌注损伤间的关系

晚期糖化终末产物受体(receptor for advanced glycation end product,RAGE)是一种单穿膜受体,同时也是一种多配体受体,属于免疫球蛋白超家族的成员。其配体包括高速泳动族框1蛋白质(high mobility group box 1,HMGB1)、晚期糖化终末产物(advanced glycation end product,AGE)、S100/钙粒蛋白(calgranulin)及β淀粉样肽等。在肝脏中,RAGE主要表达于巨噬细胞与树突状细胞上。RAGE一旦被激活,就会通过一系列的信号传导,诱导这些细胞释放出多种促炎症的物质,并引起中性粒细胞沉积,产生瀑布式的炎症反应链。肝脏的缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤作用机制繁多。其中RAGE作为一个关键的调节点,各种外来和内在的因素都可以通过作用于RAGE从而影响炎症反应。现就肝脏I/R损伤与RAGE之间关系做一综述。     

脊髓-硬膜外联合麻醉在肾移植术中的应用

目的:比较联合脊髓-硬膜外麻醉(CSEA)与两点硬膜外麻醉(CEA)方法在肾移植手术中的应用效果.方法:回顾性分析160例肾移植受者临床资料,其中男性109例,女性51例,平均年龄39.2±10.3岁(12-73岁).根据肾移植受者术中采用的麻醉方法将其分为2组:联合脊髓-硬膜外麻醉组(CSEA组,n=80)与两点硬膜外麻醉组(CEA组,n=80).CSEA组患者采用联合脊髓-硬膜外麻醉(L2-3),CEA组采用连续硬膜外两点穿刺法(T12～L1和L3-4).观察两组患者麻醉效果.结果:局麻药用量脊髓-硬膜外麻醉组明显小与硬膜外麻醉组,P＜0.01;血流动力学变化脊髓-硬膜外组给药后15 min MAP明显下降,但不影响移植肾开放后血流灌注.结论:肾移植术脊髓麻醉联合硬膜外麻醉比硬膜外两点穿刺法麻醉起效快、穿刺损伤小、麻药用量少、阻滞平面完全、又能减少不良反应发生.     

丁苯酞对七氟醚诱导神经细胞损伤的保护作用

目的探讨丁苯酞（BNP）对七氟醚诱导神经细胞损伤的影响及其可能的机制。 方法取胎鼠海马组织,分离培养神经细胞,分为对照组（正常神经细胞）、七氟醚组（3%七氟醚通气）、低剂量BNP组（1 μmol/L的BNP处理6 h+3%七氟醚通气）、中剂量BNP组（5 μmol/?L的BNP处理6 h + 3%七氟醚通气）以及高剂量BNP组（10 μmol/L的BNP处理6?h + 3%七氟醚通气）,采用MTT法检测细胞生存率,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用Western bolt法检测各组细胞Bcl-2、Bax以及Caspase-3蛋白表达情况,生存率、凋亡率比较采用t检验或方差分析。 结果24、48和72 h,七氟醚同期处理各组细胞生存率较对照组明显降低[对照组（88.31±8.20）%,（80.42±9.04）%,（75.63±7.84）%;七氟醚组（71.53±6.95）%,（61.35±7.38）%,（45.40±5.42）%,t = 3.491、3.654、7.092,P均< 0.001;低剂量BNP组（72.41±8.42）%,（67.22±6.46）%,（50.11±5.71）%,t = 3.025、2.657、17.411,P?= 0.016、0.027、0.000;中剂量BNP组（76.68±5.95）%,（72.53±5.10）%,（54.58±6.73）%,t = 2.567、2.030、4.556,P = 0.028、0.034、0.000;高剂量BNP组（79.32±6.44）%,（75.68±5.47）%,（60.09±4.28）%;t = 2.183、2.048、3.890,P = 0.023、0.036、0.000],而BNP各处理组细胞生存率明显高于单纯七氟醚处理组[七氟醚组（71.53±6.95）%,（61.35±7.38）%,（45.40±5.42）%,低剂量BNP组（72.41±8.42）%,（67.22±6.46）%,（50.11±5.71）%,t = 1.180、2.038、2.317,P?= 0.216、0.030、0.019;中剂量BNP组（76.68±5.95）%,（72.53±5.10）%,（54.58±6.73）%,t?= 2.180、2.787、2.376,P = 0.028、0.017、0.020;高剂量BNP组（79.32±6.44）%,（75.68±5.47）%,（60.09±4.28）%,t = 2.206、3.488、4.756,P = 0.022、0.000、0.000],且随着BNP浓度的升高,细胞生存率明显升高[低剂量BNP组（72.41±8.42）%,（67.22±6.46）%,（50.11±5.71）%;中剂量BNP组（76.68±5.95）%,（72.53±5.10）%,（54.58±6.73）%;高剂量BNP组（79.32±6.44）%,（75.68±5.47）%,（60.09±4.28）%;F = 2.182、2.491、2.384,P = 0.020、0.024、0.022]。采用流式细胞技术检测各组神经细胞凋亡情况,采用七氟醚通气处理的各组神经细胞凋亡率均显著高于对照组[七氟醚组（67.49±7.92）%,低剂量BNP组（60.72±8.33）%,中剂量BNP组（44.95±7.21）%,高剂量BNP组（31.86±6.50）%,对照组（19.42±4.58）%,F = 6.583,P < 0.001],而采用BNP处理的各组神经系统凋亡率明显低于七氟醚组（P < 0.05）,且随着BNP剂量的增加,凋亡率明显降低（P < 0.05）。七氟醚通气各组细胞Bcl-2表达较对照组降低,而BNP处理各组细胞Bcl-2表达较七氟醚组有所升高,且随着BNP剂量增加Bcl-2表达增加;七氟醚通气各组细胞Bax以及Caspase-3蛋白表达较对照组增加,而BNP处理各组细胞Bax以及Caspase-3蛋白表达较七氟醚组有所降低,且随着BNP浓度的升高Bax以及Caspase-3蛋白表达降低。 结论七氟醚可诱导神经细胞凋亡,从而对神经系统造成损伤,而BNP则可有效抑制七氟醚诱导的神经细胞凋亡,对神经系统损伤具有保护作用,其可能的机制与促进Bcl-2蛋白表达,抑制Bax、Caspase-3蛋白表达有关。     

圈养普氏野马对夏季高温生理应答的非损伤性研究

为研究圈养普氏野马Equus przewalskii对夏季高温刺激的生理应答,采用非损伤性取样法和放射性免疫法,随机选取5个圈养家族群中的成年雄马、成年雌马和成年带驹雌马各5匹,对其夏季高温期粪便内糖皮质激素和三碘甲腺原氨酸(T3)代谢产物的水平进行了测定。结果表明:(1)普氏野马在夏季高温期间一直维持在较高的激素水平;(2)不同类群的糖皮质激素代谢产物水平之间的差异有统计学意义(F_2,_(60)=22.885,P0.001),成年雄马成年雌马成年带驹雌马;(3)不同类群的T3代谢产物水平之间的差异有统计学意义(F_2,_(60)=37.780,P0.001),成年雌马成年雄马成年带驹雌马;(4)3组组内不同应激程度(THI28.9 vs.THI≤28.9)下的激素水平差异无统计学意义,且组别与应激程度不存在交互作用。鉴于圈养普氏野马在夏季高温期不同类群的生理应答水平不同,建议对野马分组、分圈进行管护,防止高温造成意外损失;同时,建议利用非损伤性取样法对圈养普氏野马生理状况进行监测,为管理者进行有效的生存管理提供基础资料。     

热损伤诱导单核细胞株Raw264.7凋亡及其分子机制的初步研究

为探讨热损伤诱导细胞死亡的模式与分子机制,采用流式细胞仪、DNA凝胶电泳、透射电镜观察热损伤诱导单核细胞株Raw264.7凋亡发生的动力学变化及分子机制。结果显示热损伤能显著诱导单核细胞株Raw264.7调亡;有效降低Bcl-2蛋白表达,而上调Bax蛋白表达。这说明细胞凋亡是离体细胞在热损伤作用下重要的死亡方式之一,bcl-2/bax比例减少可能是热损伤诱导单核细胞株Raw264.7细胞凋亡的分子机制之一。     

番茄红素对小鼠脂类及细胞DNA氧化损伤的影响

目的 建立小鼠前胃癌模型,探讨番茄红素对小鼠前胃癌的抑制机制及对脂类和淋巴细胞DNA的抗氧化损伤作用.方法 昆明小鼠随机分成5组,实验3组饲喂高、中、低不同剂量的番茄红素饲料.阳性与正常对照组饲喂正常饲料,实验组与阳性组灌喂含人类致癌物苯并(a)芘B(a)P的色拉油(浓度为5 mg/mL),正常对照组给予相同剂量的色拉油,每周两次,共8次,建立前胃癌模型,24周后处死动物,观察肿瘤生长及脂类和淋巴细胞DNA的氧化损伤情况.结果 番茄红素具有明显的抗肿瘤作用,给予番茄红素后能降低前胃癌的发生率,可提高小鼠血清超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px活性,降低丙二醛MDA含量和减少淋巴细胞DNA的氧化损伤(P<0.05).结论 番茄红素具有明显抑制肿瘤生长的作用,其作用机制可能与增强机体抗氧化酶功能,降低脂类氧化产物MDA,减少淋巴细胞DNA损伤有关.