G-四链体结构的检测、功能及调控

G-四链体结构是近年来发现的特殊核酸二级结构,它在体内极易形成,分布十分广泛并且具有重要的生物学功能。研究者们已经在体外检测到G-四链体的存在并解析出其晶体结构,各种检测该结构的方法如特异性荧光探针、抗体等也不断被发现或合成。G-四链体不仅广泛分布于端粒、启动子区、外显子等具有重要功能的基因区域,在5'非编码区(5'UTR)、内含子区、3'非编码区(3'UTR)等也有广泛存在。相应区域的G-四链体参与到端粒延长、DNA复制、转录、减数分裂、基因重组等重要的生命过程,发挥抗肿瘤、抗病毒、抑制血管新生等作用。目前基于G-四链体结构的抗肿瘤药物已经进入临床试验阶段并取得了良好的疗效。G-四链体结构的内源性调节包括多种内源性蛋白以及碱基的甲基化等,维持其含量与结构的平衡状态。此外,外源性小分子也可对体内G-四链体的平衡状态发挥调节作用。本文将从化学、生物和医学的角度对G-四链体结构的检测方法及其特殊功能和调控进行系统的论述和展望。     

快速检测血栓的尿检试纸

美国麻省理工学院应用纳米技术开发出一种尿检试纸,可快速检测出血液中的凝块。 血液凝固是与血液中的凝血酶有关,应用氧化铁纳米粒子,涂有专门与凝血酶肽（短蛋白质）相互作用的多肽,注入老鼠体内后,会经过整个鼠体。当该粒子遇到凝血酶,在特定的位置上裂解肽类,释放的片段最终顺着动物的尿液排泄。在处理收集的尿液样本时发现,含有特定多肽标记物抗体的碎片识别这些蛋白质片段,尿液中标记物的数量与凝固在小鼠肺中的血液凝块水平成正比。用质谱仪对片段质量分析来进行区分,或用抗体测试样本,更为简单且便宜。     

出入境转基因产品及其分子检测现状与展望

随着转基因产品在全球的迅速推广,包括我国在内的很多国家都建立了转基因标识制度。各检验检疫口岸应转基因产品生产企业、食品制造商、消费者等多方面需要,相继开展了转基因产品的检测工作。准确可靠的转基因产品检测技术是各国检疫检疫单位的共同需求。转基因产品的检测主要有两大类方法,一类是DNA水平上的检测,另一类是蛋白质水平上的检测。多个发达国家也相继成立专门机构或部门,负责转基因产品生物检测技术标准化工作。国际上对转基因产品的检测工作有向委托鉴定方向发展的趋势。我们简要综述了出入境转基因产品及其分子检测现状。     

环介导等温扩增技术在转基因水稻Bt63检测中的应用

采用环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)对转基因水稻Bt63进行应用检测。研究表明,环介导等温扩增技术检测转基因水稻Bt63特异性好,并且灵敏度达到0.01%(W/W),具有简便、快速、准确等特点,可以在进出口检验检疫、食品安全监测等领域进行应用。     

基层医疗机构对滴虫性、真菌性阴道炎最适检验方案的临床观察

目的通过不同的检测手段检测基层医院患者的阴道分泌物,了解滴虫性、真菌性阴道炎的检出率,从而探索基层医院最适的检验方案。方法采用回顾性分析,调取本基层医疗机构2010年1月至2013年12月在本院妇科门诊部就诊的900例女性患者,采取两种常用的阴道分泌物检测方法,即涂片镜检法（湿片法）和阴道分泌物p H值测定＋抗原检测（抗原法）,探索其滴虫性阴道炎和真菌性阴道炎的检出率。结果采用湿片法检测出滴虫性阴道炎阳性共144例,占总例数的16.00%;真菌性阴道炎阳性共207例,占总例数的23.00%;采用抗原法检测出滴虫性阴道炎阳性共179例,占总例数的19.89%;真菌性阴道炎阳性共253例,占总例数的28.11%。结论抗原法较湿片法敏感性和特异性好,结果客观易判读,两种方法差异有统计学意义,后者可作为基层医疗机构首选的阴道分泌物检测手段。     

呼吸道疾病发作期患者肺孢子菌寄植状况与肺疾病相关性研究

目的调查呼吸系统疾病急性发作期患者肺孢子菌定植或感染状况,探讨肺孢子菌寄植与呼吸系统疾病的相关性。方法构建检测肺孢子菌线粒体大亚基核糖体核糖核酸基因的mtLSU巢式PCR反应体系,鉴定其敏感性和特异性。利用新建立的巢式PCR检测呼吸系统疾病急性发作期患者痰液中肺孢子菌基因,分析肺孢子菌在呼吸系统疾病患者中的定植率及其与呼吸系统疾病的相关性。结果新建立的mtLSU巢式PCR扩增的肺孢子菌基因序列与GenBank中人源肺孢子菌基因序列同源性为100%,且与其他8种呼吸道病原体无交叉反应。敏感性检验结果表明,扩增基因的最小量为366 fg。对98例呼吸疾病急性发作期患者的103份标本检测的结果显示,肺孢子菌基因检出率为62.14%（64/103）。结论本研究建立的mtLSU巢式PCR方法具有较高的敏感性和特异性,适用于无创性呼吸道标本肺孢子菌基因检测;肺孢子菌在呼吸系统疾病患者中有较高的定植和感染率。     

利用水稻原生质体快速分析miRNA靶标RNA

与转基因方法相比,基因瞬时表达系统在基因表达研究上具有快速便捷的特点。为检验水稻mi RNA与靶标基因之间的调控关系,将MIRNA基因与GFP/靶标序列融合基因(或GFP/靶标突变序列融合基因)构建在同一瞬时表达载体上,并转化水稻原生质体,通过观察含有GFP/靶标序列融合基因和GFP/靶标突变序列融合基因的载体之间的荧光强度差异,以及通过q RT-PCR方法检测靶标和非靶标m RNA水平差异来验证mi RNA对靶标基因的调控。用osa MIR156和osa MIR397及其靶标序列对实验设计方法进行验证,荧光显微观察和q RT-PCR检测证明,osami R156和osami R397能降低相应靶标序列GFP融合基因的转录物水平和GFP荧光水平。此种水稻原生质体瞬时表达方法用于在体内进行大规模mi RNA靶标基因检测。由于其他近缘单子叶植物很可能与水稻有近似的小RNA加工系统,因此对于其他单子叶植物mi RNA功能研究也将有很好的应用前景。     

第十届钙信号和细胞功能研讨会

<正>2014年7月3日-6日江西宜春http://cscs2014.csp.escience.cn/由中国生物物理学会神经生物学专业委员会主办的"第十届全国钙信号和细胞功能研讨会"(The 10~(th)CSCS)定于2014年7月3日-6日在江西宜春举行.钙信号和细胞功能研讨会(Chinese Symposium on Calcium Signaling,CSCS)为中国钙离子学界组织的系列国际性学术会议.首届会议于1987年在徐州召开,之后每3年举行一次(1990年天津、1993年石家庄、1996年南京、1999年徐州).2006年第6届青岛会议上对会议形式进行了改革,参照Gordon Conference格式之后每2年举行一次.第7—9届会议于2008年、2010年、2012年分别在宜昌、北京、黄山举办.其中第8届北京会议是中美联席会议,Richard Tsien、Wolf Almers、David Clapham等数十位国际著名专家参会.本次会议将围绕钙信号功能及机制、钙在重大疾病中的作用、钙信号检测技术进展等方面进行交流,旨在为海内外学者提供合作平台,推动该领域研究的发展。一、学术和组织委员会主任:曾旭辉(国内),郑劼(海外)     

CODEHOP RT-PCR技术在黄病毒属病毒筛查中应用

为了探讨CODEHOP RT-PCR技术在黄病毒属病毒筛查中的应用效果,根据GenBank发表的不同黄病毒多聚蛋白氨基酸序列,利用CODEHOP方法设计合成一对简并引物,用一步RT-PCR对乙型脑炎病毒株JEV1201、登革热病毒株JKD001和黄热疫苗YV6161进行检测,扩增产物测序后进行BLAST同源性比对和系统分生分析。结果显示该方法可以特异的对黄病毒进行扩增,目的片段的大小和序列与预期结果相符,JEV1201与乙脑病毒株YL2009-4/YC2009-3同源性最为接近,位于乙脑病毒株进化树分支。JKD001与登革热病毒株DENV-2/ID/1022DN/1975同源性最为接近,位于登革热病毒株进化树分支。YV6161与黄热病病毒株17D同源性最为接近,位于黄热病病毒株进化树分支。由此可知CODEHOP RT-PCR技术可以被有效的用于对黄病毒属病毒的筛查、种类鉴定和分子溯源。