高效Bt抗虫基因表达结构的构建及其在转基因烟草中表达行为的研究

构建了高效植物表达载体pBinMoBc,其携带有超强表达复合启动子OM及Ω因子控制下的CryIA?基因,作为对照,本实验构建了含有CaMV35S启动子控制下的CryIA?基因的植物表达载体pBinoBc。分别使用两个植物表达载体转化烟草,ELISA检测表明,在pBinMoBc转基因烟草中CryIA?基因的平均表达水平是pBinoBc的2.44倍,最高可达可溶蛋白的0.255%。抗虫检测结果表明,pBinMoBc转基因烟草与pBinoBc转基因烟草相比,具有更强的抗棉铃虫效果。上述结果表明,OM启动子比CaMV 35S启动子更具有实际应用价值,此结果在植物抗虫基因工程研究中具有重要意义。     

生物检测试剂保藏技术研究进展

生物检测试剂的扩增性能,尤其是酶试剂的生物活性对荧光定量PCR等的检测结果起决定性作用。采用不同的保藏技术对维持检测试剂的生物活性,实现生物检测试剂室温条件下长时间稳定保藏与非冷链运输,保证检测结果的稳定性、准确性、特异性和灵敏度等至关重要。针对低温保藏技术、真空冷冻干燥技术、喷雾干燥技术以及玻璃化冷冻技术4种不同保藏技术的研究进展进行了综述,在应用中总结优缺点,以期对后续相关工作的开展提供一定的科学依据。     

PCR在临床淋球菌检测中的应用

ＰＣＲ多聚霉链反应技术已被广泛的应用于临床医学的多种疾病的检测诊断中,它不仅为检测病原菌提供了特异性好,敏感性强,快速简便的途径,而且还使隐性病症的早期诊断成为可能。本文仅对ＰＣＲ在淋球菌的临床检测的基本特点,应用方法以及临床样品裂解方法的改进,特异性及敏感性试验以及ＰＣＲ检测意义等做一个探讨。     

两种体外细胞毒性检测方法的比较研究

目的比较两种常用的细胞毒性检测方法在医疗器械生物学评价中的相关性。方法分别采用MTT比色法和细胞增殖度法,在37℃条件下,将五种医疗器械／生物材料的浸提液分别与小鼠成纤维细胞（L-929）接触2天和2,4,7天,比较材料对细胞的毒性影响。结果5种不同的材料浸提液分别表现出不同程度的细胞毒性反应（0～2级）。将MTT比色法与细胞增殖度法（2天）的实验数据进行相关性分析,显示两者之间具有良好的相关性（R=0．977）。结论MTT比色法由于其检测所需的细胞量相对较少,试验步骤相对简便、检测周期短,因此具有一定的优越性,是个值得推荐的细胞毒性检测方法。     

植物花蜜提取、保存与检测分析方法及比较

花蜜富含多种有机物和微量元素, 不同植物花蜜的分泌量以及化学物质构成存在很大差异, 不同花蜜采集和保存方法都会影响其成分分析结果.本研究参考相关文献, 总结了常用的6种野外花蜜收集方式(注射器法、毛细管法、滤纸法、溶液稀释法、离心法和抽吸法), 6种花蜜保存方式(4℃冷藏保存、－20℃冷冻保存、－80℃超低温保存、－1...     

水晶振子的顶尖企业 开发微量物质测定仪

日本电波工业株式会社充分利用手机和数码相机所使用的设备，试制成功了可高灵敏度检测生物体内蛋白质和环境激素等的设备。检测组件的进一步开发，可以广泛应用于体外诊断和环境污染检测等中。[编者按]     

《实验生物学与医学》：科学家研发出胞内即时影像检测共振传感器

来自EurekAlert的消息，伊利诺大学基因组生物学研究所的研究人员突破了FRET技术的局限性，开发了一个共振传感器，来检测细胞内的氧化还原动力学的即时影像，这一研究成果公布在《实验生物学与医学》（Experimental Biology and Medicine）杂志上。     

抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C定性PCR检测方法

转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C是由北京奥瑞金公司研发的转mG2-aroA基因和mcry1Ah基因抗虫耐除草剂玉米新品系,对玉米螟、粘虫等鳞翅目害虫具有抗性、耐草甘膦除草剂的转基因玉米,在我国具有重要产业化应用前景。本文研发了GH5112E-117C转基因玉米的定性PCR检测方法,该方法能特异性地检测转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C,在每个反应引物浓度为0.2 μmol/L、Taq DNA 聚合酶0.625 U、DNA模板50 ng,退火温度为58℃的条件下,检测灵敏度可稳定达到0.1%。该方法为转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C的精准检测提供了一种新的技术手段,为农业转基因监管提供技术支撑。     

Using a non—radioisotopic,quantitative TRAP—based method detecting telomerase activities in human hepatoma cellos

A non-radioisotopic,quantitative TRAP-based telomerase activity assay was established mainly by using SYBR Green-I staining instead of radioisotope.Comparing with conventional radioisotope based method,it was better in reproducibility and accuracy.Using this method,we found telomerase activities were absent in normal human liver cells,while detected in all of four human hepatoma cell lines (BEL-7404,SMMC-7721,QGY-07903 and HCCM) without significant differences.     

催化信号放大系统在原位杂交检测中的应用研究

CSA ( Catalyzed Signal Amplification;催化信号放大 )法首次由 Bobrow等 [1]报道应用免疫酶联和蛋白电泳转移膜的检测 ,1 992年 Adams等[2 ] 将该方法应用于免疫组织化学中 ,Kerstens等 [3 ]又将该方法应用于原位杂交 ( ISH)。应用于免疫组织化学检测较传统的 PAP、ABC、LSAB和 En Vision法相比具有较高的敏感性 ,比 LSAB法要敏感 50 0～1 0 0 0倍 ,较 En Viion法敏感 50～ 1 0 0倍 ,而且稳定性高 ,背景低等特点。本实验室已引进该方法 ,应用于免疫组化和原位分子杂交组化 ,其原理 :杂交后 ,经洗 ,Dig标记探针接生物素化抗 D…