木毒蛾核型多角体病毒的PCR快速检测技术

【目的】木毒蛾是福建沿海地区防护林树种木麻黄的主要害虫之一,具有成为国际危险性有害生物的潜在可能性。木毒蛾核型多角体病毒(Lymantria xylina multiple nucleopolyhedrovirus,LyxyMNPV)是高效控制木毒蛾的优良天敌资源,具有高度安全性。建立LyxyMNPV的PCR快速检测技术,有利于该虫防治技术及木毒蛾核型多角体病毒的进一步研究。【方法】根据LyxyMNPV基因组中的特有基因gp131设计特异性引物,利用PCR法扩增该目的基因片段并测序检验,建立LyxyMNPV的分子快速检测技术体系。【结果】以GAL为引物的PCR检测技术对LyxyMNPV基因组的灵敏度可达1 fg·mL^-1,对多角体悬液浓度检测最低量可达5.0 PIB·mL^-1,可明确区分LyxyMNPV和其他7种昆虫核型多角体病毒。该体系同时适用于感病木毒蛾的不同虫态(卵、幼虫、蛹和成虫)的检测,以及环境样本(包括土壤、树枝和寄生蜂)的检测。【结论】成功建立了具有高度特异性、灵敏性的LyxyMNPV分子快速检测技术,为LyxyMNPV的快速检...     

转基因农作物检测技术及其应用与发展

常用的转基因检测方法可分为两个方向,一是以检测外源基因为目标,如多聚酶链式反应分析法(PCR),二是以检测外源蛋白为目标,如酶联免疫分析法(ELISA)。此外,近年来,随着世界各国对转基因生物安全问题的日益关注,还涌现出了一批新的检测方法,如微阵列分析法(microarray),色谱分析法(chroma-tography),表面等离子共振(surfaceplasmonresonance,SPR)生物传感器分析法以及近红外线光谱分析法(nearinfraredspectroscopy,NIR)等。将对各种转基因检测方法的原理、特点及研究现状做一个扼要介绍。     

结核病血清学诊断进展

结核病的细菌学检查目前是结核病实验室诊断的金标准.由于痰涂片阳性率较低,镜检需要经验,难以区分环境分枝杆菌造成的假阳性;痰培养需时太长,因此细菌学检查对结核病的诊断价值有限.随着分子生物学技术的迅速发展,用高度敏感的方法检测结核分枝杆菌(简称结核杆菌)及其特异性DNA片段,如聚合酶链反应(PCR)、生物探针和基因芯片等,需要相应的检测设备和检测费用高而未能广泛推广.血清学诊断技术有其固有的优势,如操作简便、快速、便于推广、无需特殊精密仪器,已有多种纯化的特异性抗原可采用,可以发展成自动化检测,尤其是对痰培养阴性和肺外结核病有较为重要的辅助诊断价值而受到广泛的重视.本文从靶抗原的选择和检测技术的改进等方面综述了结核病血清学诊断的现状和进展.     

2017-2019年大连市流感病毒核酸监测结果分析

目的 分析2017-2019年大连市流感病毒的流行趋势和流行病原,为大连市制定流感防控措施提供科学依据.方法 对大连市2017年4月1日—2019年3月31日两家国家级流感监测哨点医院的流感样病例的咽拭子标本采用实时荧光定量PCR方法进行核酸检测.结果 共检测2 560份标本,阳性515份,阳性率20.1％.2017年...     

RT-PCR检测庚型肝炎病毒的研究

ＲＴ－ＰＣＲ检测庚型肝炎病毒的研究王孝华王健梅［１］林玉兵［２］陈禹保［２］孙钦喜［３］［１］湖南师大生物系［２］北京科海医疗生物工程公司［３］山东潍坊人民医院（湖南省临床检验中心,长沙４１０００６庚型肝炎病毒是Ｓｉｍｍｏｎｓ等于１９９５年证实的一种非Ａ－Ｅ型肝炎病毒［１］。随后在我国也证实有庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）存在［２］。有资料表明,ＨＧＶ在美国供血员中的流行情况较ＨＣＶ严重,并且与供血...     

萤火虫荧光素酶的研究及开发利用

萤火虫荧光素酶的研究及开发利用蒋宇扬,金振华（中科院发育研究所１０００８０）萤火虫荧光素酶（ＦｉｒｅｆｌｙＬｕｃｉｆｅｒａｓｅ;ＥＣＩ．１３．１２．７）简称虫光素酶,是一种能将化学能转变为光能的活性蛋白质,即生物催化剂。由于它能把诸如ＡＴＰ（三磷酸腺苷）一类生化物质转变成易于检测的先信号。因此,它能构成极好的生物传感器（Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒｓ）。     

核酸探针及其在临床上的应用

核酸探针已开始应用于临床诊断、法医鉴定、食品及加工检测,环境保护检测和农业畜牧业等领域中。美国临床化学会已把核改探针作为临床诊断的重点研究开发项目,在我国也开始了这方面的研究,并取得了一定的进展,因此,有必要对核酸探针及其在临床上的应用作一分析。     

病毒病诊断发展概况

病毒病种类繁多,累及人类全身各个系统。一种病毒感染症候群可由多种不同的病毒感染造成;反之,一种病毒感染可以表现为多种临床症状。就由微生物致病因子所引起疾病总数而言,年发病率和病死率总数的50％以上是病毒造成。所以,病毒病特异性诊断十分重要,其意义在于:(1)明确感染病因,以便临床及时对症治疗,避免滥用抗生素,减少医院内交叉感染,防止疾病扩散。     

聚合酶链反应在环境中的应用——PCR反应用来监测环境中的微生物

目前,聚合酶链反应(PCR)的应用越来越广泛,在环境监测中利用PCR来检查土壤,沉积物和水中含有的致病微生物,由于这一反应的灵敏性和特异性,一些研究人员也用PCR来 研究微生物生态的基本问题。     

HRP化学发光体系在基因检测中的应用

随着分子生物学及其相关学科的飞速发展,基因检测技术不断得到创新并且日趋完善,核酸探针是检测特异、互补序列的有力工具,是基因检测技术中一项重要内容。核酸探针不仅对胎儿性别、亲子关系和个体差异从分子水平上进行准确的分析判别,而且对内源基因突变引起的各种先天性遗传病和癌症、对各种病毒、细菌和寄生虫等入侵人体所致的各种传染病进行可靠的基因诊断。