应用实时荧光PCR检测致病性蜡样芽孢杆菌

目的:利用SYBRGreenⅠ染料能与双链DNA结合发出荧光的特点,建立一种用来检测致病性蜡样芽孢杆菌(B.cereus)的实时PCR方法。方法:对致病性蜡样芽孢杆菌致病相关基因cereolysinAB基因序列进行分析,设计1对特异引物,通过对SYBRGreenⅠ实时PCR反应条件的优化,实现对致病性蜡样芽孢杆菌的检测。结果:该方法具有较强的灵敏性及特异性,能够对致病性蜡样芽孢杆菌进行有效检测,其最低检出限可达8CFU/mL。结论:利用该技术检测蜡样芽孢杆菌,较常规的生化检测方法具有省时省力的特点,且灵敏性较高,具有实际应用价值。     

基于HPLC-ECD研究牡荆叶抗氧化的谱-效关系

为研究牡荆叶指纹图谱与抗氧化活性的谱-效关系，该研究首先建立了18批牡荆叶的高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)指纹图谱，对不同来源牡荆叶药材进行聚类分析，鉴定主要酚类化合物且测定其含量，分析牡荆叶的总酚和总黄酮含量，并采用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、氧自由基吸收能力法及铁离子还原能力法考察其体外抗氧化活性，通过皮尔逊相关分析、灰度关联分析及偏最小二乘回归分析法研究牡荆叶的谱-效关系。结果表明：(1)牡荆叶的指纹图谱标定21个共有峰，共指认出10个峰，其含量顺序为绿原酸>异荭草苷>木犀草苷>异牡荆素>异绿原酸A>异绿原酸C>原儿茶酸>荭草苷>异绿原酸B>新绿原酸；不同产地样品间相似性较高，相似度结果为0.816～0.983。(2)系统聚类分析显示，样品含量对分类有一定影响，不同来源样品被分为3类，其中南北方样品存在一定差异。(3)牡荆叶中总酚和总黄酮的含量分别为15.82～61.83 mg·g^-1和27.85～157.65 mg·g^-1,样品均具不同程度的抗氧化活...     

染色体分析法（chromosome analysis）

人们已经知道染色体的变化与癌症等疾病相关。作为一种视觉检测方法，FISH法受到人们的关注。将正常细胞和痛细胞的染色体进行比较的CGH法也在开发当中。本讲由东京医科齿科大学的稻泽让治教授进行讲解。[编者按]     

液滴检测禽流感

也许存不久的将来．禽流感的检测将非常容易。JuergenPipper和同事发明了一种廉价、快速又有效的液滴检测方法，这种方法能够在30min的时间内从～份鼻咽喉抹检样品中直接检测出禽流感病毒H5N1。新方法还可应用于SARS、艾滋病和乙肝等疾病病毒的检测。     

雄性大熊猫对化学信息行为反应的年龄差异

化学通讯对哺乳动物的生存和繁殖起着重要作用。研究了雄性大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)对同伴个体尿液气味行为反应的发育模式。 结果显示，在成年雌性个体的尿液气味刺激下，雄性个体表现显著多的嗅闻行为和嗅闻/舔舐环境行为，但是嘶咬气味刺激物的行为明显减少。在雌性个体的尿液气味刺激下，不同年龄段的雄性个体行为表现不同，成年雄性个体表现较亚成年和幼年个体显著多的舔舐行为。此外，成年个体和亚成年个体均表现较多的嗅闻/舔舐环境行为，而幼年个体则无该行为表现。幼年个体较成年和亚成年个体表现显著多的气味涂抹行为，而且嘶咬气味刺激物的时间较亚成年个体显著多。幼年个体和亚成年个体对雌性和雄性个体尿液气味刺激的行为反应不存在显著差异。研究结果表明，雄性大熊猫对同种个体尿液中化学信息的行为反应呈现出年龄差异。     

一种巴西小绿蛙分泌物可治疟疾

巴曲一所大学的研究人员最近发现，一种雨蛙科巴西小绿蛙的皮肤分泌物中所含的成分，可能具有治疗疟疾的功效据当地媒体8月29日报道，巴西利亚大学的研究人员从2001年开始对这种小绿蛙的分泌物进行研究，日前已从中提取出6种蛋白质。检测结果显示，这些蛋白质对疟疾、利什曼病和其他一些病症具有治疗作用。[第一段]     

应用激光显微切割技术检测单个结肠细胞的基因表达

目的：探讨检测单个结肠细胞的基因表达的方法。方法：应用激光显微切割技术(1aser micmdissection)从冰冻切片上将单个结肠细胞切下,提取总RNA,将RNA逆转录成cDNA,采用巢式逆转录聚合酶链反应(nested RT—PCR)检测mRNA的表达。结果：在显微镜下用紫外激光显微切割机,将单个结肠细胞成功切下,提取RNA后,逆转录成cDNA,经过巢式RT—PCR扩增后,扩增产物在琼脂糖凝胶上清晰可见。结论：联合应用激光显微切割和巢式RT—PCR可以检测单个结肠细胞的基因表达。     

小鼠哮喘模型通气功能检测实验器材的改进

通气功能检测可直接反映支气管痉挛等所造成的气道阻力等的改变 ,是判定支气管哮喘动物模型的可靠指标 ,目前国外小鼠支气管哮喘模型多采用此项检测 ,但国内尚未见报道。它的部分实验器材在国内很难仿制 ,哈佛动物呼吸器造价昂贵 ,我们对其器材进行改进 ,并作以简要报道。Ｆｉｇ.1ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｐｐｌｉａｎｃｅｓＡ :ｂｅｆｏｒｅｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ;Ｂ :ａｆｔｅｒｉｍｐｒｏｖｉｎｇＦｉｇ .2Ｄｉａｇｒａｍｍａｔｉｃｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｒｏｄｅｎｔｖｅｎｔｉｌａｔｏｒ1　材料与方法(1)实验器材　①实验…     

Nm23-H1/NDPK-A基因在大肠杆菌中的高效表达及产物纯化的研究

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增人二磷酸核苷激酶Ａ亚基（ＮＤＰＫ－Ａ）基因,即ｎｍ２３－Ｈ１／ＮＤＰＫ－Ｋ基因的编码序列,经序列分析后,定向克隆于表达质粒载体ｐＢＶ２２０,在大肠杆菌ＤＨ５α中高效表达出重组人ＮＤＰＫ－Ａ．表达产物为可溶性的非融合蛋白,占菌体总蛋白４２％．斑点ＥＬＩＳＡ法鉴定表明表达产物与ＮＤＰＫ－Ａ标准抗血清呈阳性反应．以ＤＥＡＥ纤维素弱阴离子交换层析、ＣｉｂａｃｒｏｎＢｌｕｅ染料亲和层析结合高效液相排阻色谱技术纯化ｒＮＤＰＫ－Ａ,得纯度为９６．７％的目标蛋白．以反相高效液相色谱法进行酶活性分析,表明纯化的ｒＮＤＰＫ－Ａ能催化ＡＴＰ＋ＵＤＰ＝ＡＤＰ＋ＵＴＰ的反应,比活性为８００Ｕ／ｍｇ蛋白．