MiR-150-5p靶向TP53对结直肠癌细胞侵袭和增殖的影响

摘要 目的：探索miR-150-5p靶向调控TP53基因对结直肠癌（colorectal cancer, CRC）在临床和生物学的相关性,研究miR-150-5p调控TP53基因在结直肠癌细胞增殖和侵袭病变中的作用。方法：收集临床手术切除并病理证实的结直肠癌患者的手术及血浆样本（结直肠癌和癌旁组织）60例,另选取癌旁正常粘膜10例,腺瘤30例。根据瘤体直径分为肿瘤＞5 cm（n=30）和≤5 cm（n=30）。qRT-PCR法测定样本中miR-150-5p表达,荧光素酶活性测定以确定TP53是否为miR-150-5p的靶基因。使用SW480细胞株,进行Transwell小室检测细胞侵袭能力,CCK-8检测细胞增值能力,对miR-150-5p进行生物信息学分析。结果：TP53是miR-150-5p的下游基因。癌组织及血浆中miR-150-5p表达量低于癌旁组织,直径＞5 cm瘤体中的miR-150-5p表达量显著低于直径≤5 cm瘤体,Ⅰ-Ⅱ期结直肠癌组织中的miR-150-5p表达显著高于Ⅲ-Ⅳ期（P＜0.05）。上调miR-150-5p后,细胞中TP53表达下降,下调miR-150-5p后,TP53表达升高;CCK-8增殖试验显示细胞中miR-150-5p过表达组抑制细胞增殖（P＜0.05）。结论：MiR-150-5p在结直肠癌组织和细胞中显著低表达,miR-150-5p通过靶向调节TP53抑制人CRC细胞的侵袭和增殖,有望成为结直肠癌治疗的新靶点。     

西方蜜蜂Lozenge基因的克隆鉴定及时空表达分析

Lozenge蛋白（Lz蛋白）是昆虫的重要转录因子,在昆虫胚胎发育过程中发挥重要作用。为研究Lozenge在西方蜜蜂Apis mellifera中的作用,本研究克隆了Lozenge基因,并对其进行生物信息学分析,同时基于荧光定量PCR技术检测该基因在西方蜜蜂不同发育时期（卵期、幼虫期、蛹期和成年蜂）和10日龄哺育蜂各组织的表达谱。生物信息学分析结果显示,Lozenge基因的开放阅读框（ORF）为1 554 bp,共编码517个氨基酸,预测分子量为54.63918 kDa,等电点为6.08;结构域预测分析发现Lozenge蛋白含有一个Runt结构域,多物种蛋白序列对比发现该蛋白同源性高。时期表达谱表明,该基因在第1日卵和第2日卵的表达量远高于其他时期,在卵期表达量随时间依次递减,幼虫期表达量极低,蛹期表达量呈先增后减的趋势,而成年蜂中均有表达;组织表达谱显示,该基因在哺育蜂头部、上颚腺中的表达量较高,而在腹部的表达量低。这些结果表明,Lozenge基因可能在西方蜜蜂胚胎期细胞发育过程、哺育蜂蜂王浆合成和分泌过程中发挥重要作用,这些结果为该基因功能的深入研究提供了重要的理论参考。     

人体椎间盘蠕变力学模型和理论分析

本文提出了人体椎间盘的压缩蠕变力学模型。并且应用二相多孔弹性理论，对蠕变力学模型进行了理论分析。其椎间盘压缩蠕变位移公式应为Wf=a.h.p用此式计算与文献上的实验结果相接近，此外还证明了，椎间盘退化较正常椎间盘的蠕变速率为大。     

双层滑动型接骨板的生物力不分析与临床应用

临床实践证明双层滑动型接骨板治疗四肢长骨骨折是疗效较好的内固定方法。本文从生物力学角度对24具湿润新鲜尸体股骨进行力学试验。测定了骨折固定部位的应力、应变、位移的分布，证明了这种固定方法是符合生物力学原理的，从载荷、应力、位移等一系列曲线表明它的松动、移位，钉板断裂很少发生，它能促进新骨生长和加速骨折愈合。     

家蚕内网虫属微孢虫核糖体小亚单位RNA(SSUrRNA)核心序列的克隆和序列分析

Endoreticulatus bombycis is a new pathogenic microspordia isolated from the silkworm larvae.With polymerase chain reaction(PCR) method,we amplified a fragment of the core sequence of the small subunit ribosomal RNA( SSUr-RNA) of Endoreticulatus bombycis.The SSUrRNA fragment was inserted into pMD18-T Vector and then cloned.It had a length of 1230 nucleotides and a percentage GC content of 51.3%.The accession number in Genbank is gill 181769|AY009115.The secondary structure model of the SSUrRNA of Endoreticulatus bombycis was constructed both on the bases of the sequence alignment and RNAFOLD program of the PC-GENE package.The secondary structure model revealed that Endoreticulatus bombycis lacked many cukaryotic hclices.such as heli10,helix 11.helix 18,helix 43 and helix 46,but it has V4 region and has more of prokaryotic character.Analyzed by Blast,Endoreticulatus bombycis.Endoreticulatus schubergi and pleistophora sp.(Sd-Nu-IW8201) have a high similarity,over 98%,Phylogeny tree of Endoreticulatus and Pleistophora species showed that Endoreticulatus and Pleistophora sp.(Sd0Nu-IW8201) was in a group and the other Pleistophora species were in another group[Acta Zoologica Sinica 49(3):414-420,2001].     

用gFM31探针进行谷子品种的指纹分析

用高度多态性探针ｇＦＭ３１对５９个谷子（ＳｅｔａｒｉａｉｔａｒｌｉｃａＢｅａｕｖ．）品种（包括地方品种、育成品种及品系）进行ＤＮＡ指纹分析,共鉴别出５８种类型,而黑谷和黑粒１５１６给出完全相同的带型,二者有可能是同一材料。通过对ｇＦＭ３１ＤＮＡ序列分析,未发现其中有小卫星ＤＮＡ和微卫星ＤＮＡ序列。该探针虽在谷子品种中显示很高的多态性,但与禾谷类的其他物种的ＤＮＡ杂交信号微弱,表现出较强的谷子基因组特异性。     

用分子生物学技术对草菇进行菌株鉴别

利用AP-PCR和RAPD技术对三个草菇菌株进行鉴别,其结果与用草菇菌株V34基因文库中的中等重复序列为探针进行限制性内切酶长度多态性分析(RFLP),及对编码核糖体5.8SrRNA的DNA(rDNA)进行PCR扩增后的产物进行限制性内切酶长度多态性分析(PCR-RFLP)的结果相一致。这一结果显示出用这四种方法对草菇菌株进行鉴别具有相似的效果。同时用这四种方法构建的分子生物学标记显示出这三个菌株中的两个菌株在遗传上有着较大程度的相似性。     

松科系统学研究（I）

检以科的系统发育研究历来已久,但由于性状进货的不同步性和属间进化缺少中间环节,致使科的分类系统和各属之间的演化关系至今未得到令人满意的解决。本文在钻研已有文献的基础上,筛选出松科属间综合分类性状３６个,有序进化性状２０个,借助计算机,以属为分类单位,进行表征分析研究确定松科分类系统,结果将松科分为三个亚科：松亚科Ｓｕｂｆａｍ．Ｐｉｎｏｉｄｅａｅ：仅Ｐｉｎｕｓ Ｌｉｎｎ;落叶松亚科Ｓｕｂｆａｍ．Ｌａ     

九种蹄盖蕨科植物配子体的酯酶同工酶分析

本文培养了蹄盖蕨科９个种即中华蹄盖蕨（Ａｔｈｙｒｉｕｍｓｉｎｅｎｓｅ）带岭蹄盖蕨（Ａ．ｄａｌｉｎｇｅｎｓｅ）、多齿蹄盖蕨（Ａ．ｍｕｌｔｉｄｅｎｔａｔｕｍ）（包括青柄和紫柄２种带岭蹄蕨类型）、东北蛾眉蕨（Ｌｕｎａｔｈｙｒｉｕｍｐｙｃｎｏｓｏｒｕｍ）、朝鲜介蕨（Ｄｒｙｏａｔｈｙｒｉｕｍｃｏｒｅａｎｕｍ）、山冷蕨（Ｃｙｓｔｏｐｔｅｒｉｓｓｕｄｅｔｉｃａ）、假冷蕨（Ｐｓｅｕｄｏｃｙｓｔｏｐｔｅｒｉｓｓｐｉｎｕｌｏｓａ）、欧洲羽节蕨（Ｇｙｍｎｏｃａｒｐｉｕｍｄｒｙｏｐｔｅｒｉｓ）和黑鳞短肠蕨（Ａｌａｎｔｏｄｉａｃｒｅｎａｔａ）的配子体为材料,进行酯酶同工酶的分析,以表明它们的种间差异,其中多齿蹄盖蕨的青柄和紫柄两种类型的酶谱存在明显差异,应考虑紫柄为多齿蹄盖蕨的变型。