小菜蛾感染球孢白僵菌后血淋巴游离氨基酸的测定

通过高效液相色谱（HPLC）对感染球孢白僵菌后小菜蛾血淋巴游离氨基酸含量进行测定,结果表明染菌后小菜蛾幼虫体内氨基酸含量明显低于对照组,主要是由于菌株在虫体内营养生长消耗和虫体内的养分所致;小菜蛾幼虫体内具有菌株营养生长所必需的氨基酸,因此可以认为小菜蛾是白僵菌的敏感寄主;各处理组间各种游离氨基酸在量上存在一定的差异,是由于不同发育阶段的虫体与菌株及不同类型菌株营养生长所必需的游离氨基酸含量不同所造成的。     

平卧川牛漆甾酮对小菜蛾生长发育的影响(英文)

平卧川牛漆甾酮是紫背金盘中的主要植物蜕皮甾类 ,在筋骨草属植物中普遍存在。试验结果表明 ,用 5 0mg L平卧川牛漆甾酮处理小菜蛾卵 ,其孵化受到抑制 ,总孵化率为 94.7% ,显著低于对照的 1 0 0 %孵化。平卧川牛漆甾酮对幼虫具有弱的毒杀活性和良好的拒食活性 ,且与浓度相关。小菜蛾的生长发育也受平卧川牛漆甾酮的影响。用高于 5 0mg L浓度处理幼虫 ,其生长受抑及蛾的产卵量下降 ,而较低浓度处理则有利于幼虫生长 ,卵量提高。这种双重作用可能是由于平卧川牛漆甾酮的激素活性和拒食活性的作用结果 ,后者导致昆虫营养不良。处理幼虫后 ,试虫的化蛹和羽化受阻。小菜蛾对平卧川牛漆甾酮比 2 0 羟基蜕皮酮更敏感。     

小菜蛾气味受体蛋白PlxyOr83b基因的克隆及表达

【目的】克隆小菜蛾Plutella xyostella气味受体Or83b基因, 并进行原核表达, 为研究小菜蛾寄主选择行为的分子机理, 开发昆虫行为调节剂提供基础。【方法】提取小菜蛾的总RNA, 反转录获得总cDNA, 采用RT-PCR方法扩增目的基因, 将其克隆至T载体并测序, 然后将目的基因克隆到大肠杆菌Escherichia coli表达载体pET-32a (+)中表达。经酶切、 PCR及测序鉴定正确后转化BL21 (DE3)菌株, 用IPTG诱导表达, 通过SDS-PAGE, Western印迹鉴定表达蛋白。【结果】获得了编码小菜蛾Or83b的cDNA序列, 该基因阅读框长1 413 bp, 编码471个氨基酸, 预测的等电点为7.19, 命名为PlxyOr83b（GenBank登录号为GQ923610）; 成功构建了pET-PlxyOr83b原核表达重组质粒, 目的基因获得高效表达, 其融合蛋白分子量为32.0 kD, Western blot 检测结果进一步表明PlxyOr83b在大肠杆菌DE3中得到正确表达。【结论】成功克隆和表达了小菜蛾气味受体基因PlxyOr83b, 该基因与其他昆虫Or83b基因基本一致。     

卷蛾分索赤眼蜂对十字花科蔬菜的行为反应

为了明确不同十字花科蔬菜挥发物对寄生蜂搜索寄主行为的影响,在室内利用“Y”型嗅觉仪测定了卷蛾分索赤眼蜂 Trichogrammatoidea bactrae Nagaraja 对小菜蛾 Plutella xylostella L. 常见的6种寄主植物（甘蓝Brassica oleracea、芥蓝Brassica alboglabra、 芥菜Brassica juncea、菜心Brassica parachinensis、萝卜Raphanus sativus和西洋菜Nasturtium officinale）及4个不同甘蓝品种的嗅觉行为反应,并用GC-MS对6种健康寄主植物的挥发物进行了化学成分分析。结果表明,卷蛾分索赤眼蜂的嗅觉反应不仅与十字花科蔬菜的种类有关, 而且与同一种蔬菜的不同品种有关。6种寄主植物的完整植株对卷蛾分索赤眼蜂雌蜂均具有显著的引诱作用（P<0.05）,并且不同种类之间的引诱力大小存在着一定的差异, 其中西洋菜对卷蛾分索赤眼蜂的吸引力最强,其次是甘蓝、菜心和芥菜,萝卜和芥蓝的吸引力最差。在测试的4个甘蓝品种完整植株中,雅实绿对卷蛾分索赤眼蜂的引诱力极显著强于日本春夏秋（P<0.01）。GC-MS分析结果显示,6种蔬菜的挥发物中绝大多数是烷烃类物质, 其次是烯烃类物质,还有一些醛、醇、酯、酸、酮及噻唑类化合物。其中醛类是西洋菜挥发物中的特有成分,包括5种（2,3-二甲基苯甲醛、辛醛、壬醛、十一醛、十二醛）,相对含量总计为4.90%,并且其烷烃类（33种）和醇类（6种）的相对含量分别为47.42%和5.66%, 均高于其他几种蔬菜,甘蓝中烯烃类（9种,5.52%）和酸类（4种,12.20%）的种类数和相对含量均为最高。本研究可为生产中蔬菜品种的合理布局和筛选寄生蜂的引诱剂提供理论依据。     

鬼臼毒素对小菜蛾的生物活性及对其几种代谢酶系的影响

为进一步揭示鬼臼毒素的杀虫活性及作用机理,本实验采用小叶碟添加法测定了鬼臼毒素对小菜蛾Plutella xylostella的生物活性及对其幼虫体内羧酸酯酶（CarE）、酸性磷酸酯酶（ACP）、碱性磷酸酯酶（AKP）、谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）和细胞色素P450酶系活性的影响。结果表明：鬼臼毒素对小菜蛾具有较好的拒食、毒杀及生长发育抑制作用,其AFC₅₀为0.4110 mg/mL（24 h）和0.2617 mg/mL（48 h）,LC₅₀为1.9061 mg/mL（72 h）;0.125 mg/mL剂量下相对生长率比对照下降57.56％（24 h）和41.18％（48 h）,化蛹率为43.33％,不能正常羽化。同时,鬼臼毒素对小菜蛾幼虫体内各代谢酶存在不同程度的影响：对羧酸酯酶表现为先激活后抑制的作用;对酸性磷酸酯酶表现先抑制后激活的作用; 对碱性磷酸酯酶活性具有明显的抑制作用,且随着处理时间的延长,抑制作用增强;对谷胱甘肽S-转移酶和细胞色素P450酶系表现出先激活后抑制的影响。     

小菜蛾对阿维菌素抗性基因的AFLP连锁图谱的构建

世界性害虫小菜蛾Plutella xylostella (L.) 田间种群已对阿维菌素药剂产生了高抗药性。本研究以小菜蛾对阿维菌素的抗性品系、敏感品系和回交群体组建作图家系,再利用AFLP技术构建小菜蛾对阿维菌素抗性基因的连锁图谱。用10组AFLP引物组合对未经药剂处理的小菜蛾成虫DNA选择性扩增,共获得1 044条可区分的DNA条带,271条带具有多态性,χ²检验表明只有123个位点符合1∶1 （P=0.05）,其中的112个构成28个连锁群,其总长度为1 222.7 cM; 用10组AFLP引物对经药剂处理后存活的小菜蛾成虫DNA扩增,所得的DNA条带中有54个条带符合分离比1∶1,经Mapmaker 3.0对多态性位点分析,只有E1M4-15、E1M1-4和E1M4-2标记位点位于同一连锁群,3个AFLP标记与抗性基因的遗传距离分别为0 cM,8.3 cM和13.1 cM。比较分析得出,抗性基因所在的连锁群是第5连锁群。结果显示AFLP连锁图谱对小菜蛾对阿维菌素的抗性监测具有很好的应用潜力。     

非嗜食植物乙醇提取物对小菜蛾种群的控制作用研究

应用作用因子生命表方法以及在此基础上提出的干扰作用控制指数法评价了几种非嗜食植物乙醇提取物对小菜蛾(Plutella xylostella)种群的控制作用.结果表明,非寄主植物的乙醇提取物(浓度为0.01 g·ml^-1)即飞机草(Eupatorium odoratum)、马缨丹(Lantana camara)和蟛蜞菊(Wedelia chinensis)对保护菜心免受小菜蛾为害起着明显的作用,这些作用物质在处理区的干扰作用控制指数分别为0.110、0.136和0.165,对小菜蛾的防治效果可达89.0%、86.4%和83.5%.可见,3种供试作用物质对小菜蛾种群起着重要的控制作用.     

马缨丹总岩茨烯对小菜蛾和斜纹夜蛾幼虫的拒食作用

从马缨丹叶片中提取总岩茨烯,测定总岩茨烯对小菜蛾2龄幼虫和斜纹夜蛾1、2龄幼虫的拒食作用.结果表明,在非选择性试验中,1.6 mg·ml^-1的总岩茨烯对小菜蛾2龄幼虫和斜纹夜蛾1龄幼虫有拒食作用,8 h的拒食率分别为62.%和31.1%;在选择性试验中,0.4 mg·ml^-1的总岩茨烯即对小菜蛾2龄幼虫有拒食作用,0.4、0.8和1.6 mg·ml^-1浓度处理下的拒食率分别为52.7%、55.5%和78.9%;总岩茨烯只有在高浓度(1.6 mg·ml^-1)时,才对斜纹夜蛾1龄幼虫有拒食作用,拒食率仅为33.0%.在选择性和非选择性试验中,总岩茨烯对斜纹夜蛾2龄幼虫均无拒食作用.     

雷公藤生物碱对小菜蛾幼虫生长及其解毒酶系的影响

研究了雷公藤（Tripterygium wilfordii）生物碱对小菜蛾（Plutella xylostella L．）幼虫的生长发育和体内谷胱甘肽-S-转移酶（GSTs）和羧酸酯酶（CarEs）活力的影响。结果表明,在取食用LC10和LC90两种浓度雷公藤生物碱处理过的菜叶后,小菜蛾的生长发育均被抑制,抑制率随虫龄的增大而降低。2种浓度生物碱处理对GSTs酶活力的影响不相同,低浓度（LC10）处理后酶活力在1—2龄期被显著诱导升高,达对照的2．83倍,而2龄以后则被显著抑制,分别仅为对照的0．20（3龄）、0．39（4龄初）和0．27（4龄末）;在高浓度（LC90）处理下,4个不同发育阶段GSTs活力均高于对照,其中1—2龄期达对照的4．07倍,最为明显。CarEs活力在2种浓度处理下均显著高于对照,高浓度处理后在1—2、3、4龄初和4龄末期的酶活力分别为对照的2．97、3．29、3．27和2．06倍,低浓度处理后则分别为对照的2．59、2．58、2．31和1．91倍。     

基于质谱和生物信息学分析的小菜蛾蛋白质鉴定

本研究以非模式昆虫小菜蛾Plutella xylostella为材料, 对比2, 3, 4龄幼虫的蛋白质组双向电泳图谱, 得到24个蛋白质差异点, 从中选取了编号为1111的差异表达蛋白质点进行质谱鉴定和生物信息学分析. 采用胶内酶解的多肽进行MALDI-TOF/TOF分析, 获得该点的肽质量指纹图谱（PMF）及串联质谱（MS/MS）图谱。将获得的PMF分别用MASCOT和ProFound等常用软件在NCBInr的Metazoa蛋白质数据库进行搜索, 匹配结果不理想. 进一步用PMF+MS/MS谱图搜索NCBInr的Metazoa蛋白质数据库, 以及小菜蛾EST数据库。 在NCBInr库中匹配结果为拟暗果蝇Drosophila pseudoobscura中的一种假定蛋白GA18218-PA, 而用EST库搜索的结果为家蚕Bombyx mori的ATP合酶的亚基。为验证搜索结果, 将该蛋白质点进行磺基异硫氰酸苯酯（SPITC）化学衍生后de novo测序, 最后确认该点可能为ATP合酶的一个亚基。最后着重讨论了蛋白质的质谱鉴定与生物信息学分析的联合使用, 希望据此选择出最适合于非模式昆虫蛋白质组学鉴定的方法。