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991.
为使嵌合分子ut-PA获得抗PAI-1抑制作用的性质,将删除了编码u-PA中R178-R179-H180-R181的12个核苷酸的u-PA cDNA[u-PA(1)]的BamH I-EcoR I部分酶切片段,克隆到含嵌合蛋白ut-PA基因的转移载体pVL1392-ut-PA的相应位点中,构建了一个含有新的嵌合蛋白基因ut-PA(1)的转移表达载体pVL1392-ut-PA(1).在昆虫病毒表达系统sf-9细胞中表达该嵌合蛋白基因,表达上清具有纤溶性,用血纤维蛋白平板法和S2444显色底物法分别测得活力为248 IU/ml和380 IU/ml. 相似文献
992.
嵌合蛋白 ut- PA( u- PA与 t- PA的嵌合型纤溶酶原激活剂 )基因删除编码 u- PA中 R1 78—R1 81的 1 2个核苷酸后 ,得到的嵌合分子 ut- PA( 1 )在昆虫细胞 sf- 9中表达 ,通过苯甲脒 -Sepharose 6B亲和柱层析对表达产物进行纯化 .得到的纯品走 SDS- PAGE,结果显示 ,其分子量为60 k D.血凝块溶解实验结果表明 ,嵌合分子 ut- PA( 1 )有良好的体外溶栓能力 .在不同剂量 PAI- 1的抑制条件下测定 ,亲本嵌合蛋白 ut- PA的活力分别下降 2 2 .7%和 1 3.8%时 ,嵌合分子 ut- PA( 1 )只分别下降了 1 2 .9%和 9.1 % .说明突变体 ut- PA( 1 )具有一定的对 PAI- 1抑制作用的抗性 相似文献
993.
制备了抗肌醇磷脂激酶 ( PI4- K)单克隆抗体 ( A6D)并测定了抗原 -抗体反应基本特性及功能 .结果表明 ,单克隆抗体与固相及溶液中肌醇磷脂激酶的亲和常数分别为 7.5× 1 0 6和 6× 1 0 8( mol/L) -1.单抗 1 .9× 1 0 -7mol/L可以抑制从细胞提取液的 PI4- K酶活力 50 % .用 FITC标记单抗在蛋白微球引导下进入细胞内 ,主要富集在细胞质膜区 ,并对 He La细胞和小鼠小脑细胞生长有明显抑制作用 . 相似文献
994.
995.
采用堆积床生物反应器,用无血清培养基培养分泌rhEPO的工程细胞株XP9501。所收集的上清液,经过快速离子交换层析—反相—分子筛层析纯化后,所得EPO纯度达99%以上,比活性为1-5×105IU/mg。整个纯化全过程的EPO体内活性回收率为46%。所纯化的EPO分子量为36kd,等电点为3-5。免疫印迹证明其有天然EPO的免疫原性,N端15个氨基酸序列分析与文献报道一致。本纯化工艺路线简单,时程短,重复性好,适合于大规模生产重组人促红细胞生成素。 相似文献
996.
盐和干旱胁迫对燕子掌(Crassula agenten Thunb.)叶片液泡膜H+-ATPase活性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
专性CAM植物燕子掌离体叶片的盐胁迫处理和失水干旱处理后 ,液泡膜H ATP酶对低浓度(2 0 0、40 0mmol/L)的盐胁迫 (NaCl胁迫 48h)不敏感 ,而当盐浓度达到 6 0 0mmol/L时 ,ATP水解活性和H 转运活性较对照上升 5 5 %~ 6 5 % ,而干旱胁迫 (4 8h ,失水 12 % )使酶活上升约 30 % ,但是上述各种胁迫均不影响ATP水解与H 转运的耦联比率 ,仍旧维持在12。用Westernblot证实在逆境下 ,H ATP酶的 3种主要亚基A、B、c在膜上的蛋白含量均有所增加 ,且以调节亚基 (B)的变化最为显著 相似文献
997.
中国仓鼠卵巢细胞(ChineseHamsterOvaryCell)是目前重组糖基蛋白生产的首选体系。本文综述近几年来该系统在生产基因工程药物方面的研究进展、存在问题和发展方向。 相似文献
998.
应用捕获ELISA法检测人巨细胞病素特异性IgM抗体的研究 总被引:1,自引:1,他引:0
应用捕获ELISA法检测人巨细胞病毒感染者血清特异性IgM抗体。通过与间接ELISA法对47例临床标体的检测比较,该法灵敏度及特异性均高于间接法,且不受RF的影响。试验表明,CMVIgM捕获法特异敏感、简便、快速、重复性好。CMVIgM捕获法试剂的研制成功,将为血清学的检测、流行病学的调查及临床诊断等提供可靠的科学诊断依据,有助于优生及优育 。 相似文献
999.
节丛孢属rDNA ITS区RFLPs分析 总被引:2,自引:0,他引:2
利用PCR朢FLP方法对捕食线虫真菌节丛孢属进行了系统发育研究。以ITS1和ITS4为引物对该属10种12个菌株的核糖体DNA转录间区(ITS)进行了PCR扩增,4种内切酶(AluI、HaeIII、HpaII、TaqI)酶切。结果表明该属的ITS区长度没有明显差异,其长度范围在658~705之间,酶切图谱能体现不同种间的多态性,根据4种内切酶酶切结果,利用UPGMA法构建的节丛孢属分子系统树,基本体现了属内不同种间的亲缘关系,从分子水平证明了节丛孢属形态分类上的合理性,同时对该属属征的扩大提出疑议。 相似文献
1000.