低温诱导的黄瓜ccr18基因的cDNA克隆及其表达特性分析

采用mRNA差异显示银染技术克隆得到在黄瓜（Cucumis sativus L.)冷敏型品种“津研4号”低温锻炼中特异表达基因的cDNA克隆（ccr18),其大小为639bp。在基因组中以单拷贝或低拷贝形式存在。Northern blot分析显示ccr18基因在12、24、48和72h低温处理的黄瓜中表达,在6h低温处理及对照中没有表达。这表明ccr18基因与黄瓜低温锻炼相关,序列同源性比较表明,它与拟南芥(Arabidopsis thaliana)染色体ⅢBAC库中的F14P3基因组序列具有88％的同源性。     

抗口蹄疫病毒相关基因的筛选及分析

口蹄疫是一种烈性传染病,其广泛流行给社会造成了巨大经济损失。为了研究口蹄疫灭活疫苗免疫的分子机制,同时也为抗口蹄疫病毒药物的研制奠定基础,本研究应用mRNA差异显示技术,以PK-15细胞为材料,系统比较了口蹄疫疫苗刺激组（A组）和正常的PK-15细胞（B组）的基因表达情况,回收差异片段,经二次扩增并纯化后,得到30条ESTs。将30条ESTs采用以地高辛标记的反向Northern点杂交鉴定,将阳性条带克隆测序,筛选出8条ESTs,编号E1~E8,应用BLASTn工具将8条ESTs对核酸数据库nr和dbEST中所有序列进行了同源性分析,其中E1,E2分别与猪的热休克蛋白基因、猪的MHCⅠ类基因同源,序列相似性都达到100%。E3,E4,E5,E7分别与已有核酸数据库中的基因克隆或EST具有较高同源性,为已知的EST,但功能未知;E6,E8在数据库中没有发现与其相似性较高的序列,为新的EST。应用数据库资源将E5、E7进行电子延伸后,将延伸序列进行开放阅读框分析,又经TBLASTx分析发现E7蛋白质序列与猪的精氨酸酶Ⅰ类蛋白序列有很高同源性。将E1、E2、E4、E5序列进行了基因表达谱分析,对E6、E8用BLASTx工具对非冗余蛋白质数据库nr进行了相似性搜索,在其他物种中找到了相似的基因序列。本研究筛选出的热休克蛋白基因、MHCⅠ类基因、精氨酸酶Ⅰ类基因和其他未知功能基因可以作为抗口蹄疫病毒研究中的侯选基因,其具体的功能有待今后进一步研究。     

珍稀濒危植物桫椤种群生命过程及谱分析

根据种群生命表和生存分析理论,以高度级为基础编制了桫椤种群特定时间生命表,绘制了生存函数曲线,分析了种群的生命过程.结果表明:桫椤种群结构为前期增长、后期稳定类型.生命期望在第4龄级最大,此阶段种群生存质量相对较高.种群存活曲线属于典型的Deevey-Ⅲ型.种群生命过程有3个死亡高峰期,分别是第2龄级向第3龄级、第10龄级向第11龄级和第12龄级向第13龄级生长阶段.种群存活率随龄级增加呈单调减少,相应的积累死亡率呈单调增加,变动幅度为前期大、后期小;死亡密度函数曲线呈现前期下降、后期平缓稳定的特点,凹点出现于第4龄级.谱分析结果显示,桫椤种群数量波动性是大周期内有小周期的多谐波迭加,各周期作用基本上随周期的缩短而减小,基波的影响最显著.     

杭州石荠苎

本文研究了我国特有、分布区极狭窄的一年生草本植物——杭州石荠苎     

用差异显示PCR技术克隆冬小麦春化设定cDNA克隆实验系统的建立

差异显示PCR技术是一种新近发展起来的在真核细胞中检测与克隆特异表达基因的手段。本文建立了用此技术克隆春化相关基因的研究系统,并提供了诸如总RNA的提取、污染DNA的去除、sscDNA的逆转录、PCR参数、扩增cDNA的电泳、特异cDNA的收集与重扩增等在方法上的细节。用这种技术分离了一个仅在春化20天这一特异时期表达的春化设定cDNA克隆VPC28。这些结果也适用于更加广泛的类似研究。     

紫蓬山区三种鹭种群繁殖成效的研究

：作者１９９６年４～７月在紫蓬山区国家级森林公园,对白鹭、池鹭和夜鹭繁殖种群的数量和繁殖成效进行了研究。结果表明：三块样地中,夜鹭的种群平均密度最大,白鹭的种群平均密度最小;白鹭、池鹭和夜鹭的种群繁殖生产力分别为２３７４ｉｎｄ／ｈｍ２、１４４１ｉｎｄ／ｈｍ２和２０１２ｉｎｄ／ｈｍ２;繁殖成效分别为５２０％、５５１％和４５１％。繁殖成效与巢位高度有关,低位巢卵损失率高,高位巢雏丢失率高。     

一个与非小细胞肺癌转移相关的基因--RAB5A基因

采用mRNA差异展示技术(mRNA DD)研究具有相同细胞来源,但转移能力高低不同的人肺腺癌细胞系AGZY83-a(低转移)和Anip973(高转移),分析在两个细胞系中基因差异表达的情况,发现在高转移细胞系中有RAB5A基因的表达.该基因为蛋白质入胞信号的调控者,为RAS超家族成员.为进一步证实其转录表达的调控改变情况,以及RAB5A高表达的临床意义,进一步采用RT-PCR和免疫组织化学的方法检测了50例临床非小细胞肺癌的手术标本,结果表明,RAB5A的表达有随转移发生而增强的趋势,而RAB5A的蛋白表达程度在有转移的病例中明显增强(P<0.05).     

NaCl胁迫下小麦突变体和野生型叶片中一些有机溶质累积和基因 …

盐胁迫下突变体和野生型叶片中的脯氨酸累积量均有显著的增加,野生型的增加幅度不及突变体。至９６ｈ,两者含量均下降,但突变体的脯氨酸一仍高于野生型。１００ｍｍｏｌ／Ｌ的ＮａＣｌ腔迫７２ｈ,突变体吐片中可溶性糖的人一有显著的增加,增另量随盐浓度增加而降低,至９６ｈ,各个盐浓度处理的突变体可溶性糖的含量基本恢复到其对照的水平;除１００ｍｍｏｌ／Ｌ协胁迫处理组外,野生型叶片中可溶性糖含量均大幅度下降。盐胁迫     

冬小麦春化作用相关cDNA克隆Vrc79的分子克隆

在低温需求型植物的发育过程中,春化作用是诱导植物成花的必要因子。在冬小麦春化进程中存在着一个核酸代谢的关键期,为了探讨春化作用的分子机理,以不春化及脱春化的冬小麦京冬1号（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ａｅｓｔｉｖｕｍＬ．ｃｖ．Ｊｉｎｄｏｎｇ　Ｎｏ．１）胚芽的ｍＲＮＡ为对照,通过减法杂交构建了富集冬小麦春化相关基因的ｃＤＮＡ文库,经过差异筛选分离到了一个仅在春化２１ｄ这一关键期表达,而在不春化、春化４ｄ、脱春化不表达的春化相关。ｃＤＮＡ克隆Ｖｒｃ７９。Ｎｏｒｔｈｅｍ杂交及同源性分析表明它是一个在植物中新发现的不同于低温胁迫诱导基因的春化特异克隆,其对春化需求型植物的成花诱导可能起重要的调控作用。