5′-磷酸二酯酶高产菌株的选育和发酵培养条件的优化

以ATCC14994为出发菌株,采用紫外线与亚硝基胍相结合的多次诱变育种,获得1株5′-磷酸二酯酶高产菌株HAT2228.通过单因子和正交试验对该菌株的产酶发酵条件进行了优化,优化发酵产酶条件为:蔗糖5%,酵母膏0 3%,蛋白胨0.3%,K2HPO4 0.8%,KH2PO40.8%,MgSO4 0.2%,ZnSO4 0.2%,培养基起始pH6 0,接种量10%,培养温度30℃,摇床转速120r/min,发酵时间48h.在优化条件下,HAT2228的产酶水平达1 329u/ml.     

苏云金杆菌33菌株最佳培养基和发酵条件研究

应用正交试验L27(313)对鳞翅目昆虫高毒效的苏云金杆菌33菌株的发酵培养基进行研究,得到了适合其发酵培养的优化复合培养基配方—0.5％玉米粉 2．00％黄豆粉 0．15％酵母粉 0．25％鱼粉 0．075％蛋白胨 0．25％磷酸二氢钾 0．05％碳酸钙 0．035％硫酸镁。另外实验还证实适当增加通气量、发酵初始酸碱度控制在pH7．5、发酵温度30℃、转速180r／min、培养40h更适合该菌株液体深层发酵。     

河蟹颤抖病病毒的分离纯化及其动物致病性试验

将人工复制发病的河蟹（中华绒螯蟹）组织匀浆。离心上清经聚乙二醇（PEG6000）沉淀,再经分子筛层析,分部收集分别测定256-300nm的吸光值,各收集峰用PEG20000,于4℃浓缩,制作负染标本经透射电镜观察,发现在第一峰浓缩液中存在大量球状病毒颗粒,大小50-100nm。用纯化的病毒进行动物致病性试验,接种石蟹（锯齿华溪蟹）发生“颤抖病”,并用ELISA双抗体夹心法进行检测,显示感染石蟹较对照石蟹有明显差异。     

不同地区分离的霍乱0139菌株交叉保护力试验

本文对得自不同地区的四株０１３９菌株做了毒力、免疫力及交叉免疫力试验;四个地区０１３９菌株免疫小鼠后血清ＩｇＧ、肠液ｓＩｇＡ抗体滴度的比较以及０１群霍乱与０１３９型霍乱的交叉保护力试验。结果表明：０１群霍乱与０１３９型霍乱无交叉免疫力。０１群霍乱菌苗对０１３９型霍乱弧菌基本无保护作用;四株菌株的自身毒力基本相同。３＃株免疫力高于其它株,用３＃株免疫后能抵抗２＃、３＃及５＃株的感染。四株菌株免疫小鼠     

252例前列腺炎患者前列腺液细菌培养及药敏试验结果

目的了解本地区细菌性前列腺炎患者感染的病原菌种类及耐药情况,为临床治疗提供依据。方法对252例细菌性前列腺炎患者的前列腺液作细菌培养,用美国德灵公司MicroScan Auto SCAN4型细菌鉴定仪及药敏分析仪对分离的细菌进行鉴定及药敏试验。结果252例标本中,阳性154例,阳性率61．1％,以金黄色葡萄球菌为主,其次为大肠埃希菌和表皮葡萄球菌。药敏试验结果显示,常规使用的抗生素如青霉素G、氨苄西林、复方新诺明、环丙沙星等耐药率较高,在61．3％-83．9％,而对万古霉素、亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素、利福平、左旋氧氟沙星等敏感性较高。结论细菌性前列腺炎患者的治疗,应以细菌培养及药敏试验结果为依据,指导临床合理选用抗菌药物。     

高压蒸汽灭菌柜性能验证方法的研究

高压蒸汽灭菌柜在使用之前和运行一定时间后,必须进行性能验证,采用热分布,热穿透和微生物挑战试验法对GE,GEV型脉冲式蒸汽灭菌柜的性能进行验证,多孔物质及流体物质灭菌循环中,灭菌腔内不存在冷点,具备有效的热穿透力,嗜热脂肪芽孢杆菌（ATCC7953）在规定灭菌时间内被完全杀死。因而确认高压灭菌柜的各项性能均达到生产要求,由此建立的一套验证方案及试验方法和结果得到了国家GMP认证中心的认可。     

用酶联免疫吸附试验快速检测虹鳟的传染性胰脏坏死病病毒

我国于1987年从进口的虹鳟中分离了传染性胰脏坏死病病毒(Infectious pancreatic necrosis virus简称IPNV),并进行了血清学鉴定。由于病鱼没有特有的临床症状,所以迅速查找鱼体内特异性的病毒是十分必要的。       

抗牛血清IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

用牛血清IgG免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用含山羊血清的培养基培养细胞,上清用间接ELISA法筛选。获得4株能稳定分泌抗牛血清IgG的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为1G5、2A8、3F5、4C5。其中2A8为IgG2a,其余3株为IgG1;腹水单抗的ELISA滴度均超过10-5;除3F5株单抗与山羊血清有交叉反应外,1G5、2A8、4C5株与人、马、猪、羊、兔、豚鼠等血清均不发生交叉反应;4株单抗与制备病毒性疫苗的基质液呈阴性反应;4株单抗识别分子量为160kD的牛血清IgG的两个不同抗原表位;4株单抗相对亲和力大小依次为4C5>2A8>1G5>3F5,相对敏感度依次为2A8>4C5>3F5>1G5;4株杂交瘤细胞株的染色体计数均大于90条,连续培养三个月以及冷冻保存半年后复苏,细胞生长良好。使用这些单抗建立的双抗体夹心法检测生物制品中的残留牛血清IgG。     

用皂土法制造型特异性肉毒诊断血清

用皂土为载体与类毒素结合方法及破伤风类毒素抗原抗体絮状反应方法去除A、B、C、D、E、F型肉毒抗血清原料中的异型和异种抗毒素(破伤风抗毒素)。制备的A、B、C、D、E、F型肉毒诊断血清每1m l均能中和相应型的肉毒毒素10000LD50以上,而中和异型肉毒毒素或破伤风毒素均低于5 LD50;A、B、C、D、E、F各型混合后的混合型血清每1m l能中和各型肉毒毒素亦大于10000 LD50,中和破伤风毒素低于5 LD50,即效价和特异性符合规程要求。     

大量元素胁迫下南瓜化感作用研究

研究采用水培实验、生物测试及室内分析相结合的方法,研究在不同大量元素(N、P、K、Ca、S、Mg)营养胁迫下幼苗期南瓜根系分泌物及其提取物对南瓜幼苗生长的化感作用。结果表明：南瓜具有自毒作用,不同大量营养元素胁迫对其胚根和胚芽生长均产生了抑制作用。不同的营养条件对其根系分泌物的影响不同,营养元素的合理搭配可以减轻自身的自毒作用。南瓜根系分泌物经乙酸乙酯提取的活性有机物埘南瓜胚根牛长亦表现出抑制作用,且抑制作用程度较大。南瓜幼苗期根系十物质水浸液巾存在着抑制南瓜幼苗生长的化感物质：筛选出南瓜根系分泌物对自身幼苗生长产生抑制作用最弱的大量元素水平优化组合,为南瓜的营养胁迫机理提供依据。