拟南芥WUSCHEL基因在转基因烟草中的超表达(英文)

The Arabidopsis WUSCIHIEL (WUS） gene plays a key role in the specification of the stem cellsin the shoot apical meristem (SAM). A cDNA of WUShas been amplified with the RT-PCR approach fromArabidopsis. The plant overexpression vector was constructed. It was driven by a dual enhanced CaMV35Spromoter. The construct was transformed into tobacco (Nicotiana tabacum L.) via Agrobacterium mediation.Dramatic phenotypic changes appeared in the WUS overexpression transgenic plants. Aberrant celldivisions and ectopic organogenesis could be found in almost every aerial parts of the transgenic tobaccoexcept the meristems and the inner two floral whorls. The data showed a highly conserved function of WUSin tobacco, and suggested that WUS is involved in organogenesis. The leaves were malformed, whichstrongly matched those only described previously for plants grown in the presence of polar auxin transportinhibitors. It suggested a possible function of WUS in leaf development. These results provide usefulinformation for functional analysis of WUS and important biotechnological implication as well.     

病毒诱导的PVX cp转基因沉默及其DNA甲基化

利用PCR方法获得了马铃薯X病毒(PVX)外壳蛋白(CP)基因(cp),并将其构建到植物表达载体中,利用农杆菌介导的叶盘法转化烟草(Nicotiana tabacum L.)。Northern杂交及Run on实验表明有3株转基因烟草发生了转录后基因沉默。发生沉默的cp基因的甲基化分析结果表明,发生转录后基因沉默的cp基因发生了不同程度的甲基化,说明DNA甲基化并没有完全抑制cp基因的转录。利用PVX病毒对外壳蛋白正常表达的转基因烟草进行接毒,Northern杂交检测结果表明,病毒诱导cp发生了基因沉默。进一步的Run on结果表明,转基因烟草中cp基因在沉默前后转录速率并没有发生变化,说明病毒诱导的沉默是一种转录后沉默。对cp基因沉默前后的甲基化分析表明,病毒的侵染导致了cp基因甲基化程度的增加。     

转新城疫病毒融合蛋白基因水稻植株的获得

以编码新城疫病毒融合蛋白(NDV—F)基因为外源基因,与玉米泛素蛋白(Ubi)启动子和农杆菌胭脂碱合成酶基因(NOS)终止子构建成嵌合基因,构建了适宜于农杆菌介导转化水稻的表达质粒pUNDV;并以潮霉素磷酸转移酶(HPT)基因作选择标记基因、β-半乳糖苷酸酶(GUS)基因作报告基因,借助于农杆菌介导转化水稻,获得了多株转基因植株。PCR分析和GUS活性检测结果证实含有NDV—F基冈的T—DNA已整合到水稻基因组中,为研制廉价的转基因水稻新城疫基因工程疫苗奠定了基础。     

转几丁质酶基因黑杨的获得

以G1黑杨幼叶为外植体建立了组织培养高频再生体系 ,对传统的农杆菌介导法进行了改进 ,用来自于菜豆的几丁质酶基因 (CH5B)进行转化 ,经PCR和PCR Southern杂交鉴定 ,证实CH5B基因已整合入G1黑杨核基因组中。     

试纸条技术在转基因农作物检测中的应用

简述了试纸条技术的基本原理及试纸条技术在转基因农作物检测中的优势与不足 ,并对试纸条技术对转基因农作物检测的应用进行了展望。     

一种改良的转基因甘蔗基因组DNA提取方法

用改良的转基因甘蔗基因组DNA提取方法可从少量的转基因甘蔗叶片中简便快速地提取高质量的DNA,有效地去除甘蔗叶片中的多糖、多酚类和RNA等物质。经核酸蛋白测定仪及凝胶电泳分析表明,该改良方法提取的DNA具有典型的DNA分子标准紫外吸收光谱特点,其A260/A280为1．7-1．9,A260/A230为1．8-2．0,叶片的DNA产量为45-60μg(100mg)^-1,适用于对转基因甘蔗进行PCR、酶切和Southern杂交检测分析。     

人白介素-1β诱导兔膝关节炎模型的临床及病理特点

目的　以hIL 1 β为炎症抗原诱导兔膝关节炎 ,观察评价其关节炎和滑膜炎的临床及病理特点。 方法　对通过逆转录病毒载体 (MFG)导入hIL 1 β基因的HIG 82细胞进行体外培养和筛选 ,之后注入 2 4只新西兰白兔的膝关节腔中 ,以注入异体兔滑膜细胞的 8只兔作对照。观察兔全身情况、膝关节局部及滑液的变化和滑膜炎的病理特点 ;并用RT PCR和ELISA法检测hIL 1 β的表达。 结果　转染的兔滑膜细胞系表达大量hIL 1 βmRNA ,分泌hIL 1 β浓度每毫升达 2～ 1 5ng 1 0 5细胞。关节炎滑膜组织有hIL 1 βmRNA的表达 ,关节腔灌洗液中hIL 1 β的浓度介于 2 0～ 6 0pg ml之间 ,血清中未检测到hIL 1 β。关节炎兔的血沉 (ESR)显著增快 ,是对照组的 1 0～ 1 5倍 ,并有发热、体重下降、厌食等全身表现 ;膝关节肿胀明显 ,直径较对照组增加 2 0 %～ 30 % ,滑液中白细胞数显著增加 ,达1 0 1 0 ～ 1 0 1 2 L ;关节炎的严重程度与注入关节腔的MFG hIL 1 β转染兔滑膜细胞数目成正相关。滑膜组织呈结节样增生 ,病理组织学分析显示 :滑膜细胞明显增生 ,可见栅栏样排列的滑膜细胞 ;滑膜基质增生显著 ,有大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润 ,其间可观察到淋巴细胞聚集 ,并有纤维素样坏死和血管新生现象。滑膜炎在注入hIL 1 β 细胞后的     

一种快速鉴定转基因植物纯合体的新方法

植物转化中鉴定转基因植物的整合性是一个很重要的步骤,常规方法是对独立分离的转基因T1代植株产生的T2代进行转基因分离比率研究,以检测T1代的转基因整合状态,不仅费时费力,而且浪费了T1代资源。本介绍一种应用双重定量实时PCR技术鉴定转基因植物纯合子的新方法：以T1代植物DNA为模板,根据转基因后代的Ct表型值鉴定其转基因整合状态,Ct值接近2的为转基因纯合型,Ct值接近1的为转基因杂合型。用这种方法,可以同时对数十个T1代转基因幼苗的整合状态进行快速鉴定,准确率为100％。     

国内外转基因作物产业化的比较

当前,全球转基因作物研发和产业化迅猛发展, 创造了巨大的经济、社会和生态效益。转基因作物产业化发展的快慢, 是关系到我国农业可持续发展和提高农产品国际竞争力的重大问题。就国内外转基因作物的产业化进行了优劣势比较, 并从影响转基因作物产业化的技术瓶颈和安全性监管两方面进行了探讨。