全文获取类型
收费全文 | 9126篇 |
免费 | 366篇 |
国内免费 | 3853篇 |
出版年
2024年 | 73篇 |
2023年 | 219篇 |
2022年 | 296篇 |
2021年 | 353篇 |
2020年 | 355篇 |
2019年 | 320篇 |
2018年 | 215篇 |
2017年 | 264篇 |
2016年 | 309篇 |
2015年 | 376篇 |
2014年 | 599篇 |
2013年 | 405篇 |
2012年 | 600篇 |
2011年 | 728篇 |
2010年 | 615篇 |
2009年 | 636篇 |
2008年 | 970篇 |
2007年 | 587篇 |
2006年 | 526篇 |
2005年 | 625篇 |
2004年 | 725篇 |
2003年 | 590篇 |
2002年 | 582篇 |
2001年 | 535篇 |
2000年 | 370篇 |
1999年 | 322篇 |
1998年 | 265篇 |
1997年 | 146篇 |
1996年 | 115篇 |
1995年 | 138篇 |
1994年 | 117篇 |
1993年 | 68篇 |
1992年 | 65篇 |
1991年 | 68篇 |
1990年 | 32篇 |
1989年 | 42篇 |
1988年 | 16篇 |
1987年 | 11篇 |
1986年 | 11篇 |
1985年 | 15篇 |
1984年 | 8篇 |
1983年 | 9篇 |
1982年 | 4篇 |
1981年 | 8篇 |
1963年 | 2篇 |
1950年 | 10篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 16 毫秒
991.
构建了一组HNP-1原核表达载体,其中有几个含SD或序列的载体,在表达产物中检测到了HNP-1的存在,说明宿主菌是否在任何情况下都降解外源小分子多肽是一个值得考虑的问题.另外从表达载体在大肠杆菌JM109和JM109(DE3)中蛋白表达量的差异也可推测HNP-1发生了低水平的表达,HNP-1对细菌的作用与HNP-1浓度和细菌本身的生理状况密切相关. 相似文献
992.
人白细胞介素18(IL-18)是新近发现的细胞因子之一.研究表明它参与T1辅助细胞介导的细胞免疫.利用RT-PCR技术从人外周血细胞扩增得到了IL-18的cDNA并测定其核酸序列.利用基因重组技术构建IL-18的表达载体,并在大肠杆菌中进行了表达.这为以后进一步研究IL-18的功能奠定了基础. 相似文献
993.
番木瓜环斑病毒YsCP基因的序列分析和植物表达载体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
用双脱氧链终止法分析了克隆的番木瓜环斑病毒(PRV)Ys株系外壳蛋白(CP)基因的序列,结果表明YsCP基因全长858nt。对PRV国内外16个株系或分离物CP基因的比较发现,YsCP基因与国内株系或分离物CP基因的同源性较高(94.44%~97.68%),而与国外株系或分离物CP基因的同源性较低(88.88%~92.70%)。CP基因之间的差异主要靠近基因5’端,特别是在YSCP基因第63nt后连续缺失6nt,SmGTHAI和SRI的CP基因也在此处缺失3nt。将YsCP基因插入中间质粒pRokⅡ的CaMV35S启动于和nos终止序列之间形成CP基因的植物表达载体pRPCY,通过三亲交配使pRPCY进入农杆菌LBA4404,与其中的pAL4404构成双元载体系统。 相似文献
994.
丙型肝炎病毒核酸疫苗的免疫效果观察 总被引:3,自引:1,他引:2
将丙型肝炎病毒C+E1区基因克隆到不同的真核细胞表达载体pCDNA3.1(+)和pSVL中,通过肌肉注射和皮下注射免疫BALB/C及F1小鼠后,产生了抗HCV/C区抗体。其中核酸疫苗pcDNA3.1-HCV/C+E1的免疫高峰的出现早于pSVL-HCV/C+E1,F1小鼠的抗体应答强于BALB/小鼠。肌肉注射优于皮下注射。 相似文献
995.
两种视觉刺激状态VEP的源定位分析 总被引:1,自引:0,他引:1
有关诱发电位的源定位问题是近年来受到关注的脑研究前沿领域之一。我们采用了两种视觉刺激来对这个问题作了初步探讨。用棋盘格来对双眼的全视网膜以及上、下半视网膜进行刺激。并对这三种大面积皮层活动状态的诱发电位中最稳定的成分P100进行了偶极子源定位分析。我们还对5'和10'的交叉视差、非交叉视差的红绿随机点立体图诱发的VEP中较稳定的成分P100和P200进行了偶极子源定位。作者认为大脑对于视差的加工是由人脑内的一个功能性网络来完成的。对于所用的源定位模型作了进一步的讨论 相似文献
996.
用不同载体在大肠杆菌中表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1和G2 总被引:4,自引:1,他引:3
为提高汉瘫病毒囊膜糖蛋白G1和G2的表达水平,利用两种不同的表达载体pKK223-3和pGEX-4T-1构建G1和G2的表达质粒,其中PGEX-4T-1为融合蛋白表达载体。诱导所构建的G1和G2表达质粒表达G1和G2,用表达的G1和G2免疫小白鼠诱导产生的抗汉瘫病毒特异性的间接免疫荧光抗体摘度无明显差别,从而说明表达载体对汉瘫病毒G1和G2在大肠杆菌中的表达水平影响不大,表达水平都较低。同时,利用PGEX-4T-1构建G1和G2的部分多肽的表达质粒,但表达水平较完整的G1和G2无明显提高。 相似文献
997.
肝再生增强因子的cDNA克隆,表达及表达产物的生物活性研究 总被引:23,自引:1,他引:22
以肝部分切除后再生肝组织为起始材料,利用RT-PCR扩增出大夺再生增强因子(ALR),亚克隆子于PGEM-T载体,核苷酸序列测定证实为大鼠ALR;将ALPCDNA亚克隆于PBV220质粒,构建了原核表达载体,并获高效表达菌株,特异表达蛋白占细菌总蛋白的15%,原核表达的ALR在体外缺乏促进大鼠原代培养肝细胞及SMMC-7721肝癌细胞DNA合成的活性,但天体内1/3肝部分切除模型中可刺激肝细胞DN 相似文献
998.
999.
人类免疫缺陷病毒1型(HIV—1)核心蛋白(p24)在大肠杆菌中的表达,纯化… 总被引:2,自引:0,他引:2
在大肠杆菌中,利用新构建的含T7噬菌体g-10核糖体结合位点(RBS),以及λ噬菌体PR启动子的新型原核表达载体,通过表达gag-pol基因片段,获得了具有天然序更的人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)核心蛋白P24(CA)的高效表达,克隆的gag-pol基因片段 在其阅读框架移位区域插入了4bp碱基,其的病毒蛋白酶在阅读框架上与gag一致,从而实现了对gag-pol融合蛋白有有效加工,产生成熟的核 相似文献
1000.
SSKOIDE 《Cell research》1997,7(1):51-59
INTRODUCTIONEpidermalgrowthfactor(EGF)wasinitiallyisolatedandpurifiedfromthesubmaxillarygland(SMG)ofmalemouse[1].Itisapolypeptidecomposedof53aminoacidresidues[2].Itinfluencescellproliferationanddifferentiationandmodulatesthegrowthanddevelopmentofmammalianorgans[3--7].AnoteworthyfindingisthatextirpationofmouseSMGresultsinamarkedreductionofserumEGFconcentrationassociatedwithanimpairedspermatogenesis[3].ThisfindingsuggeststhatEGFmayregulatespermproductionanddifferentiation.Inhumantest… 相似文献