动物基因组编辑中提升CRISPR/Cas9介导的同源重组效率研究进展*

基因组编辑技术可以对DNA或RNA进行精准改造,极大地促进了生命科学的发展。CRISPR/Cas9系统在靶位点诱导DNA发生双链或单链损伤,细胞对损伤部位采用无供体模板的非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ)或有供体模板的同源重组(homologous recombination,HR)修复。基于HR的基因组编辑策略通常被用于获得DNA的精准改造,而NHEJ在动物DNA损伤修复中起主导作用。为了提升HR效率,研究人员设计了多种方案,包括CRISPR/Cas9系统优化和DNA修复通路调控等。从DNA损伤修复途径、Cas9变体选择、sgRNA设计、供体模板设计、DNA修复途径相关蛋白功能调控、供体模板募集效率提升、细胞周期调控及编辑细胞生存效率提升等方面详细综述了相关研究成果,发现尚未开发出放之四海而皆准的HR提升策略,基于HR的基因组编辑需要针对具体案例制定个体化策略。旨在为动物基因组编辑中提升CRISPR/Cas9介导的HR效率研究提供理论参考,为动物基因功能分析、基因治疗和经济动物基因编辑育种提供帮助。     

疼痛已久……

正疼痛作为每个人一生中体验最早、最多的主观内在感觉,是我们经常遇到的问题,古代人当然也不例外。在医学不发达的年代,人们总是用超自然的原因去解释一切疾病,包括疼痛。他们认为,是外界物体侵入了人体,并将超自然的物质带入人体从而引起了疼痛。后来,人们普遍认为感受疼痛的中枢是心脏,这种认识一直持续了2000年。后来,希腊医学家阿克梅恩提出脑是感觉和思考的中枢,并区分了5种感觉。希腊学者希波克拉底又进一步提出4种体液学说,当其中一种体液过     

Unsaponifiable Matter Extraction From Chrysomya megacephala Oil

许多不皂化物成分作为药效成分被应用于恶性肿瘤的临床治疗中,五谷虫不皂化物的提取分离可以充分发挥这种传统中药材的功效.通过单因素实验得到不皂化物酸值较低而产率较高的最佳工艺条件是石油醚添加量为10 mL/g,碱添加过量5％,在60℃的条件下反应15 min,0.5 mol/L的KCl溶液添加量为50 mL/g.通过响应面优化后,得到最佳的不皂化物酸值和提取率分别为70.21 mg KOH/g和58.05％.     

皮下免疫治疗联合沙美特罗替卡松粉吸入剂对中度支气管哮喘缓解期患儿血清Th1/Th2相关细胞因子表达水平的影响

摘要 目的：探讨皮下免疫治疗联合应用沙美特罗替卡松粉吸入剂治疗中度支气管哮喘缓解期患儿的临床疗效及对Th1/Th2相关细胞因子表达水平的影响。方法：选取南方医科大学佛山市妇幼保健院2020年1月～2020年12月收治的中度支气管哮喘缓解期120例患儿,按随机分组原则分为观察组和对照组各60例。对照组予以沙美特罗替卡松粉吸入剂（舒利迭）治疗,早上及晚上各吸1次。观察组在对照组的基础上给予皮下免疫治疗,进行12个月疗程的治疗。对比两组患儿支气管哮喘发作次数以及临床控制率、肺功能变化。检测两组患儿血清Th1相关细胞因子[白细胞介素-2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）]和Th2相关细胞因子[白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-6（IL-6）]水平。结果：与治疗前相比,两组患儿治疗6月及治疗12个月后发作次数均显著降低（P＜0.05）,且观察组患儿哮喘发作的次数低于对照组（P＜0.01）;治疗12个月后,观察组患儿的临床控制率显示为90%,显著高于对照组的66.67％（P＜0.05）。治疗6个月后、治疗12个月后,观察组患儿的第1 秒呼气流速（FEV₁）占正常预计值百分比（FEV₁%）及呼气峰流速（PEF）占正常预计值百分比（PEF%）均显著高于对照组（P＜0.01）;而与治疗6个月后相比,两组治疗12个月后上述2项指标均显著升高,且观察组明显高于对照组（P＜0.01）。治疗12个月后,两组患儿血清IL-2、IFN-γ水平均显著升高,且观察组明显高于对照组（P＜0.01）;而两组血清IL-4、IL-6水平均显著下降,且观察组明显低于对照组（P＜0.01）。结论：皮下免疫治疗联合沙美特罗替卡松粉（舒利迭）治疗中度支气管哮喘缓解期患儿的临床疗效确切,患儿支气管哮喘发作次数明显减少,肺功能改善明显,其作用机制可能与调节Th1/Th2相关细胞因子平衡有关。     

基于MODIS数据的北京植被叶面积指数的时空变化

利用MODIS产品中分辨率为1 km的LAI数据,结合植被功能型分类,分析了2010—2012年北京植被LAI的月际变化与空间分布特征;并在GIS与Timesat软件的支持下,探讨了各种植被类型LAI的多年变化。结果表明:在2010—2012年的不同月份中,北京的植被LAI较高值均出现在西北山地、东北山地、怀柔北部等林地,并呈现从东北山地至西南向中心城区的递减分布;其次,基于LAI叠加分析的结果显示,各种植被类型LAI年平均值的波动均较小,在2010—2012年,针叶林、阔叶林、草地、作物LAI的年均值波动范围分别在1.45~1.50、1.24~1.27、0.90~0.92和0.48~0.51;此外,Savitzky-Golay平滑滤波结果表明,针叶林、阔叶林、草地、作物LAI的月际变化基本体现了植被的生长轨迹。     

你的肾脏健康吗?——从“零”到懂,教你看肾的检查

当你在医院就诊时,穿行于医院各个不同的部门,拿到各种检查报告单,会不会突然觉得很茫然?望着满目的各种符号、各种术语,也许你会满头雾水,因为不懂,突然我们会发现在健康方面,其实我们并不了解自己。如果你不想再次茫然,如果你想成为自己的健康管理专家,那么一起来了解一下医学相关常识吧。肾病来袭,我们就从肾脏的检查开始,从零到懂,教你看肾脏检查。     

新生期反复惊厥对认知和海马CaMKⅡ表达的远期影响及干预研究

新生期惊厥活动可造成严重的神经后遗症,如成年期大脑对惊厥的易感和易损性提高,严重者产生认知功能损害.对发育期惊厥性脑损伤远期预后的研究,尤其是分子机制及其干预的研究具有重要的临床意义.探讨了新生期大鼠单次长程或反复惊厥对学习、记忆能力和海马突触后致密物质钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)表达的远期影响及运动训练的干预作用.生后6天(P6)的SD大鼠随机分成单次长程惊厥组(SS)、反复惊厥组(RS)和对照组,每组12只.3组大鼠分别于P27～P31、P58～P61、P80～P82采用Morris水迷宫检测学习、记忆功能.P51～P56对SS组和RS组进行踏转轮训练.最后脑组织切片观察CaMKⅡmRNA在海马的表达.结果显示,第一次Morris水迷宫测试RS组第1天～第4天潜伏期明显高于对照组,具有显著性差异(P＜0.05),第二次水迷宫RS组第1天～第2天的逃避潜伏期较对照组仍显著延长,具有显著性差异(P＜0.05),第三次测试各组之间差异无统计学意义.搜寻策略显示,在第一次Morris测试时RS组第3天～第4天边缘式搜寻比例明显高于对照组,具有显著性差异(P＜0.01),同时RS组第3天～第4天趋向式搜寻比例明显低于对照组,具有显著性差异(P＜0.01),而第二次和第三次水迷宫测试3组间趋向式和直线式搜寻策略无明显差异.在记忆实验中,原平台象限游泳距离与总距离的比值,RS组第三次较对照组显著降低,有统计学意义(P＜0.05);另外RS组1～3天趋向式搜寻比例均明显低于对照组,有显著性差异(P＜0.05).CaMKⅡ原位杂交显示,各组CaMKⅡmRNA在海马均有明显表达,但是在齿状回和门区RS组表达明显低于对照组,具有统计学意义(P＜0.01).研究表明,新生期反复长程惊厥能够对学习和记忆功能产生远期的损害,可能与海马记忆分子CaMKⅡ表达下调有关,而单次长程惊厥对学习记忆无明显影响.早期运动训练能够明显改善反复惊厥所致的学习能力损害,但对记忆能力效果仍较差.     

海产品中副溶血性弧菌的分离、鉴定及与临床分离株的生化性状比较

利用TCBS和科玛嘉两种选择性培养基从60份海产品中初筛得到27株疑似副溶血性弧菌,经生化鉴定,27株均为副溶血性弧菌,其中22株是从鲜活海产品中分离得到,5株从冷冻海产品中分离得到.进一步与临床上得到的32株副溶血性弧菌进行了四个特殊生化试验的比较,结果发现副溶血性弧茵临床分离株与海产品分离株在溶血、脲酶及枸橼酸盐利用3个生化试验上存在差异,而阿拉伯糖利用试验无差异,这为根据生化性状研究不同来源副溶血性弧菌提供基础.     

北京地区不同地形条件下的土地覆盖动态

利用MSS/TM影像和1∶250 000 高程数据分析了1978~2001年北京地区土地覆盖的变化。为研究人类活动对土地覆盖类型及植被变化的影响,根据植被的分布规律和人类活动影响,利用数字高程模型(DEM)将研究区遥感影像分为不同海拔段,分别建立标志进行解译。通过转移概率矩阵计算、不同地形因子影响下的土地覆盖类型分布的GIS分析,得到如下结果:1) 1978~2001年间北京市土地覆盖变化主要发生在平原和低海拔、小坡度的平缓地区,表现为农业用地向城镇用地的转变;高海拔地区主要为天然植被所覆盖,土地覆盖变化相对较小,主要是灌丛向林地的转变。2) 地形因子显著影响土地覆盖类型的分布及变化。随着海拔的升高和坡度的增大,农业用地和城镇用地减少,林地和灌丛逐渐增加。坡向对植被的分布也有较大影响。     

尿素(UREA)血清标准物质的制备及定值

采用新鲜人血为原材料,制备成具有UREA标准浓度(5.32±0.16)mmol/L的血清标准物质,采用分光光度法对此标准物质进行定值,并且对UREA浓度含量进行不确定度评定,均匀性稳定性检验。