几种生理因素对子房未授粉南瓜胚形成的影响

以南瓜品种‘蜜本’为试材,研究生理因素影响未授粉南瓜胚形成的结果表明：开花前1d的子房最适宜于胚的诱导;胚诱导前以35℃高温处理6d后胚形成能力显著提高;高浓度2,4-D促进胚的发生,抑制愈伤组织的形成;加有4．0mg··L^-1 2,4-D、0．5mg·L^-1 NAA和0．5mg·L^-1 6-BA的MS培养基上的出胚率最高（20．6±3．8）％,每个子房块的平均出胚数达11．3±3．2。     

南瓜未授粉子房培养形成再生植株的研究

以‘贵阳小青瓜’(南瓜)未授粉子房为外植体,在离体条件下研究热激时间和TDZ浓度对胚状体诱导的影响。进一步优化试验步骤,探讨直接获得形成再生植株的方法,加速育种进程。结果表明:35℃高温黑暗培养5d后转入25℃光照培养90d能直接形成再生植株;培养基中附加TDZ浓度在0.04~0.06mg/L能诱导离体子房直接产生再生植株,并以0.06mg/L诱导效果最好,出胚率为22.57%,植株再生率为14.30%。     

用子房整体透明法和微分干涉差显微镜研究水稻的胚胎发育

水稻的胚囊处于胚珠组织的包围之中,外面还有子房壁,以往观察子房都是用切片的方法.切片制作的过程相当繁杂,并且需要掌握熟练的染色技术。根据连续切片来建立立体概念也需要经验。为了寻找观察胚囊结构的简便方法,人们曾提出过胚珠水解压片法、整体解剖法、酶分离法等,但也需要精细的手工操作,并且不能保证每个子房或胚珠都可获得其中的胚囊。整体透明是个比较好的方法,Herr采用胚珠整体透明法在相差和干涉显微镜下观察一些植物的大孢子母细胞、大孢子和早期的胚囊;Young用此法鉴定buffelgrass的无融合生殖过程     

小麦外源DNA导入及转化的初步研究

采用改进的酚-RNA酶法从野生一粒、野生二粒、提莫菲维和波兰小麦幼苗中提取总DNA,用子房注射法和花粉管途径导入云南铁壳麦1号和湖北生产上应用的鄂恩1号小麦,发现D1代出现供体性状或新的变异性状,有些变异性能遗传到后代。     

葫芦科植物幼嫩子房壁制片技术的优化及其染色体倍性鉴定

该研究利用黄瓜、甜瓜、西瓜和西印度黄瓜这几种葫芦科植物的幼嫩子房壁作为材料进行染色体制片,探索子房材料的样品大小、预处理时间和酶解时间对染色体制片的影响及其优化,并用该制片方法对黄瓜候选单倍体植株的子房壁进行倍性鉴定和荧光原位杂交实验。结果发现:(1)黄瓜、甜瓜、西瓜和西印度黄瓜的幼嫩子房壁最佳预处理时间分别为1 h 30 min、1 h、55 min和45 min,子房长度为0.2～1 cm,子房壁材料切成边长为1～1.5 mm小块,酶解时间为1 h 10 min～1 h 20 min时,用该优化制片方法均可观察到较多的分裂相。(2)利用该方法鉴定结果显示,葫芦科植物黄瓜、甜瓜、西瓜和西印度黄瓜的染色体分别为14、24、22和24条,黄瓜候选单倍体植株的体细胞染色体数为7条。(3)将该制片方法获得的染色体装片用于荧光原位杂交结果显示,在二倍体黄瓜染色体中有3对明亮的45S rDNA杂交信号和1对5S rDNA杂交信号,而单倍体黄瓜中相应信号数量均减半;在甜瓜、西瓜和西印度黄瓜中均有2对45S rDNA杂交信号和1对5S rDNA杂交信号。研究认为,利用葫芦科植物子房壁作为制片材料,不仅可以获得良好的分裂相,还具有易于取材、制片效率高等优点,因此子房壁制片法是研究植物染色体数目和鉴定倍性的有效方法,且该制片方法也适用于进一步的荧光原位杂交分析。     

大花蕙兰子房授粉前后基因组DNA胞嘧啶甲基化状态的MSAP分析

应用甲基化敏感扩增多态性(Metyhfion sensitive amplified polymorphism,MSAP)技术分析了大花蕙兰(Cymbidium hybridium)授粉前后子房DNA甲基化状态的变化(甲基化水平和甲基化差异模式).采用72对引物进行选择性扩增,共得到5892条带,其中748条带为甲基化多态性带.结果显示DNA甲基化在大花蕙兰子房发育过程中发牛频繁,从授粉前后子房的总扩增位点甲基化水平(14%和11.4%)和全甲基化率(9.5%和7.8%)来看,授粉后都略低于未授粉子房,表明子房在授粉后的发育过程中在某些位点发生了去甲基化.除甲基化水平有变化外,大花蕙兰子房授粉前后的DNA甲幕化模式也存在较大差异,共榆测到14种带型,分为两大类(Ⅰ和Ⅱ型).其中,授粉前后DNA甲基化状态保持不变的位点较少,只占25.6%,归为Ⅰ型;大部分榆测位点(占74.4%,归为Ⅱ型)的DNA甲基化模式在授粉前后存在显著差异.上述结果表明,大化蕙兰子房发育过程中以DNA甲基化为代表的表观遗传调控起重要作用.本研究的开展将促进对与大花蕙兰子房发育相关的甲基化差异片段及受DNA甲基化调控的关键基因的克隆,进而为从表观遗传学这一新角度揭示大花蕙兰子房发育的分子机制奠定基础.     

水稻早熟多子房突变体加以5的遗传分析和基因定位

在水稻中花11的后代中筛选到1例花器官数目突变体,突变体主要表现为多雄蕊、多子房和早开花。遗传分析表明,该突变表型受1对隐性核基因控制。因为对花器官数目突变体曾有报道,如fon1、fon2、fon3和fon4,所以该突变体暂定名为fort5。利用fort5与籼稻品种华粳籼74构建的F2群体对fort5进行基因定位,发现其与第6染色体上的标记RM400和RM412连锁,遗传距离分别为10．5cM和1．6cM。通过在两标记间发展6个新的Indel标记,将该基因定位于116kb区间。     

油茶叶肿病子房瘿体和叶片瘿体的形态结构特征观察

采用光学显微镜观察了油茶叶肿病子房瘿体和叶片瘿体的形态特征和组织结构特点。结果表明:(1)油茶叶肿病瘿体是油茶的幼嫩子房和幼叶被细丽外担菌感染后所导致的组织增生而成的,细丽外担菌分布于成熟子房瘿体的外表面和叶片瘿体的表面。(2)子房瘿体由受感染的雌蕊子房增殖而来,成熟后表皮层脱落。(3)子房壁分两层,外层子房壁肉质肥厚,主要由大型薄壁细胞构成,是食用的主要部分,内层子房壁为较薄的心皮层,内外两层子房壁之间具有较大的空隙;心皮内有胚珠,胚珠着生在中轴胎座上,胚珠内部中空而没有育性。(4)叶片瘿体为受感染的幼嫩叶片增殖所致,由大型薄壁细胞构成,瘿体表面具表皮层,成熟后表皮脱落。(5)在正常叶片与叶片瘿体的过渡区内有维管束相通,瘿体侧的厚度比正常叶片厚度增加3～4倍,细胞体积增大5～10倍,但瘿体细胞内无叶绿体。     

黄瓜生长素结合蛋白cDNA片段的克隆及其表达

以黄瓜子房 (幼果 )RNA为模板 ,应用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR) ,首次扩增出黄瓜生长素结合蛋白基因 (ABP1)cDNA片段 ,并进行测序和同源性分析。对ABP1基因在黄瓜子房 (幼果 )中的mRNA表达水平作了初步探讨 ,结果表明 ,该基因在开花前 1d的子房中表达信号较弱 ,在授粉后 2、4和 6d的幼果中表达增强 ;开花后 2d未经授粉的子房中 ,绿而膨大、能形成单性结实果者信号较强 ,黄而萎蔫、不能形成果实者信号较弱。Southern杂交结果表明 ,黄瓜生长素结合蛋白为小基因家族编码     

水稻早熟多子房突变体fon5的遗传分析和基因定位

摘要: 在水稻中花11的后代中筛选到1例花器官数目突变体, 突变体主要表现为多雄蕊、多子房和早开花。遗传分析表明, 该突变表型受1对隐性核基因控制。因为对花器官数目突变体曾有报道, 如fon1、fon2、fon3 和fon4, 所以该突变体暂定名为fon5。利用fon5与籼稻品种华粳籼74构建的F2群体对fon5进行基因定位, 发现其与第6染色体上的标记RM400和RM412连锁, 遗传距离分别为10.5 cM 和1.6 cM。通过在两标记间发展6个新的Indel标记, 将该基因定位于116 kb区间