超临界CO2提取栀子花头香成分的研究

先以活性炭吸附栀子花所散发的头香成分,然后用超临界CO_2对吸附的头香成分进行抽提,所得头香成分的质量和得率均高于传统的溶剂法净油.该方法可回收鲜花在堆放过程中所散发的头香成分而不影响其进行溶剂萃取时的浸膏得率.本文还研究了栀子花头香成分的散发规律。     

大花杓兰亲环素基因(CmCyP)的克隆及生物信息学分析

亲环素是一个多基因家族,在植物生命活动中发挥着重要的作用。该研究以大花杓兰(Cypripedium macranthum)为材料,采用RT-PCR技术克隆到1个亲环素基因(CyP),并对其进行生物信息学分析。结果表明:大花杓兰CyP基因的开放阅读框序列为525 bp,命名为CmCyP(GenBank登录号为MH411125),编码174个氨基酸。预测CmCyP蛋白是一个位于细胞质、相对分子量约为18 kD、理论pI为8.73、无信号肽、跨膜结构域的亲水性蛋白质。磷酸化和糖基化位点预测分析发现,CmCyP蛋白存在18个潜在的磷酸化位点和2个潜在的糖基化位点。蛋白保守结构域预测分析发现,CmCyP蛋白包含一个高度保守的肽脯氨酰顺反异构酶结构域,属于单结构域亲环素。对二级结构进行预测分析发现,CmCyP蛋白中存在无规卷曲70个、延伸链56个、α-螺旋23个、β-折叠25个,这4种结构元件在三级结构中也有体现。系统进化树结果显示,大花杓兰CmCyP蛋白与铁皮石斛(Dendrobium catenatum)和万带兰(Vanda hybrid cultivar)的CyP蛋白的亲缘关系较近。该研究首次克隆了大花杓兰亲环素基因(CmCyP),为进一步探讨CmCyP基因的生物学功能奠定了基础。     

狭叶栀子茎化学成分研究

从狭叶栀子(Gardenia stenophylla Merr.)茎乙醇提取物中分离得到11个化合物,通过理化性质及波谱分析鉴定为桦木酸(betulinic acid,1)、香草酸(vanillic acid,2)、丁香醛(syringaldehyde,3)、丁香酸(syringic acid,4)、对羟基苯甲醛(parahydroxybenzaldehyde,5)、邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,6)、邻羟基苯甲酸(2-hy-droxy-benzoic acid,7)、琥珀酸(succinic acid,8)、D-甘露醇(D-mannitol,9)、β-谷甾醇(β-sitosterol,10)、β-胡萝卜苷(β-daucosterol,11)。所有化合物为首次从该植物中分离得到。     

栀子提取物对单纯疱疹病毒1型感染小鼠VP16mRNA和IFN-γmRNA的影响

采用RT-PCR技术,分别在单纯疱疹病毒1型感染BALB/C小鼠4、7、10、14、21天时,检测小鼠脑内VP16 mRNA和IFN-γ表达的变化,考察栀子提取物T9对病毒复制和宿主免疫的影响。结果显示,栀子提取物T9各给药组VP16 mRNA相对表达量在同一时间内均低于病毒对照组,其中T9低剂量组VP16 mRNA相对表达量在感染后第21天明显下降,T9高剂量组VP16 mRNA相对表达量随时间变化呈现持续降低状态;栀子提取物T9各给药组在除第4天外的其他时间点IFN-γmRNA相对表达量均高于病毒对照组,其中T9低剂量组IFN-γ mRNA相对表达量在感染后第4天至第14天随时间变化而明显增高,之后表达量略有下降,T9高剂量组IFN-γ mRNA相对表达量随时间变化呈现持续升高状态。结果提示,栀子提取物T9可能通过上调单纯疱疹病毒感染小鼠脑内IFN-γ mRNA相对表达量,来抑制单纯疱疹病毒在小鼠脑内的复制。     

大花蕙兰基因组DNA提取及RAPD反应条件探索

用SDS、CTAB和改良CTAB法分别提取大花蕙兰叶片基因组DNA,发现以改良CTAB法提取的DNA纯度高,产率也较高。以5’-GGTGCTCCGT-3(’BA440)为随机引物,并以大花蕙兰品‘种金杯(’Cymbidiumhybridiumcv.HiroshimaGoldenCu“pSunnyMoon”)的DNA为模板,对RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA)反应体系进行了优化研究,结果表明,25μl反应体系中,Mg2 、TaqDNA聚合酶、引物、模板DNA和dNTP5种主要成分的适宜浓度或用量分别是:2.0mmol/L、1.0U、0.20μmol/L、25ng和0.20mmol/L。扩增程序优化为:94℃预变性4min;94℃变性0.5min,37℃退火1min,72℃延伸1min,40个循环;最后72℃延伸7min。     

SMART技术构建栀子cDNA文库

目的:构建栀子叶片cDNA文库。方法:提取栀子叶片总RNA。利用SMART技术合成双链cDNA。双链cDNA经限制酶Sfil酶切后与pDNR-LIB质粒连接。利用电刺激转化法将重组质粒导入E.coli DH5α而获得文库。利用PCR法检测文库的重组率。结果:原始文库滴度为2.63×105cfu/ml。随机检测文库中的15个克隆,表明重组率约为86.7%。选择14个插入片段的长度在400bp以上的克隆进行测序和生物信息学分析,结果预测的全长基因占所检测序列的64.3%。结论:成功构建了栀子叶片的cDNA文库,为栀子基因的结构和功能的研究提供了基础。     

大花蕙兰鲜花香气成分的研究

利用气相色谱-质谱（GC/MS）分析技术对浙江栽培的大花蕙兰品种‘绿翡翠’（Cymbidium Hybrids）和‘台北小姐’（C.Miss Taipei）的鲜花进行了香气成分和含量的测定。结果表明：两种大花蕙兰香气成分的组成和含量存在明显差异,‘绿翡翠’的香气组成成分有43种,相对含量为97.13%,而‘台北小姐’有74种,相对含量为73.76%。两种大花蕙兰含有极少相同的化合物成分,相同成分4-甲基苯酚均为2个品种香气组分中含量最高的化合物,它与丙基环丙烷的总相对含量为53.97%,构成‘绿翡翠’的主要香气成分;与2-乙基丁醛和正己烷等23种化合物的总相对含量为55.15%,共同构成‘台北小姐’的主要香气成分。     

矿质元素及pH值与栀子中栀子苷含量的相关性

为了探讨栀子苷含量与土壤及药材中的矿质元素的相关关系,用主成分分析方法对8个不同产地的栀子土壤中13种矿质元素及pH与药材中12种矿质元素进行了多因素分析.结果表明:Fe和Ni、Fe和Al、Mn和Co之间呈极显著正相关.影响栀子苷含量的Mg和pH贡献率分别为49.614%和20.826%,两者对栀子苷的变异贡献率最大.同时进行了栀子苷含量的变化与主成分的多元相关分析,证实了矿质元素与中药功效之间存在相关性.     

大花萱草新品种''''奶油卷''''的组织培养和生产应用

1植物名称大花萱草新品种'奶油卷'(Hemerocallis middendorfii Trautv.et Mey.cv.Bettywods)。2材料类别花托、花茎和花瓣3培养条件愈伤组织、     

大花白猪对高温适应性的研究

试验观测4,5月龄大花白公、母猪在每天控温38～40.5℃连续5h 共21天的行为、生理指标、血液生化指标和生长发育的变化,以同龄长白公、母猪为对照.高温期大花白猪停止走动,四肢伸展侧卧,呼吸频率增加,次数比长白猪相对减少9.5～220.9次/min,差异显著(P<0.05),肛温38.9～39.4℃未见上升,母猪仍有发情征候,公猪爬跨动作.对精饲料食欲正常,饮水量增加,皮温随气温变化,生长发育减慢.长白猪亦有类似表现和增加“打泥”行为.高温期大花白猪的血液生理、生化指标均在正常值范围内变动,淋巴细胞占58～85%,比正常值高.其呼吸频率在试验结束后1周内就能恢复到与预试期气温相同时的水平.