瞬时感受器电位M2通道抗原位点的兔单抗特异性检测

目的：筛选特异性较高的抗体以推动对瞬时感受器电位M2（TRPM2）通道结构和功能的研究。方法：以野生型昆明种小鼠大脑皮层、人胚肾293细胞、未诱导的TRPM2细胞及四环素诱导的TRPM2细胞为标本,采用免疫印迹和免疫荧光方法,以被检测抗体为一抗,荧光分子结合的抗体为二抗,根据170kD（TRPM2通道蛋白分子量）位置上是否有特异性条带,检测兔单抗的特异性。结果：抗体98927对鼠源TRPM2通道有特异性,抗体40622,抗体98721,抗体98921对人源TRPM2通道有特异性,另外抗体98721对鼠源TRPM2通道的突变型有特异性。结论：作为分子探针,抗体98927、40622、98721、98921可用于TRPM2通道结构和功能研究。     

兔眼越桔花粉的超微结构和营养成分与其育性关系研究

运用透射电镜观察5个兔眼越桔品种的花粉结构并分别测定分析了花粉的营养成分,以探讨兔眼越桔花粉育性与其超微花粉结构和营养成分的关系.结果表明,兔眼越桔花粉结构中,内膜系统清晰可见,发育程度因品种而异.开花前的花粉细胞核仁较大,蛋白质合成旺盛.对花粉超微结构与营养成分间关系的比较分析表明:花粉细胞的全糖和脯氨酸含量与花粉发芽率呈正相关,兔眼越桔花粉壁的厚度、花粉细胞的蛋白质含量与花粉的萌发率无相关性,而内质网发育程度与蛋白质含量呈正相关趋势.推测兔眼越桔花粉细胞的全糖和脯氨酸含量对兔眼越桔花粉的发育及其育性具有密切的关系.     

犀角地黄汤化裁方治疗五步蛇毒致血分证兔模型的实验研究

目的 观察犀角地黄汤化裁方对五步蛇毒致血分证兔模型的疗效.方法 新西兰兔24只,随机分为4组,除生理组注射生理盐水外,均以五步蛇毒造模.血清组:从耳沿静脉注射抗五步蛇毒血清;中药血清组:从耳沿静脉注射抗五步蛇毒血清,以犀角地黄汤化裁方灌胃;生理组、病理组:以等量生理盐水灌胃.24 h后测定其PLT、TT、PT、APTT、FIG、3P试验,并进行比较.结果 病理组、血清组、中药血清组与生理组对比均有显著性差异(P<0.01);血清组、中药血清组与病理组比较有显著性差异(P<0.01);中药血清组与血清组比较亦有显著性差异(P<0.05).3P试验:病理组为阳性,其余各组均为阴性.结论 犀角地黄汤化裁方配合抗五步蛇毒血清能抑制五步蛇毒引起的TT、PT、APTT的延长和PLT、FIB的减少,对蛇伤引起的凝血障碍有防治作用.     

微生态制剂对肝内胆汁淤积性肝损伤兔模型胆汁和血清TNF—α、IL—6的影响

目的：通过研究异硫氰酸萘酯(ANIT))所致的急性肝内胆汁淤积性肝损伤兔模型血清和胆汁中了TNF-α、IL-6的代谢变化,来进一步探讨微生态制剂-乐托尔对该模型的作用机制。方法：按200mg/kg一次性灌服ANIT来诱发新生白兔急性肝内胆汁淤积性肝损伤病变,分别检测中毒后24、48h及用乐托尔散剂治疗后血清和胆汁中总胆红素(TB)、丙氨酸转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子-a(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的值。结果：在乐托尔组中发现,灌服ANIT 48h后血清和胆汁中的TNF-α,IL-6,ALT,TB值均较中毒48h组明显降低（P值均小于0.05);各组胆汁中TNF-α,IL-6的浓度均明显高于血清中浓度,结论：微生态制剂能够改善肝功能,增加胆汁的排泄量,使炎性细胞因子的产生量显著减少。     

Adipophilin在动脉粥样硬化病变和脂质负荷细胞中的作用研究(英)

Adipophilin是细胞内脂质聚集和与脂质聚集有关疾病的标志物,巨噬细胞源性泡沫细胞的形成是动脉粥样硬化性疾病发生的重要环节.为了探讨adipophilin在动脉粥样硬化性疾病的作用,通过高胆固醇饲料喂养新西兰白兔12周,复制动脉粥样硬化疾病模型,同时测定血脂的变化和动脉壁胆固醇,使用HE染色、苏丹Ⅳ染色观察动脉粥样硬化病变的形成,使用免疫组织化学的方法观察动脉粥样硬化病变处和动物肝脏中adipophilin的表达.结果发现,高胆固醇饲料喂养组血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和动脉壁胆固醇明显增高,动脉粥样硬化病变面积增加到(40.06±7.29)%,动脉粥样硬化病变处adipophilin表达呈阳性;而adipophilin在肝脏中的表达无论是高胆固醇饲料喂养组或对照组均为阴性.使用80 mg/L OxLDL与小鼠腹膜巨噬细胞共孵育,复制脂质负荷细胞,然后把构建的1 mmol/L adipophilin反义寡核苷酸与该细胞共孵育.结果发现,使用油红O染色观察的细胞内脂滴明显减少,生化测定细胞内胆固醇酯显著降低,与对照组相比,差别有显著性.说明adipophilin与动脉粥样硬化病变有密切的关系,控制adipophilin的表达能够减少巨噬细胞细胞内胆固醇酯的聚集.     

兔出血症病毒NJ85株衣壳蛋白变异性分析及立体结构预测

用分子克隆技术从兔出血症病毒(RHDV)中国早期流行株NJ85中成功克隆出vp60基因,序列分析表明基因长度为1740nt,编码579aa.利用GenBank数据库,NJ85与WX84、TP二个RHDV中国毒株vp60基因DNA序列的同源性分别为92.7%和97.2%,氨基酸序列的同源性分别为96.1%和98.6%,与其他国家16个毒株的vp60基因DNA序列的同源性在83.7%～97.0%之间,氨基酸序列的同源性在90.5%～99.0%之间,具有高度的同源性. 进一步分析vp60基因的六个分区,A、B、D、F四个区变异率较低,C、E二个区变异率较高.在遗传进化上,历年来的RHDV毒株在氨基酸水平上分析可分为三个支谱系,在核苷酸水平上趋向四个支谱系,谱系没有呈现地域或时间特征.三个中国毒株分布在二个不同的支谱系中.与RHDV同为兔病毒属的欧洲野兔综合征病毒(EBHSV)组成了另一个谱系.运用生物信息学方法分析了NJ85 VP60蛋白的分子量、等电点、疏水性和二级结构,根据同源模型预测分析了三级结构.NJ85 VP60的二级结构以β片层为主,三级结构稳定.病毒衣壳表面有32个杯状凹陷, 由90个二聚体组成,二聚体由VP60单体以A/B5和C/C2两种方式构成,单体在二聚体中的构象有A、B、C三种形式.单体含有S、P两个结构域,两者通过柔性绞链连接,P结构域由VP60的C端部分形成,P分为P1和P2二个亚结构域,P2位于病毒衣壳表面,含有病毒株特异性抗原表位和红细胞结合位点.     

柯氏鼠兔的食性分析

柯氏鼠兔(Ochotona koslowi)是兔形目(Lagomorpha)鼠兔属中最古老的遗留种,也是稀有的濒危物种,自1894年命名以来,国内外对该物种的生存现状、生物学特征知之甚少.2007年10~11月,在藏北地区捕获到13只柯氏鼠兔,通过显微组织分析法对其胃及结肠内容物和收集的60份粪样进行了食性分析.结果表明,柯氏鼠兔胃、结肠内容物和粪便中镜检到可识别植物碎片属6科15种,其中豆科植物碎片占可识别植物碎片的39.44%,藜科植物碎片占36.00%,莎草科植物碎片占16.42%,禾本科、十字花科和菊科植物碎片分别占3.75%、2.67%和1.25%.食性分析表明,柯氏鼠兔偏爱豆科植物.     

四川藏鼠兔头骨形态的种群分化

种群分化是物种形成过程中具有决定意义的一步,是研究微进化过程的核心内容.为探讨地理隔离对小型兽类种群分化的影响,本文系统比较了四川西部3个隔离藏鼠兔Ochotona thibetana种群在头骨形态上的异同.结果表明在所测量的19个头骨形态指标中,岷山与邛崃山、邛崃山与凉山、岷山与凉山的藏鼠兔种群已分别在9、14及4个头骨变量上存在明显差异,颧宽、眶间宽、鼻骨长等变量是导致该3个山系藏鼠兔种群头骨形态发生分化的主要变量.由于藏鼠兔在各山系内部属一较为常见的物种,分析认为其头骨形态的种群分化可能与隔离状态下局部环境差异导致的选择压力不同有关.本研究揭示了在进行藏鼠兔等小型兽类种及种下阶元划分时,除数理统计手段引入的必要外,尚应充分考虑不同地理区域种群可能已产生的局部分化.     

WHBE兔血液蛋白的特性

目的比较大耳白黑眼兔（WHBE兔）与日本大耳白兔（JW兔）和新西澜兔（NZW兔）血液蛋白的多态性,从分子水平了解WHBE兔特殊性状的遗传背景。方法采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对WHBE兔、JW兔和NZW兔血液中的前白蛋白（Pr）,后白蛋白（Po）,前转铁蛋白1（Prt1）,前转铁蛋白2（Prt2）,转铁蛋白1（Tf1）,转铁蛋白2（Tf2）,后转铁蛋白（Ptf）,慢α球蛋白（Sag）、血红蛋白（Hbα、Hbβ）和白蛋白（Alb）共11个蛋白位点进行检测。结果Pr、Ptf、Hbα、Hbβ、Alb、Po、Sag和Prt2在所有实验兔个体中的表型一致,而Tf1、Tf2和Prt1的表型在各实验兔品系间存在显著差异。在Tf1位点,NZW兔以BC表型为主,无AA型;JW兔只有AA型,而WHBE兔以AB型为主。在Tf2位点,NZW兔有AA型,而JW兔和WHBE兔无AA型。在Prt1位点,NZW兔无AB、BB和BC表型而有AC表型。NZW兔蛋白位点的平均杂合度大于JW兔和WHBE兔。JW兔与WHBE兔的遗传距离最近。结论Tf1、Tf2和Prt1可作为区分NZW兔、JW兔和WHBE兔的特征标记,并且与WHBE兔特殊性状形成有关。JW兔与WHBE兔的亲缘关系最近。     

脾虚证IBS模型WHBE兔血浆环核苷酸水平的变化

目的观察脾虚型肠易激综合征（IBS）模型WHBE兔环核苷酸水平的变化。方法取WHBE兔和日本大耳白兔各18只,分别随机分成两组,即正常对照组6只,模型对照组12只,采用湿热应激加灌服番泻叶煎剂的方法造成脾虚证肠易激综合征（tBs）免模型,其中模型对照组造模后处理6只,剩余兔自然恢复10d,观察实验兔的血浆环核苷酸水平的变化。结果与正常对照组比较,WHBE兔模型对照组血浆cAMP和cGMP水平均显著升高（P〈0．05,P〈0．01）,且自然恢复10d后血浆cAMP和cGMP水平仍高于正常对照组（P〈O．05,P〈O．01）;日本大耳白兔模型对照组造模后及自然恢复10d后血浆cAMP和cGMP水平略有所升高,但差异均不显著（P〉O．05）;且模型对照组和自然恢复组cAMP／cGMP比值均略低于正常对照组,但差异不显著（P〉O．05）。结论本实验脾虚证IBS模型兔的血浆环核苷酸水平随阴阳盛衰而变化,具有双重特点：既有阴虚特点,又有阳虚特点,且WHBE兔更适合于脾虚证IBS模型研究理想的实验动物。