血根碱通过NF-κB信号通路调控牙周膜干细胞成骨分化

摘要 目的：探究血根碱（SAN）对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）处理的人牙周膜干细胞（hPDLSCs）成骨分化的影响及机制。方法：将hPDLSCs分为6组：Control组、TNF-α组、0.1SAN组、1SAN组、10SAN组和100SAN组,所有hPDLSCs均用成骨诱导培养液培养。除Control组外,其他组细胞培养液中均添加10 ng/mL的TNF-α。0.1SAN组、1SAN组、10SAN组和100SAN组细胞培养液中分别添加0、0.1、1、10和100 μmol/L的血根碱。各组hPDLSCs均在37℃、5% CO₂条件下培养21 d。通过可见光比色法检测碱性磷酸酶（ALP）活性。通过茜素红染色观察钙化结节形成,并统计OD_{562 nm} （代表钙化结节形成量）。通过qRT-PCR检测Runt相关转录因子2（RUNX2）、骨钙素（OCN）、osterix（OSX）、牙骨质附着蛋白（CAP）、Smad4转录水平。通过Western blot检测核因子-κB（NF-κB）p65磷酸化水平。结果：与Control组比较,TNF-α组细胞的相对ALP活性降低和钙化结节形成量以及RUNX2、OCN、OSX、CAP和Smad4的mRNA相对表达量降低（P<0.05）,p-NF-κB p65/NF-κB p65升高（P<0.05）。与TNF-α组比较,1SAN组、10SAN组和100SAN组的相对ALP活性和钙化结节形成量以及RUNX2、OCN、OSX、CAP和Smad4的mRNA相对表达量升高（P<0.05）,p-NF-κB p65/NF-κB p65降低（P<0.05）。结论：血根碱可促进TNF-α处理的hPDLSCs的成骨分化,其机制可能与抑制NF-κB的激活有关,血根碱可能是促进炎性微环境中hPDLSCs成骨分化的候选药物。     

血清Irisin、SOST、H2S与膝骨关节炎合并骨质疏松症患者骨密度、骨代谢标志物的相关性及其预测价值

摘要 目的：探讨血清鸢尾素（Irisin）、骨硬化蛋白（SOST）、硫化氢（H₂S）与膝骨关节炎（KOA）合并骨质疏松症（OP）患者骨密度、骨代谢标志物的相关性,分析Irisin、SOST、H₂S预测KOA合并OP的价值。方法：选取2020年4月至2023年4月我院收治的179例KOA患者,根据是否合并OP将其分为OP组（68例）和非OP组（111例）。检测血清Irisin、SOST、H₂S和骨代谢标志物骨钙素（OC）、骨碱性磷酸酶（BALP）、Ⅰ型原胶原N-端前肽（PINP）、抗酒石酸酸性磷酸酶异体（TRACP5b）水平,股骨颈、腰椎L1～4骨密度。Pearson分析血清Irisin、SOST、H₂S与股骨颈、腰椎L1～4骨密度和血清骨代谢标志物的相关性,受试者工作特征（ROC）曲线分析血清Irisin、SOST、H₂S对KOA合并OP的预测价值。结果：OP组血清Irisin、H₂S、OC、BALP、PINP水平,股骨颈、腰椎L1～4骨密度低于非OP组（P＜0.05）,TRACP、SOST水平高于非OP组（P＜0.05）。OP组血清Irisin、H₂S水平与股骨颈、腰椎L1～4骨密度,血清OC、BALP、PINP水平呈正相关（P＜0.05）,与血清TRACP水平呈负相关（P＜0.05）;SOST水平与股骨颈、腰椎L1～4骨密度,血清OC、BALP、PINP水平呈负相关（P＜0.05）,与血清TRACP水平呈正相关（P＜0.05）。Irisin、SOST、H₂S预测KOA合并OP的曲线下面积为0.784、0.773、0.755,联合预测KOA合并OP的曲线下面积为0.908,高于单独预测。结论：KOA合并OP患者血清Irisin、H₂S水平降低、SOST水平增高,低水平Irisin、H₂S和高水平SOST与骨密度降低、骨代谢异常有关,可用于预测KOA合并OP患者骨代谢异常状态和骨质流失风险。     

miR-455-5p靶向SOCS3抑制RSV感染致气道上皮炎症反应的机制研究

摘要 目的：揭示miR-455-5p对呼吸道合胞病毒（RSV）感染致气道上皮细胞炎症反应的作用机制。方法：qRT-PCR检测30例健康体检儿童（健康组）、RSV感染轻症组（n=41）和重症组（n=31）患儿血清miR-455-5p水平。将16HBE细胞分为Control组、NC-agomir组、miR-455-5p-agomir组、NC-antagomir组、miR-455-5p-antagomir组。使用Lipofectamine 3000转染16HBE细胞后培养48 h后,分为Blank组、NC组（转染了NC-agomir的细胞）、RSV+NC-agomir组、RSV+miR-455-5p-agomir组,用RSV病毒液感染RSV+NC-agomir组和RSV+miR-455-5p-agomir组16HBE细胞,Blank组和NC组16HBE细胞正常培养。用CCK-8法和EdU法检测细胞增殖、TUNEL法检测细胞凋亡、ELISA法检测上清液中TNF-α、IL-6、IL-8水平,qRT-PCR检测miR-455-5p和SOCS3的mRNA水平,Western blot检测SOCS3、IFN-α、STAT1、STAT2、p-STAT1和p-STAT2的蛋白水平。结果：与健康组相比,轻症组和重症组患儿的血清miR-455-5p水平降低（P<0.05）。与轻症组相比,重症组的血清miR-455-5p水平降低（P<0.05）。与Control组和NC-agomir组相比,miR-455-5p-agomir组16HBE细胞的miR-455-5p水平、相对细胞活力和EdU阳性率升高（P<0.05）,TUNEL阳性率降低（P<0.05）,上清液中的TNF-α、IL-6和IL-8水平降低（P<0.05）,SOCS3 mRNA和蛋白水平降低（P<0.05）,IFN-α蛋白、STAT1和STAT2磷酸化水平升高（P<0.05）。与Control组和NC-antagomir组相比,miR-455-5p-antagomir组16HBE细胞的miR-455-5p水平、相对细胞活力和EdU阳性率降低（P<0.05）,TUNEL阳性率升高（P<0.05）,上清液中的TNF-α、IL-6和IL-8水平升高（P<0.05）,SOCS3 mRNA和蛋白水平升高（P<0.05）,IFN-α蛋白、STAT1和STAT2磷酸化水平降低（P<0.05）。与Blank组和NC组相比,RSV+NC-agomir组16HBE细胞的miR-455-5p水平、相对细胞活力和EdU阳性率降低（P<0.05）,TUNEL阳性率升高（P<0.05）,上清液中的TNF-α、IL-6和IL-8水平升高（P<0.05）,SOCS3 mRNA和蛋白水平升高（P<0.05）,IFN-α蛋白、STAT1和STAT2磷酸化水平降低（P<0.05）。与RSV+NC-agomir组相比,RSV+miR-455-5p-agomir组的miR-455-5p水平、相对细胞活力和EdU阳性率升高（P<0.05）,TUNEL阳性率降低（P<0.05）,上清液中的TNF-α、IL-6和IL-8水平降低（P<0.05）,SOCS3 mRNA和蛋白水平降低（P<0.05）,IFN-α蛋白、STAT1和STAT2磷酸化水平升高（P<0.05）。结论：miR-455-5p在RSV感染患儿血清中下调,上调miR-455-5p通过抑制SOCS3的转录和表达从而激活RSV感染的16HBE细胞中IFN-α介导的抗病毒反应。     

甲状腺乳头状癌组织YAP、SATB1、ROR2与临床病理特征和复发的关系研究

摘要 目的：探讨甲状腺乳头状癌组织Yes相关蛋白（YAP）、核基质结合区结合蛋白1（SATB1）、受体酪氨酸激酶样孤儿素受体2（ROR2）与临床病理特征和复发的关系。方法：选择2019年6月至2021年6月广东省中医院收治的198例行手术治疗的甲状腺乳头状癌患者,取手术切除的癌组织和癌旁组织,免疫组化法检测YAP、SATB1、ROR2蛋白表达情况。术后随访2年,统计复发情况,根据复发情况将患者分为复发组和未复发组。比较甲状腺乳头状癌患者不同临床病理特征之间YAP、SATB1、ROR2蛋白表达差异,多因素Cox回归分析影响甲状腺乳头状癌术后复发的因素。结果：癌组织中YAP、SATB1、ROR2阳性表达率高于癌旁组织（P＜0.05）。低度分化、TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移患者癌组织中YAP、SATB1、ROR2阳性表达率高于中高度分化、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移患者（P＜0.05）。198例患者随访2年失访1例,复发21例,复发率为10.66%。复发组癌组织中YAP、SATB1、ROR2阳性表达率高于未复发组癌组织（P＜0.05）。多因素Cox回归分析显示低分化、TNM分期Ⅲ期、未淋巴结清扫、YAP阳性表达、SATB1阳性表达、ROR2阳性表达比是甲状腺乳头状癌术后复发的危险因素（P＜0.05）。结论：甲状腺乳头状癌组织中YAP、SATB1、ROR2阳性表达率显著增高,YAP、SATB1、ROR2阳性表达与低分化、淋巴结转移、晚TNM分期以及术后复发有关。     

瑞芬太尼靶控输注对宫颈癌根治术患者麻醉苏醒质量、应激反应及Th1/Th2免疫平衡的影响

摘要 目的：观察瑞芬太尼靶控输注对宫颈癌根治术患者麻醉苏醒质量、应激反应及辅助T细胞（Th）1/Th2免疫平衡的影响。方法：按照随机数字表法将2023年1月到2023年6月期间我院接受的120例宫颈癌根治术患者分为舒芬太尼组（n=60,舒芬太尼麻醉）和瑞芬太尼组（n=60,瑞芬太尼麻醉）。对比两组的麻醉苏醒质量、应激反应指标[皮质醇（Cor）、去甲肾上腺素（NE）、血管紧张素1（Ang-1）、血管紧张素2（Ang-2）]、Th1/Th2免疫平衡指标[包括Th1、Th2及调节性T细胞（Treg）、Th1/Th2比值],术后记录不良反应发生情况。结果：与舒芬太尼组相比,瑞芬太尼组的应激呼吸恢复时间、睁眼时间、拔管时间更短（P<0.05）。术后1 d,两组Cor、NE、Ang-1、Ang-2升高,但瑞芬太尼组低于舒芬太尼组（P<0.05）。术后1 d,两组Th1、Treg、Th1/Th2升高,但瑞芬太尼组低于舒芬太尼组;Th2下降,但瑞芬太尼组高于舒芬太尼组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比未见差异（P>0.05）。结论：瑞芬太尼靶控输注用于宫颈癌根治术患者,可改善麻醉苏醒质量,减轻应激反应,调节Th1/Th2免疫平衡,且不增加不良反应的发生率,效果较好。     

去泛素化酶USP29调控CBX6蛋白质稳定性

多梳家族(polycomb group,PcG)是一类控制细胞命运和胚胎发育的转录抑制因子,主要以转录抑制复合物(polycomb repressive complex,PRC)的形式发挥功能.染色体盒蛋白质同源物6(chromobox protein homolog 6,CBX6)是PRC1的核心蛋白质亚基之一,在基...     

羰基化蛋白质组学研究规律运动调控大鼠脑纹状体细胞凋亡的作用与适应性机制

为研究探讨规律运动对老年大鼠纹状体蛋白质氧化应激与细胞凋亡的影响,通过差异羰基化蛋白质组学特征分析,筛选靶标蛋白质并阐明其作用机制.将24只健康雄性23月龄老年大鼠随机分为静息组(Con-SED)和规律运动组(Aero-EXE).采用运动强度相当于最大摄氧量(VO2max)60％～65％逐渐递增到70％ ～75％的10...     

右美托咪定上调HIF-1α抑制NLRP3炎性体的激活减轻糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤

摘要 目的：探讨右美托咪定（DEX）对糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及可能分子机制。方法：将60只8周龄的SPF级C57BL小鼠高脂喂养6周,第7周通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ）45 mg/kg/天,1次/天,连续5天,建立2型糖尿病模型,建模后采用随机数字表法分为假手术组（sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）抑制剂2ME2组（2ME2组）、DEX组、DEX+2ME2组（DM组）,每组12只。假手术组仅切开皮肤后缝合,其余四组开胸结扎冠状动脉左前降支,缺血60 min后松开结扎线结,再灌注120 min建立缺血再灌注损伤模型。于再灌注120 min时抽取小鼠腹主动脉血,ELISA检测血清肌钙蛋白I（cTnI）、白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度,随后处死小鼠,分离左心室,HE染色观察心肌组织形态结构,Western blot检测HIF-1α、nod样受体蛋白3（NLRP3）的表达量,再灌注24 h时超声心动图评估心功能。结果：与sham组相比,I/R组、2ME2组、DEX组、DM组cTnI、IL-1β,TNF-α浓度明显升高,心肌组织结构紊乱,心肌纤维断裂增加,心肌细胞明显肿胀,炎性细胞浸润增加,心肌组织NLRP3表达量显著增加,每搏量（SV）、射血分数（EF）%、短轴缩短率（FS）%明显下降（P＜0.05）;与I/R组相比,DEX组、DM组HIF-1α表达量明显增加,NLRP3表达明显降低,cTnI、IL-1β,TNF-α浓度明显下降,心肌组织结构明显改善,炎性细胞浸润明显减少,SV,EF、FS明显升高（P＜0.05）;与DEX组相比,DM组HIF-1α表达量明显降低,NLRP3表达量明显增加,cTnI、IL-1β、TNF-α浓度明显增加,心肌组织结构紊乱,心肌纤维断裂增加,心肌细胞明显肿胀,炎性细胞浸润增加,SV,EF、FS明显降低（P＜0.05）。结论：DEX可能通过上调心肌组织HIF-1α的表达,抑制NLRP3炎性体的激活,减轻心脏炎症反应,改善糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤。     

茵陈五苓散联合利拉鲁肽对肥胖型2型糖尿病患者糖脂代谢、胰岛素敏感性和氧化应激的影响

摘要 目的：探讨茵陈五苓散联合利拉鲁肽对肥胖型2型糖尿病（T2DM）患者糖脂代谢、胰岛素敏感性和氧化应激的影响。方法：选取2021年12月~2022年12月期间广州中医药大学附属佛山中医院收治的160例痰湿内蕴型肥胖T2DM患者。根据随机数字表法将患者分为对照组（利拉鲁肽治疗,80例）和研究组（茵陈五苓散联合利拉鲁肽治疗,80例）。对比两组疗效、糖脂代谢指标、肥胖相关指标、胰岛素敏感性、氧化应激和不良反应发生情况。结果：与对照组相比,研究组的临床总有效率更高（P<0.05）。研究组治疗后体质量指数（BMI）、空腹血糖（FBG）、腰臀比（WHR）、餐后2 h血糖（2hPG）、丙二醛（MDA）、糖化血红蛋白（HbAlc）、稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、总胆固醇（TC）、黄嘌呤氧化酶（XO）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）较对照组低（P<0.05）。治疗后研究组稳态模型胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、超氧化物歧化酶（SOD）高于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比未见差异（P>0.05）。结论：茵陈五苓散联合利拉鲁肽治疗肥胖型T2DM患者疗效确切,可调节糖脂代谢水平,降低胰岛素敏感性,减轻氧化应激,且具有一定安全性,值得临床借鉴应用。     

胃饥饿素对哮喘大鼠气道组织损伤、血清Th1/Th2细胞因子以及TLR4/NF-κB信号通路的影响

摘要 目的：探讨胃饥饿素介导Toll样受体4（TLR4）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路对哮喘模型大鼠的气道组织损伤和血清Th1/Th2细胞因子的影响机制。方法：选择健康Wistar雄性大鼠平均7周龄（体重平均220 g）共40只,随机分为4组,每组10只,分别为对照组、模型组、胃饥饿素低浓度组（1 μmol/L）和高浓度组（5 μmol/L）。除了对照组,其他三组复制急性哮喘模型,胃饥饿素低浓度组和高浓度组腹腔注射10 mL/kg胃饥饿素,对照组和模型组注射等量生理盐水。造模结束24 h 后评估各组大鼠的哮喘症状评分,检测血清中性粒细胞与淋巴细胞百分比,计算中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）,ELISA法检测血清IgE、Th1型细胞因子IFN-γ和Th2 型细胞因子 IL-4,计算IFN-γ/IL-4,HE染色肺组织计算气道壁厚度和气管平滑肌厚度,评估气道损伤程度,Western blot法检测肺组织TLR4和NF-κB p65蛋白相对表达量。结果：与对照组相比,模型组大鼠哮喘症状评分、淋巴细胞百分比、IgE、IL-4、气道壁厚度和气管平滑肌厚度、TLR4和NF-κB p65蛋白相对表达量均显著增加,而NLR、IFN-γ和IFN-γ/IL-4显著降低（P＜0.05）。与模型组相比,胃饥饿素低浓度组和高浓度组大鼠哮喘症状评分、淋巴细胞百分比、IgE、IL-4、气道壁厚度和气管平滑肌厚度、TLR4和NF-κB p65蛋白相对表达量明显降低,而NLR、IFN-γ和IFN-γ/IL-4明显升高（P＜0.05）。与低浓度组相比,高浓度组上述指标也存在显著差异（P＜0.05）。结论：胃饥饿素可能通过抑制TLR4/ NF-κB信号通路活性,进而改善哮喘症状,降低炎症反应,调节Th1/Th2平衡,减轻气道组织损伤,且表现出一定的浓度依赖性。胃饥饿素有望成为临床干预哮喘的新途径。