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为了寻找毕赤酵母表达虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ(HWTX-Ⅰ)时产生不均一性表达产物的原因,应用阳离子交换层析、反相HPLC、Tricine SDS-PAGE电泳、质谱等技术,对基因工程菌Pichia pastorisGS115/HWTX-Ⅰ表达的不均一产物进行了分离、纯化和鉴定,并对不均一产物的N端和C端进行测序,结果表明表达产物的不均一性主要体现在重组HWTX-Ⅰ的N端信号肽加工的不完全以及C末端的内部降解。生物学活性分析表明该不均一产物的活性仅为天然HWTX-Ⅰ活性的30%。同时,对如何避免不均一性表达产物的产生提出了相应的对策。 相似文献
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通过现代生物科技专题及相关高考试题的介绍与分析,以开拓学生视野,增强科技意识,激发学生探索生命奥妙和热爱生物科学的情感,为进一步学习现代生物学奠定基础.同时,借助现代生物科技专题作试题背景,具有能力的开放性和情境的新颖性,也有利于考查和培养学生独立获取新知识、收集和处理信息的能力.所选试题涉及现代生物科技前沿的领域有:基因工程、细胞工程、蛋白质工程、癌症和克隆技术等,均体现出对现代生物技术发展的关注. 相似文献
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费氏中华根瘤菌腺嘌呤缺陷突变株的构建与筛选 总被引:6,自引:0,他引:6
构建出费氏中华根瘤菌嘌呤合成酶基因purL的基因置换载体pHN701,purL内部NotⅠXhoⅠ片段被luxAB基因取代,造成正常基因的破坏。用该载体对野生型费氏中华根瘤菌HH103进行purL的基因置换,筛选到腺嘌呤缺陷型突变株P825。波动实验和连续转接试验结果表明该突变菌株表型十分稳定。purL表达载体pBBRPG在P825中可恢复其在基本培养基上的生长情况,证明突变株确实为purL单基因破坏。盆栽结瘤实验结果表明,该突变株只能侵染大豆根系形成不固氮的根瘤。 相似文献
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