野生坚龙胆及其组培苗中龙胆苦苷的含量分析

利用含有α-萘乙酸(NAA)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)和激动素(KT)等激素的MS固体培养基,对野生坚龙胆进行组培苗诱导培养。同时,应用高效液相色谱技术对野生坚龙胆和其组培苗的根、茎和叶中的龙胆苦苷进行含量分析和比较研究。结果发现,野生坚龙胆中的龙胆苦苷主要储存于根部,而组培坚龙胆中龙胆苦苷在根中的含量甚微,主要集中在茎、叶部位,且在出根初期组培坚龙胆叶中的龙胆苦苷含量近似于或略大于野生坚龙胆根中的含量。研究结果提示,坚龙胆中的绿色组织是龙胆苦苷合成的部位,这些部位同时具有龙胆苦苷的储藏功能。     

滇龙胆GrSLS1基因的克隆与原核表达

以滇龙胆转录组为基础,采用RT-PCR技术克隆了滇龙胆幼叶裂环番木鳖苷合酶基因,命名为GrSLS1(GenBank登录号KF941191)。序列分析结果显示,GrSLS1基因开放阅读框长1 560bp,编码519个氨基酸;GrSLS1蛋白相对分子量为59.33kD,pI为8.96。生物信息学分析结果表明,GrSLS1蛋白属于SLS家族成员,其N端含有一跨膜螺旋区域(10~32);二级结构分析结果表明,GrSLS1蛋白主要由α-螺旋和无规则卷曲组成;系统发育分析表明,GrSLS1与帽柱木MsSLS2蛋白亲缘关系最近。构建原核表达载体pGEX-4T-GrSLS1,对GrSLS1基因进行原核表达,SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。该研究为进一步研究GrSLS1基因功能及通过在龙胆中过表达该基因提高龙胆苦苷含量奠定基础。     

HPLC法同时测定藏药岷县龙胆中4种有效成分的含量

采用高效液相色谱法同时测定藏药岷县龙胆中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷和异荭草苷含量。结果测定岷县龙胆中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷和异荭草苷的含量分别为0.108%、1.46%、2.21%、1.61%。色谱条件为:色谱柱:XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温:25℃;流速:1.0 mL/min;流动相:甲醇/0.01%乙酸水溶液梯度洗脱;检测波长260 nm。本方法快速、准确、重复性好,适用于岷县龙胆中4种有效成分的含量测定,可为藏药岷县龙胆药材的质量控制提供依据。     

农林复合系统滇龙胆茎叶化学计量特征研究

以农林复合系统种植的滇龙胆(Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl.)为材料,采用高效液相色谱法建立不同栽培系统滇龙胆茎、叶的色谱指纹图谱,并测定其主要活性成分马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和当药苷含量,研究不同栽培系统滇龙胆茎、叶化学计量特征。采用相关性分析、指纹图谱相似度分析、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)、变量投影重要性准则(VIP)等方法进行化学数据分析。结果显示,滇龙胆主要活性成分马钱苷酸含量为(1.85±0.92)mg/g~(7.43±7.64)mg/g,獐牙菜苦苷含量为(1.03±0.17)mg/g~(1.58±0.50)mg/g,龙胆苦苷含量为(15.28±11.34)mg/g~(24.59±7.84)mg/g,当药苷含量为(4.10±1.64)mg/g~(31.67±22.70)mg/g,且叶片中4种活性成分的总含量高于茎;不同栽培系统中,与尼泊尔桤木间作的滇龙胆茎、叶活性成分总含量最高,而与核桃间作的滇龙胆茎、叶活性成分总含量最低。相关性分析显示,植株相同部位和不同部位间的环烯醚萜和裂环烯醚萜含量呈显著(P0.05)或极显著(P0.01)正相关。指纹图谱相似度分析表明,不同栽培系统滇龙胆茎指纹图谱相似度介于0.989~0.992之间、叶指纹图谱相似度为0.988~0.996,相同部位样品化学成分种类相似。PLS-DA分析结果表明,茎和叶片整体化学计量特征具有明显差异;单作及林药间作的样品被区分为不同类群,不同间作模式下滇龙胆茎、叶化学成分具显著差异,叶片高效液相色谱指纹图谱可用于区分不同栽培系统滇龙胆样品。本研究结果可为农林复合系统滇龙胆有效成分含量研究及滇龙胆资源的合理开发利用提供科学依据。     

华丽龙胆GsF3′5′H和GsFNS基因的克隆及表达分析

该研究以华丽龙胆(Gentiana sino ornata)5个不同开放阶段(H₁~H₅)的蓝色花冠为试材,利用RT PCR技术克隆GsF3′5′H和GsFNS全长序列,并进行生物信息学分析,比较GsF3′5′H和GsFNS在不同组织和不同开放阶段的基因表达模式。结果显示：(1)所克隆的GsF3′5′H和GsFNS基因分别包含1 560 bp和1 590 bp开放阅读框(OFR),并分别编码520和529个氨基酸。(2)结构分析显示,GsF3′5′H和GsFNS均具有典型的F3′5′H和FNSⅡ蛋白保守结构域。(3)系统进化树分析表明,GsF3′5′H和GsFNS亲缘关系最近的物种是三花龙胆(Gentiana triflora)。(4)qRT PCR结果显示,GsF3′5′H和GsFNS基因在根、茎、叶和花冠中均表达,其中GsF3′5′H基因在花冠H₃阶段表达量最高。GsFNS在根中表达量最高,其次在花冠H₄阶段两基因的表达均较高。研究推测,GsF3′5′H基因表达产生的飞燕草素苷和GsFNS表达产生的黄酮共着色作用可能使华丽龙胆的花冠呈更稳定艳丽的蓝色,为蓝色花分子育种提供重要的基因资源。     

藏药提宗龙胆花的化学成分研究

从传统藏药提宗龙胆(Gentiana tizuensisFranch.)花的乙醇提取物中分离得到3个化合物,利用波谱方法鉴定为熊果酸(ursolic acid,1)、异荭草苷(isooreintin,2)、日本獐牙菜素(swertiajaponin,3).其中,化合物2为首次从该植物中发现,化合物3为龙胆属植物中首次发现.     

花绒坚甲的生物学和生态学特性研究初报

花绒坚甲是松褐天牛的重要天敌.本文报道了广东地区寄生在松褐天牛上的花绒坚甲的形态特征、生物学和生态学特性,并提出了关于保护利用的一些看法.     

龙胆种子萌发与水溶性内源抑制物质

龙胆种子中含有一定活性的内源抑制物质,其对白菜幼根生长的抑制活性高于对白菜种子萌发的抑制活性,对龙胆种子自身萌发也有明显抑制作用;室温浸种可部分去除龙胆种子内源抑制物质;以150 μg·mL-1赤霉素变温浸种处理种子,可提高种子发芽率.据此建立了龙胆种子催芽技术和羧甲基纤维素悬浮液播种技术.     

湖北龙胆和铺地龙胆的分类学处理

通过查阅文献、标本鉴定、野外调查和栽培实验,将湖北龙胆（Gentiana hupehensis Q.H.Liu）和铺地龙胆（Gentiana wanyuensis T.N.Ho）分别作为深红龙胆（Gentiana rubicunda Franchet）和大颈龙胆（Gentiana macrauchena C.Marquand）的异名处理。探讨了深红龙胆和大颈龙胆的分布及分类历史。     

西藏蔓龙胆属(龙胆科)二新种

１林芝蔓龙胆新种图１：１～４ＣｒａｗｆｕｒｄｉａｎｙｉｎｇｃｈｉｅｎｓｉｓＫ．ＹａｏｅｔＷ．Ｌ．Ｃｈｅｎｇ,ｓｐ．ｎｏｖ．ＴＹＰＥ：Ｘｉｚａｎｇ（Ｔｉｂｅｔ西藏）,Ｎｙｉｎｇｃｈｉ（林芝）,ｉｎｃｏｎｉｆｅｒｏｕｓｆｏｒｅｓｔ,ａｌｔ．２８７０ｍ,１...