利用抑制性差减杂交技术筛选草原龙胆花器官发育特性基因

目的:探讨草原龙胆花发育的分子机制,为进一步阐述花器官同源异型、属于MADS-box基因家族的一系列基因在调节开花植物花瓣和雄蕊的发育中的作用奠定基础。方法:以草原龙胆不同发育时期的花器官(萼片、花瓣、雄蕊、雌蕊)原基的cDNA作为试验方(tester),以茎叶组织的cDNA作为驱动方(driver),利用抑制性消减杂交技术构建了一个富集花器官发育特性基因的抑制性差减cDNA文库。对抑制性差减cDNA文库进行筛选、测序及Blast同源性比较。结果:获得了与花器官发育相关的特异性基因。结论:构建了抑制性差减cDNA文库,为克隆草原龙胆花器官发育特异性基因全长序列奠定了基础。     

滇龙胆GrHMA基因的克隆和原核表达

HMA蛋白(heavy metal transporting ATPase)是一种在植物中广泛存在的多功能蛋白。根据滇龙胆转录组GrHMA基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR扩增GrHMA基因序列,并进行TA克隆、测序及序列分析;构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrHMA,转入E.coli Rosetta(DE3)中,并在37℃、1.0 mmol/L IPTG下成功诱导表达。序列分析表明,GrHMA基因是HMA超家族的成员;GrHMA氨基酸序列系统发育分析表明,GrHMA与TcHMA处于同一进化枝。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。这些结果为GrHMA蛋白的进一步纯化及结构和功能的研究奠定基础。     

用nrDNA ITS序列探讨狭蕊龙胆属及其近缘属 (龙胆科)的系统发育

运用核糖体DNA内转录间隔区ITS序列对狭蕊龙胆属Metagentiana10种及其近缘属22种植物进行了系统发育分析。ITS分析结果表明狭蕊龙胆属是一个多系群:在系统发育树上,双蝴蝶属Tripterospermum和蔓龙胆属Crawfurdia的种类位于狭蕊龙胆属各分支中,而且双蝴蝶属和蔓龙胆属的种类也相互交叉;这一结果不支持将3个属各自独立为属。但是,在所有分析中,3个属共同形成一单系分支,是龙胆属Gentiana的姊妹群;这一结果与形态学、花部解剖学、细胞学、孢粉学和胚胎学等证据基本一致,狭蕊龙胆属应该从龙胆属中分离出来,它与双蝴蝶属和蔓龙胆属有更为密切的亲缘关系。根据分支图,在狭蕊龙胆属、双蝴蝶属和蔓龙胆属组成的复合群中,现已知的染色体基数x＝17、21和23可能存在网状和平行进化。     

多年生龙胆属植物个体大小与花期资源分配研究

于各物种花中前期对青藏高原东部高寒草甸6种多年生龙胆属植物花期的繁殖分配和性分配进行分析,结果表明:(1)多年生龙胆属植物的植株个体越大,繁殖投入越高,繁殖分配越低;(2)随着植物个体的增大,对雌性、雄性和吸引结构的投入都在增加,这可保证资源的充分利用,不会因为单一部分的增加而造成资源的浪费;(3)6种龙胆属植物中,有4种其性分配结果与性别分配(SDS)的理论预测一致,即大个体更偏向雌性器官的资源投入,但麻花艽(Gentiana atraminea)和达乌里秦艽(Gentiana dahurica)的性分配与个体大小则没有表现出负相关,可能与其本身具有的雌雄异熟———雄性先熟特点有关;(4)资源在雌雄功能间的分配没有表现出权衡关系,可能是由于植物必须在许多不同生活史性状之间进行资源分配,而不是两两之间非此即彼.     

龙胆露地育苗技术要点

本文阐述了龙胆野生资源的现状及驯化栽培的重要性;并提供了一整套龙胆露地育苗技术.     

双蝴蝶属和蔓龙胆属（龙胆科）种子表面特征的研究

在扫描电镜下观察了龙胆科双蝴蝶属8个种和蔓龙胆属6个种的种子表面纹饰,观察结果表明,2属的种子表面特征均为网状纹饰类型。其中Tripterospermun cordatum,T.volubile,T.chinense,T.discoideum,T.japonicum,T.filicaule,Crawfurdia delavayi和C.pri-cei的种子表面为细网状;T.hirticalyx,T.pingbianense,C.puberula,C.tibetica,C.campanu-lacea和C.crawfordioides的种子表面为粗网状,在龙胆属Gentiana的不同组中均存在网状纹饰,因此,从种子表面特征可看出,龙胆属,双蝴蝶属和蔓龙胆属3属间具较近的亲缘关系。同时,在双蝴蝶属中,种之间在种子表面特征上有分化。在表面纹饰的具体特征上存在较大差别,而在蔓龙胆属中种间差别很小,仅在一些种子表面有无附属物上存在差异。     

朝鲜球坚蚧及黑缘红瓢虫空间格局的地统计学研究

利用地统计学方法研究了不同时期朝鲜球坚蚧(Didesmococcus Koreanus Borchs)若虫及黑缘红瓢虫（Chilocorus rulidus Hope）幼虫种群的空间分布格局和空间相关性。结果表明,不同时期朝鲜球坚蚧若虫种九和黑缘红瓢虫幼虫种群的半变异函数均可拟合为球型,其空间格局为聚集型,在小尺度上,空间变异主要是由其空间自相关引起的,且不同时期格局变化不明显,变程分别为9.56-15.70m和18.83-19.74m之间。黑缘红瓢虫种群与朝鲜球坚蚧种群之间具有很强的追随关系,说明黑缘红瓢虫种群是朝鲜球坚蚧种群的优势天敌。     

中国植物区系新记录种

报道了采自新疆地区的百花丹科、龙胆科、紫草科的４ 个中国新记录种———塔尔巴哈台彩花（ Ａｃａｎｔｈｏｌｉｍｏｎｔａｒｂａｇａｔａｉｃｕｍ Ｇａｍａｊｕｎ） 、西亚龙胆（ Ｇｅｎｔｉａｎａ ｓｅｐｔｅｍｆｉｄａ Ｐａｌｌａｓ） 、早春龙胆（ Ｇ．ｖｅｒｎａ Ｌ．ｓｕｂｓｐ． ｐｏｎｔｉｃａ Ｍ． Ｓｏｌｔｏｋｏｖｉｃ） Ｈａｙｅｋ 、塔城滨紫草（ Ｍｅｒｔｅｎｓｉａ ｔａｒｂａｇａｔａｉｃａ Ｂ．Ｆｅｄｔｓｃｈ ．） 。     

黑缘红瓢虫对6种杀虫剂的敏感性测定

用点滴法在室内初步测定3黑缘红瓢虫Chilocorus rubidusHope幼虫对敌敌畏、氰戊菊酯、氟氯氰菊酯、硫丹、氧化乐果、灭多威等6种果园常用杀虫剂的敏威性。结果表明:黑缘红瓢虫幼虫对6种杀虫剂的敏感性依次为:氰戊菊酯、氟氯氰菊酯、硫丹、氧化乐果、敌敌畏、灭多威。LD50按以下次序增大:灭多威,氟氯氰菊酯,氧化乐果,氰戊菊酯,敌敌畏,硫丹。可见,硫丹对黑缘红瓢虫毒力最小,是最安全。敌敌畏等有机磷杀虫剂对它的毒力也较低,而拟除虫菊酯类药剂对黑缘红瓢虫的毒力则很高。同种药剂对不同用药水平地区的黑缘红瓢虫成虫的毒力差异显著,黑缘红瓢虫对氟氯氰菊酯和氰戊菊酯分别产生了5.4和7.6倍的抗药性,是羧酸酯酶活性提高所致。不同种类杀虫剂对黑缘红瓢虫和朝鲜球坚蚧Didesmococcus koreanusBorchs的选择指数差异极为显著,依次为硫丹、灭多威、敌敌畏、氰戊菊酯、氧化乐果、氟氯氰菊酯,如硫丹为2.6,而氟氯氰菊酯仅为0.04。硫丹是防治抗性朝鲜球坚蚧比较理想的一种杀虫剂。     

杏树吐伦球坚蚧空间分布型及抽样技术研究

应用聚集度指标和回归分析,对杏园吐伦球坚蚧Rhodococcus turanicus Arch.空间分布型进行研究,结果表明:在中度受害杏园,吐伦球坚蚧越冬若虫和初孵若虫呈聚集分布,聚集度随虫口密度增大而减小;聚集原因与吐伦球坚蚧本身的生活习性有关;确定了不同种群密度下、不同允许误差下的最适抽样数.通过对不同方位虫口密度进行数据分析,结果表明,吐伦球坚蚧若虫在杏树各方位的聚集是随机的,各方位对整体抽样均无代表性.