香港坚木中的达玛烷型三萜

从楝科植物香港坚木的树吉中分得了４个新的达玛烷型三萜,基于详细的光谱分析及与同类化合物的光谱数据比较鉴定了其结构,分别命名为：２０Ｒ,２４Ｒ－表－２５－达玛烷烯－３－酮,１６β－羟基达玛烷－２０,２５－二烯－３－酮,２６－羟基达玛烷－２０,２４－二烯－３－酮和３β－乙酰基－７α,２１Ｓ,２５－三羟基－２１Ｓ,２３Ｒ－表－１（１１）－达玛烷烯。     

条叶龙胆根培养物中龙胆苦苷的产生和含量

条对龙胆愈伤组织中龙胆苦苷含量较低,根的分化可以提高龙胆苦苷的含量。培养的离休根中龙胆苦苷的含量则更高。随着继代次数的增加,愈伤组织中龙胆苦苷含量下降快,而分化根的愈伤组织和离体培养根中龙胆苦苷含量下降较慢。在愈伤组织的液体培养中,1/2MS培养基附加低浓度的植物激素,龙胆苦苷含量有所提高。植物激素配比促进愈伤组织中分化根的形成,也促进龙胆苦苷的产生;但促进愈伤组织的生长时,不利于龙胆苦苷产生。在离体根培养中,添加 1mg/L的金雀花碱,促进龙胆苦苷的产生,含量可达1.48％,明显高于愈伤组织(0.52％)和分化根的愈伤组织(0.65％),也高于试管苗根的龙胆苦苷含量(1.01％)。     

发根农杆菌转化龙胆再生植株的研究

本文利用具Ri质粒的发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)通过叶盘法对药用植物龙胆(Gentiana manshurica Kitagawa)进行了转化实验,发根农杆菌15834感染龙胆,诱发产生毛状根,并得到再生的龙胆植株,冠瘿碱检测实验表明,再生植株显示甘露碱带(mannopine),说明发根农杆菌Ri质粒的T-DNA部分已转移到龙胆植物细胞中。再生的龙胆丛生苗可以在不含激素的简化培养基上快速无限繁殖,转化的龙胆植株明显具有发达的根系,且根部龙胆苦甙含量比对照高,从而为东北龙胆栽培事业的发展以及龙胆有效成份的工业化生产提供了新的途径。     

条叶龙胆离体根培养条件的初步研究

本试验对条叶龙胆(Gentiana manshurica)离体根生长的培养基种类、光、通气进行了试验,并在此基础上用正交试验法对影响离体根生长的7个主要成分进行了试验。找出了适合条叶龙胆离体根生长和鲜重增加的培养基是white+CH 50 mg/l,IBA 0.1 mg/l,基本培养中相应的VB_1改为0.5 mg/l,蔗糖30 g/l,pH4。     

坚体螨属在我国首次发现：（蜱螨亚纲：犹伊螨科）

坚体螨属Iphidosoma Berlese 于1892年根据I. fimetarium (Muller, 1859)的后若虫而建立,属中仅1种发现雌螨,其余均只找到后若虫。其主要特征是:躯体骨化强;胸板宽大,具清晰网纹;螯钳定趾具透明膜状突起,其顶端尖;有些种类在颚基、足基节上,有时在胸板上具棘状刚毛,此种刚毛的末端圆钝或尖突。     

藏药黑边假龙胆的化学研究

龙胆科植物黑边假龙胆（Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａａｚｕｒｅａ（Ｂｕｎｇｅ）Ｈｏｌｕｂ）是治疗肝胆湿热的１种藏药,从西藏日喀则产的全草中分离得到９个化合物,其中１个Ｃ一甙黄酮,异荭草素（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）;１个山酮甙,獐牙菜酚甙（ｓｗｅｒｔｉａｎｏｌｉｎ）;１个木质体甙,橄榄脂素４一Ｏ一β－Ｄ－葡萄糖甙（ｏｌｉｖｉｌ４一Ｏ一β一ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）;３个环烯醚萜甙,龙胆苦甙（ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ）,獐牙菜甙（ｓｗｅｒｔｉａｍａｒｉｎ）和马钱子酸（ｌｏｇａｎｉｃａｃｉｄ）;１个三萜,齐敦果酸（ｌｏｅａｎｏｌｉｃａｃｉｄ）１个甾醇,β谷甾醇葡萄糖甙（ｄａｕｃｏｓｔｅｒｏｌ）以及１个长链脂肪醇,三十烷醇（ｎ一１一ｔｒｉａｃｏｎｔａｎｏｌ）。它们的结构通过光谱和化学的方法得到了鉴定。上述结果,从次生代谢产物的角度为假龙胆属在系统分类上与龙胆属和獐牙菜属有着密切的联系提供了旁证。     

关龙胆地上部分的保肝作用

选用D-半乳糖胺、硫代乙酰胺、四氯化碳三个肝损伤毒物构建肝损伤模型,研究了关龙胆地上部分对于不同机制引起的肝损伤的保肝作用。实验结果表明关龙胆地上部分有保肝作用,可降低各种肝损伤模型的ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)、AKP(碱性磷酸酶)等,从而证明了关龙胆地上部分有一定药用价值,用全草取代地下部分入药有一定的可行性。     

滇龙胆GrWRKY5基因的克隆和植物表达载体构建

WRKY蛋白是目前被广泛研究的一类DNA特异结合转录因子,在植物次生代谢物生物合成、植物生长和发育及衰老等生理过程以及生物、非生物防御反应中起重要的调控作用。该研究从滇龙胆幼叶中克隆萜类合成的关键转录因子基因Gr WRKY5,并利用生物信息学方法对基因功能进行预测,构建植物过表达载体。结果表明:根据三年生滇龙胆转录组Gr WRKY5基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR扩增Gr WRKY5 ORF序列,并进行TA克隆、测序和序列分析;构建入门载体p ENTRTM2B-Gr WRKY5,经LR反应后构建植物过表达载体。Gr WRKY5 ORF全长591 bp,编码196个氨基酸,Gen Bank登录号为KF922375,其中第167与170之间的色氨酸(W)、精氨酸(R)、赖氨酸(K)、酪氨酸(Y)组成WRKY蛋白所特有的"WRKY"结构。序列分析表明Gr WRKY5是WRKY超家族的成员。经生物信息学在线软件分析发现,Gr WRKY5的等电点为6.29,脂肪族指数为61.37,不稳定指数为57.80。总平均疏水性为-0.708,为亲水蛋白;含有20种氨基酸,其中天冬氨酸(Asp)和脯氨酸(Pro)含量最高,为8.1%;半胱氨酸(Cys)含量最低,仅为1.0%。氨基酸序列系统发育分析表明,Gr WRKY5与拟南芥中WRKY家族中遗传距离最接近的是WRKY27,属于Ⅱe类成员;与Cr WRKY22和Vv WRKY22蛋白的亲缘关系较近;与Jc WRKY47和Tc WRKY27亲缘关系较远;BLASTp结果显示,Gr WRKY5与欧洲油菜Bn WRKY27-1的同源性最高(为69%);与拟南芥Aa WRKY22的一致性最低(仅为31%)。以Gateway入门载体p ENTR2B和目的载体p K2GW7为基础,成功构建了植物过表达载体p K2-35S-Gr WRKY5,该载体的成功构建为该基因在拟南芥、滇龙胆等植物中的遗传转化奠定了基础,同时为WRKY基因功能的深入研究提供依据。     

坚龙胆环烯醚萜甙的HPLC分析

应用HPLC分析方法,建立了坚龙胆中5个主要环烯醚萜甙的含量测定方法。在ZORBAXSB—C18色谱柱,乙腈-0．2％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1．0mL/min,柱温为40℃,检测波长254nm的色谱条件下,化合物得到良好的分离,并具线性相关。本方法操作简便,重现性好,灵敏度高。对不同产地的样品进行比较分析的结果表明,产地对坚龙胆中环烯醚萜甙的组成和含量有显著的影响。     

中国植物区新记录种

报道了采自新疆地区的花丹科、一科、紫草科的４个中国新记录种－－塔尔巴哈台彩花９Ａｃａｎｔｈｏｌｉｍｏｎ ｔａｒｂａｇａｔａｉｃｕｍ Ｇａｍａｊｕｎ０、ｓｇｈｇｇｏ ｄｘ ｅｊｇ（Ｇｅｎｔｉａｎａ ｓｅｐｆｅｍｆｉｄａ Ｐａｌｌａｓ）、早春龙胆（Ｇ．ｖｅｒｎａ Ｌ．ｓｕｂｓｐ．ｐｏｎｔｉｃａ Ｍ． Ｓｏｌｔｏｋｏｖｉｃ）Ｈａｙｅｋ、塔城演紫草（Ｍｅｒｔｅｎｓｉａ ｔａｒｂａｇａｔａｉｃａ Ｂ．Ｆｅｄ