岩藻寡糖的制备及其抗氧化与益生活性

岩藻多糖是大型褐藻门植物中的一种天然杂多糖,为进一步开发其生物活性,笔者以其为原料,采用酶法降解的方式制备了不同聚合度的岩藻寡糖(FOS)混合物,并采用电喷雾质谱(ESI-MS)对降解得到的寡糖产物进行结构表征,采用ABTS法、DPPH法及羟基自由基清除法对寡糖混合物的抗氧化活性进行了评价,以植物乳杆菌(Lactoba...     

URA3基因影响青蒿酸酿酒酵母工程菌中试发酵产量

CRISPR/Cas9基因编辑技术已经被广泛应用于工程酿酒酵母的基因插入、基因替换和基因敲除,通过使用选择标记进行基因编辑具有简单高效的特点。前期利用CRISPR/Cas9系统敲除青蒿酸生产菌株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) 1211半乳糖代谢负调控基因GAL80,获得菌株S. cerevisiae 1211-2,在不添加半乳糖诱导的情况下,青蒿酸摇瓶发酵产量达到了740 mg/L。但在50 L中试发酵实验中,S. cerevisiae 1211-2很难利用对青蒿酸积累起到决定性作用的碳源-乙醇,青蒿酸的产量仅为亲本菌株S.cerevisiae 1211的20%–25%。我们推测因遗传操作所需的筛选标记URA3突变,影响了其生长及青蒿酸产量。随后我们使用重组质粒pML104-KanMx4-u连同90 bp供体DNA成功恢复了URA3基因,获得了工程菌株S. cerevisiae 1211-3。S. cerevisiae 1211-3能够在葡萄糖和乙醇分批补料的发酵罐中正常生长,其青蒿酸产量超过20g/L,与亲本菌株产量相当。研究不但获得了不加半乳糖诱导的青...     

超嗜热古菌Thermococcus eurythermalis A501编码B家族DNA聚合酶的生化特性及PCR应用

DNA聚合酶广泛应用于PCR技术,在生命科学研究及相关领域发挥重要作用。但目前商业化DNA聚合酶仍不能完全满足科研需要,有必要寻求高性能DNA聚合酶。文中克隆表达了超嗜热古菌（Thermococcus eurythermalis）A501来源的B家族DNA聚合酶基因（NCBI数据库基因登录号为TEU＿RS04875）、表征该重组蛋白的生化特性、评价了其PCR应用。将删除intein蛋白序列的DNA聚合酶（Teu-PolB）进行体外重组表达,经亲和层析和离子交换层析纯化获得Teu-PolB蛋白;利用5′端带荧光标记的寡核苷酸作为底物,用尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定Teu-PolB的生化特性;以噬菌体λDNA基因组为模板,探究Teu-PolB的PCR应用。结果显示,Teu-PolB具有DNA聚合酶活性和3′→5′核酸外切酶活性,该酶在98℃下的半衰期约为2 h,热稳定性高。使用Teu-PolB进行PCR扩增,最适PCR缓冲液为50 mmol/L Tris-HCl pH 8.0,2.5 mmol/L MgCl₂,60 mmol/L KCl,10 mmol/L （NH<...     

解纤维素热酸菌来源的耐热磷酸酶的酶学性质与应用

卤代酸脱卤酶(HAD)超家族的磷酸酶,其底物谱广泛,催化功能多样,因此鉴别和表征耐热的磷酸酶对于其在生物制品生产中的应用具有重要意义.对解纤维素热酸菌(Acidothermus cellulolyticus)来源的磷酸酶(AcPase)进行研究,将其基因经密码子偏好性优化后,在E.coliRosetta(DE3)中进行...     

植物抗逆性与光呼吸作用之间的关系

用Na2SO3溶液浸泡,可以影响菠菜叶片中超氧物歧化酶的活性。较低浓度(0.1、1、10ppm)的该溶液使酶活性增加,而100ppm的该溶液则降低此酶的活性。同时发现叶片中光呼吸关键酶,即乙醇酸氧化酶活性也随着发生正相关的变化。讨论植物受SO32-胁迫后,乙醇酸氧化酶的活性变化与植物抗逆性的产生可能存在密切的关系。     

遗传工程在食品和发酵工业中的应用

80年代中期,遗传工程在食品和发酵工业中的研究和应用越来越广泛。利用遗传工程技术克隆编码酶的基因,经基因扩增可以提高酶的产量,或发酵产物的产量。这是酶工业发展     

维生素A酸诱导小鼠胚胎性癌细胞分化过程中核仁形成区的变化

采用一步银染技术,发现维生素酸诱导小鼠F₉, F_9-1 胚胎性癌细胞分化过程中,核仁形成区的数目有变化。F、细胞Ag-NORs数目的增多发生在72-96小时;而细胞则发生在96小时。设计的撤药试验结果证明,分裂中期银染NOR的变化,反映的是前一个间期NOR的活性。     

叶潜蛾科在华南二新种

1980年以前我国记录的叶潜蛾科仅有两种,即桔叶潜蛾Phyllocnistis citrella Stainton及杨银叶潜娥P.saligna Zeller.作者于1983年描述了黄皮叶潜蛾P.wampilla Liu & Zeng新种,它是柑桔叶潜蛾的近缘种。作者最近在广州又发现该科的两个新种,寄主植物是属大戟科Euphorbiaceae及紫金牛科Myrainaceae。     

适用于细菌与植物互作研究的gusA启动子探针载体pHN112的构建

启动子探针载体是分离和比较启动子效率的合适工具,一般通过报告基因的表达来反映启动子存在的强弱。分离鉴定细菌侵染宿主植物的相关基因的启动子,有助于阐明菌植互作的分子机理。用于互作研究的启动子探针载体至少应具备以下基本条件：一是报告基因的表达不受细菌和宿...     

在欧洲会议上宣布了酶方面的新发展

<正> 1984年5月10日和11日在丹麦的巴斯韦尔召开了Novo生物技术讨论会,同年由Online Conference组织召开了“欧洲生物技术会议”,1984年5月15—17日在伦敦也召开了有关生物技术的会议,这些会议都反映了当前酶生产和应用方而的最新进展和趋势。下面是这些会议论文的要点。根据威斯康辛大学的Thomas Brock发言,分离嗜热微生物和所包含的热稳定性酶的关键,是探索接近于目标酶理想作用温度的环境。在丹麦会议的发言中,Brock指出:从生长