Affinity chromatography—dependent selection （ACDS） of genomic DNA fragments bound specifically to bacterial synthesized Myc／Myn proteins

This paper describes an approach to seek for mouse c-Myc/Myn proteins-bound specific sequences among genomic DNA.cDNA fragment of myn gene was obtained through RT-PCR technique from RNA of NIH3T3 cells.DNA fragments encoding BR/HLH/LZ structure of Myc and Myn proteins were cloned in frame into pGEX-2T vector respectively.Fusion GST-Myc and GST-Myn synthesized in E.coli hosts showed affinity to CACGTG E-box DNA and subsequently interacted with genomic fragments prepared through whole-genome-PCR.A PCR-assisted procedure which combines protein-DNA interaction and affinity chromatography was designed to enrich Myc/Myn bound DNA.At least two genomic DNA fragments obtained exhibit specifical binding capacity to Myc/Myn complex but not to GST alone.Significance of the work and of the technique itself as well asidentification of the DNAs are discussed.     

非洲紫罗兰叶片脱分化过程中核酸蛋白质和滨粉含量动态的研究

本文测定了非洲紫罗兰（Ｓａｉｎｔｐａｕｌｔａｉｏｎａｎｔｈａ）叶片脱分化过程中核酸、蛋白质和波粉的含量。结果表明：发生脱分化的叶片中的蛋白质和淀粉含量均低于对照,而ＲＮＡ含量则高于对照,ＤＮＡ含量无明显差异。叶片培养的第一天内,发生脱分化的叶片中的蛋白质含量明显下降,对照中的蛋白质含量上升。脱分化过程中,淀粉含量有一个上升、下降、再上升的变化过程,对照中淀粉含量一直上升。     

酪氨酸羟化酶基因载体－pCMVTH 质粒的构建及在大鼠骨骼肌内的表达

为用转基因方法治疗巴金森氏病大鼠模型,本研究采用分子克隆技术,将合成多巴胺的关键酶－酪氨酸羟化酶（ＴＨ）的基因,克隆进入以巨细胞病毒ＣＭＶ为启动子的载体质粒内,经限制性内切酶定位分析证实该重组的ＤＮＡ质粒的可靠性。携带ＴＨ基因的ＰＣＭＶＴＨ质粒以ＬＩＰＯ－ＦＥＣＴＩＮ介导,在培养的原代骨骼肌细胞中高效表达。本研究为进一步用转基因的细胞植入脑内以治疗巴金森氏病打下一定基础。     

PCR技术用于HBV DNA检测的研究进展

ＰＣＲ技术自八十年代在美国问世以来,已成功地用于多种病原体的检测,八十年代末在美国成功的利用此技术对ＨＢＶ　ＤＮＡ进行了检测,我国在九十年代初也世开始了这方面的工作,并取得了成功,本文综合介绍国内外这方面的工作,并对一些具体的ＰＣＲ方法进行了详细的介绍,并对利用ＰＣＲ技术检测ＨＢＶ　ＤＮＡ时因实验设计及操作误差造成的负面影响进行了讨论。     

PCR法快速检测临床标本中结核杆菌DNA

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）快速检测临床标本（脑脊液、胸水、腹水、血、痰液）中的结核杆菌ＤＮＡ,特异性扩增片段１２３ｂｐ,为结核杆菌的特异性重复序列ＩＳ６１１０部分基因。ＰＣＲ检测人型结核杆菌的敏感性达１０ｆｇＤＮＡ。临床标本的ＰＣＲ检测阳性率（２３．３％）明显高于抗酸染色涂片（２．９％）和细菌培养（５．７％）的阳性率（Ｐ〈０．０５）。通过设立对照系统及对扩增产物酶切分析,表明该法无假阴性结果（特异     

家鸡和原鸡的线粒体DNA多态性比较

本文运用１１种限制性内切酶分析了家鸡（茶花鸡、尼西鸡、大理漾濞黄鸡）和原鸡共１０只个体的线粒体ＤＮＡ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）,平均每个个检测到的片段为４０条左右。但仅发现３种变异的限制性片制性格局,即ＳｔｕＩ－Ｂ,Ｅｃａ－Ｉ－ｂ和ＲＩ－Ｂ．其中ＳｔｕＩ－Ｂ和ＳｃａＩ－Ｂ为首次报道,而且均为原鸡所物有,ＥｃｏＲＩ－Ｂ则为大理漾濞黄鸡所特有。茶花鸡和尼西鸡拥有完全相同的限制性格局。经过计算,原     

一种能表现水稻基因组DNA分化特征的重复DNA顺序

用ＤＮＡ 复性动力学方法克隆到一个水稻中度重复顺序。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交、限制性内切酶分析及序列分析资料表明,该重复顺序在水稻基因组中具有串联重复和散布状态两种存在方式。以该ＤＮＡ 片段作探针,用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交方法分析了多种野生稻种和栽培稻品种的基因组分化特征。某些限制性内切酶消化过的水稻ＤＮＡ,其图谱呈现出多达４０ 条以上的杂交带,包括强杂交带和弱杂交带两种类型。重复实验结果证明,强杂交带表现为ＢＢＣＣ染色体组型特异而弱带则在栽培稻各品种间显示出丰富的多态性,表明该重复顺序片段在水稻理论研究和育种实践中可能具有重要意义     

几种濒危植物及其近缘类群总DNA的提取与鉴定

用低ｐＨ 介质,高盐沉淀蛋白质方法成功地从银杉（Ｃａｔｈａｙａ ａｒｇｙｒｏｐｈｙｌｌａ Ｃｈｕｎ ｅｔＫｕａｎｇ）、矮牡丹（Ｐａｅｏｎｉａ ｓｕｆｆｒｕｔｉｃｏｓａ ｖａｒ． ｓｐｏｎｔａｎｅａ）、南川升麻（Ｃｉｍ ｉｃｉｆｕｇａ ｎａｎｃｈｕａｎｅｎｓｉｓＨｓｉａｏ）、裂叶沙参（Ａｄｅｎｏｐｈｏｒａ ｌｏｂｏｐｈｙｌｌａ）的同属种泡沙参（Ａ． ｐｏｔａｎｉｎｉｉ）等植物中提取和部分纯化了细胞总ＤＮＡ,并对其产率、质量和纯度作了鉴定。此方法的关键是用了一个低ｐＨ提取介质,它能有效防止组织破碎及沉淀大量材料时的电离化作用及酚化合物的进一步氧化。所得ＤＮＡ 不需经氯化铯梯度离心或柱层析,直接可用于限制性片断长度多态性（ＲＦＬＰ）及随机扩增的ＤＮＡ多态性（ＲＡＰＤ）等分子水平的遗传标记。为检测濒危植物的遗传多样性提供了一套迅速、简便和可靠的技术方案     

豌豆种子发育过程中DNA和RNA的变化

实验结果表明：豌豆种子发育过程中单粒鲜重、ＤＮＡ和ＲＮＡ含量都随开花后日数增加而增加。其中豌豆开花第２１天,ＲＮＡ含量达最高峰,拖尾现象消失而趋于单一带区,ＤＮＡ的迁移率也降到最低,从而确定出豌豆开花后第２１天是基因转录活动降低的转折点,为种子蛋白质基因工程研究提供参考。