凡纳滨对虾低温差异表达miRNA的分析鉴定及靶基因的验证

为了解析miRNA及靶基因在凡纳滨对虾低温适应过程中的分子调控机制, 研究开展了凡纳滨对虾常温(28℃)及低温锻炼(16℃, 6d)下肝胰腺小RNA文库的测序和分析。从常温对虾的小RNA文库测序获得18—32 nt的高质量序列10690259条, 鉴定出已知的成熟miRNAs 57条; 而从低温锻炼对虾的小RNA文库获得18—32 nt的高质量序列序列8587144条, 鉴定出已知的成熟miRNAs 48条。分析获得25个在低温锻炼下呈显著差异表达的miRNAs。运用qRT-PCR验证了3条低温下差异极显著的miRNAs的表达模式。结果显示, 3条miRNAs的表达模式与高通量测序结果基本一致。预测低温差异表达miRNAs的靶基因, 并与转录组分析获得的低温显著差异表达基因进行比对, 从二者重合的基因集中挑选出4个基因, 即nuclear export mediator factor Nemf-lik、synapse-associated protein、seleno proteins 以及DEAD-box RNA helicase Variant 1, 运用qRT-PCR验证其在不同条件低温锻炼凡纳滨对虾肝胰腺中的表达规律, 为解析miRNAs及其靶基因在对虾低温适应过程中的分子调控机制提供了基础数据。     

欧文氏弧菌毒力蛋白PirAB的原核表达与纯化

对虾肝胰腺坏死病的爆发造成了对虾养殖产业的严重亏损。从上海地区凡纳滨对虾中分离出1株欧文氏弧菌(Vibrio owensii SH-14),该菌株可导致凡纳滨对虾死亡,且死虾出现对虾肝胰腺坏死病的典型症状。经PCR扩增欧文氏弧菌毒力蛋白PirA与PirB对应基因序列,并将其连接到表达质粒pET-21b(pirA)和pGEX-4t-1(pirB)。通过优化诱导表达和亲和层析纯化条件,最终获得大量高纯度的目的蛋白。经冷冻干燥保存为后期抗体合成以及进一步毒力效应研究提供参考。     

亚胺培南-西司他丁联合去甲万古霉素治疗获得性下呼吸道感染的效果

目的:探讨亚胺培南与西司他丁联合去甲万古霉素对重症获得性下呼吸道感染患者治疗效果。方法:回顾性分析获得性下呼吸道感染患者70例临床资料,其中36例为观察组,采用亚胺培南与西司他丁联合去甲万古霉素治疗;其余34例为对照组,采用哌拉西林与他唑巴坦联合左氧氟沙星沙星治疗。比较两组患者治疗7天后的效果、症状缓解时间、治愈时间、住院花费及不良反应发生率。结果:观察组有效率高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组症状缓解时间及治愈时间较对照组短,但住院花费高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组不良反应发生率高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:亚胺培南与西司他丁联合去甲万古霉素对获得性下呼吸道感染患者治疗显著,但不良反应较多,需临床加以重视。     

乌司他丁对COPD合并呼吸衰竭患者血清COX-2，PGE2及PLA2 的影响

目的：探讨乌司他丁对慢性阻塞性肺疾病合并呼吸衰竭患者血清环氧化酶2（cyclooxygenase-2,COX-2）,前列腺素E2 （prostaglandin E2,PGE2）及磷脂酶A2（phospholipase A2,PLA2）浓度的影响。方法：选取2014 年1 月至2015 年1 月我院收治的 80 例慢性阻塞性肺疾病患者,按照单盲法均分为实验组和对照组。对照组给予慢性阻塞性肺疾病常规对症治疗;实验组在对照组 常规对症治疗的基础上,给予乌司他丁治疗。检测治疗前后患者COX-2、PGE2 及PLA2 血清浓度。结果：两组COX-2、PGE2 及 PLA2 血清浓度,实验组治疗后均显著低于治疗前（P<0.05）;对照组治疗后均低于本组治疗前,（P<0.05）。实验组治疗前与对照组 无显著差异（P>0.05）;治疗后,实验组COX-2、PGE2、PLA2 血清浓度显著低于对照组,治疗后实验组肺功能FEV1、FVC均显著优 于对照组（P<0.05）。结论：乌司他丁治疗慢性阻塞性肺疾病合并呼衰患者能够显著降低其COX-2、PGE2 及PLA2 血清浓度,有效 改善患者炎症反应、细胞损伤及临床症状,为临床积极治疗慢性阻塞性肺疾病提供新的思路。     

紫杉醇联合卡培他滨治疗Ⅳ期肺腺癌临床疗效及毒理研究

目的:探究紫杉醇联合卡培他滨方案治疗Ⅳ期肺腺癌的临床疗效及毒理研究。方法:选取我院肿瘤科收治的Ⅳ期肺腺癌患者62例,随机分为两组,其中对照组30例,给予卡培他滨口服常规治疗;实验组32例,在常规治疗的基础上加用紫杉醇治疗。对比两组有效率(RR)、疾病控制率(DCR)、中位进展时间(TTP)、中位生存期(MST)、血细胞分析情况、毒副作用发生率。结果:1实验组DCR高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);2实验组TTP、MST明显优于对照组,结果有统计学意义(P0.05);3两组患者血细胞各项指标无明显差异(P0.05);两组患者脱发、肝损害、恶心呕吐的发生率无明显差异(P0.05)。结论:紫杉醇联合卡培他滨方案可明显改善Ⅳ期肺腺癌患者的临床症状,延长患者的生存期,且毒副作用与单药治疗相比无差异,对临床具有指导意义,值得临床推广。     

放疗与吉西他滨治疗对肺癌A549细胞自噬相关基因Beclin1表达的影响

目的:探讨放疗与吉西他滨(Gemcitabine,GEM)治疗对人肺腺癌A549细胞中自噬相关基因Beclin1表达的影响。方法:使用60Coγ照射(6Gy)人肺腺癌A549细胞,细胞继续培养6、12和24h。使用人剂量吉西他滨处理人肺腺癌A549细胞,细胞继续培养24 h后,以未处理的A549细胞为对照,用RT-PCR和Western blotting法检测A549细胞中Beclin1 m RNA和蛋白的表达。结果:经过放射线照射后,三组A549细胞内Beclin1 m RNA和蛋白的表达量均增加,且在24小时末表达量达到最大。经过吉西他滨处理后,吉西他滨处理组A549细胞内Beclin1 m RNA和蛋白的表达量均增加。结论:放射治疗与吉西他滨治疗均可导致A549细胞内自噬相关基因Beclin1表达上调。     

曲美他嗪对慢性心力衰竭患者心功能的影响及MMP-9、TIMP-1的表达变化

目的:探讨曲美他嗪对慢性心力衰竭患者心功能及MMP-9、TIMP-1表达的影响。方法:选取2012年3月至2014年3月在我院接受治疗的慢性心力衰竭患者100例,随机分为观察组和对照组,每组50例。对照组给予常规药物治疗,研究组在对照组基础上加用曲美他嗪治疗。观察并比较两组患者心率(HR)、左心室射血分数(LVEF)及MMP-9、TIMP-1水平的变化情况。结果:与治疗前比较,两组患者治疗后心率降低,LVEF升高,差异具有统计学意义(P0.05);观察组患者LVEF高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);与治疗前比较,两组患者治疗后TIMP-1升高,MMP-9降低,差异具有统计学意义(P0.05);与对照组比较,观察组患者治疗后TIMP-1升高,MMP-9降低,差异具有统计学意义(P0.05)。观察组治疗总有效率显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:盐酸曲美他嗪用于治疗慢性心力衰竭具有良好的疗效,不仅可以调节血清MMP-9及TIMP-1水平,而且能够改善患者心功能。     

硝酸舍他康唑乳膏治疗婴幼儿念珠菌性皮炎的疗效观察

目的观察硝酸舍他康唑乳膏治疗婴幼儿念珠菌性皮炎的临床疗效和安全性。方法入选26例0~3岁念珠菌性皮炎的患儿,均经临床表现及真菌学检查确诊,外用硝酸舍他康唑乳膏2次/d,连续7~14 d,观察其临床疗效及治疗前后真菌学变化。结果 26例患儿治疗7 d临床评分均值由6分下降至1.35分,下降幅度超过75%。治疗7 d临床痊愈率为57.69%,有效率为92.3%,真菌学阴转率为88.46%;14 d临床痊愈率为92.3%,真菌学阴转率为92.3%。停药后第14天随访痊愈患儿91.67%未见复发。仅1例患儿出现不良反应。结论硝酸舍他康唑乳膏治疗婴幼儿皮肤念珠菌病安全、有效,不良反应少,值得临床推广。     

地氯雷他定联合地塞米松鼓室内注射对分泌性中耳炎患者咽鼓管功能的影响

目的:观察地氯雷他定联合地塞米松鼓室内注射治疗分泌性中耳炎的效果及对咽鼓管功能的影响。方法:选择我院2013年6月-2014年6月收治的分泌性中耳炎患者116例,随机分为两组,对照组采用地塞米松鼓室内注射治疗,观察组在此基础上加服地氯雷他定。观察并比较两组临床疗效及咽鼓管功能的恢复情况。结果:治疗后,两组咽鼓管功能不良率较治疗前明显降低(P0.05),观察组咽鼓管功能恢复率高于对照组,观察组治疗前后气骨导差差值明显大于对照组(P0.05),观察组在治疗后1周及1月的总有效率均高于对照组(P0.05)。结论:地氯雷他定联合地塞米松鼓室内注射可减少渗出和中耳积液潴留,有效改善分泌性中耳炎患者的咽鼓管功能,促进听力恢复。