维生素B12联合叶酸对冠心病患者同型半胱氨酸水平调控效果研究

目的：观察维生素B12联合叶酸对冠心病患者同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）水平的调控效果。方法：选取2018年8月-2019年12月来我院就诊的120例冠心病患者,按照随机数字表分为对照组和干预组,同期从本院随机选取60例健康体检者作为健康对照组。对照组给予常规药物治疗;干预组在常规药物治疗基础上增加维生素B12和叶酸联合干预4周;健康对照组不给予任何干预措施。采集所有研究对象在干预前和干预后晨起空腹静脉血测定血清Hcy水平以及干预组和对照组干预前后血清NO、ET-1、sICAM-1水平,观察3组间血清Hcy水平差异,各组干预前后血清Hcy水平差异,以及干预组和对照组经干预后血清NO、ET-1、sICAM-1水平的变化和两组间的差异。结果：维生素B12和叶酸联合干预前,对照组和干预组患者血清Hcy水平高于健康对照组,而对照组和干预组患者血清Hcy水平无差异。联合干预后,干预组患者血清Hcy水平明显降低［（15.105±2.998 vs 21.370±2.891）μmol/L］,且低于对照组［（15.105±2.998 vs 20.037±3.367）μmol/L］（P<0.05）;干预组和对照组患者血清NO水平均较干预前增高（P<0.05）,且干预组患者血清NO水平明显高于对照组［（69.555±5.277 vs 62.248±5.283）μmol/L］（ P<0.05）;两组患者血清ET-1［（59.680±6.109 vs 69.047±4.917）pg/mL］和sICAM-1［（202.375±5.951 vs 230.838±8.208）μg/L］水平均明显下降,且干预组下降更明显（P<0.05）。结论：冠心病患者血清Hcy水平高于正常对照者,而维生素B12和叶酸联合干预可明显降低冠心病患者血清Hcy水平,调整血管内皮因子水平。     

组蛋白去甲基化酶KDM5A调控H3K4me3参与神经管畸形发生的分子机制

神经管畸形(NTDs)的病因与防治是出生缺陷领域研究的重点,叶酸可以预防神经管畸形但其机制不明。本文借助低叶酸细胞模型和低叶酸NTDs小鼠模型通过染色质免疫共沉淀、Cut&Tag等技术,探讨了组蛋白去甲基化酶lysine demethylase 5A(KDM5A)及其调控的下游组蛋白H3K4me3修饰在叶酸缺乏导致的NTDs发生中的潜在分子机制。结果显示,低叶酸的细胞模型中,qRT-PCR、Western印迹结果显示,KDM5A分子表达明显下降(P<0.05)。作为组蛋白H3K4me3调控的上游关键酶,进一步通过染色质免疫共沉淀ChIP、ChIP-qPCR实验证实,叶酸缺乏下组蛋白H3K4me3在神经发育基因Axin2和Atoh1基因启动子区富集增加(P<0.05)。通过构建KDM5A基因敲除细胞模型,借助Cut&Tag试验证实,KDM5A基因敲除后H3K4me3主要富集在神经发育基因上。最后在低叶酸导致的NTDs小鼠模型的脑组织中,RT-qPCR、Western印迹以及ChIP-qPCR实验显示,E9.5 d的NTDs胎鼠脑组织中KDM5A表达下降(P&l...     

热激和光对阻止皱叶酸模种子二次休眠诱发的效应

40℃,1h的热激能完全阻止皱叶酸模种子在25℃暗吸胀过程中诱发的二次休眠。经热激处理的种子萌发率在97％以上,而对照种子的萌发率仅10％。热激的主要作用在于解除果壳对种子萌发的压制。3′-脱氧腺苷(3mmol/L)不影响热激的这种效果,但是蛋白质合成抑制剂——亚胺环己酮(1mmol/L)的存在完全压制了热激的效应,种子萌发率与对照的一样,仅10％。热激与光(红光)在阻止酸模种子二次休眠诱发上表现出添加效应。     

组合代谢调控提高大肠杆菌对氨基苯甲酸产量

对氨基苯甲酸是一种重要的有机合成中间体,广泛应用于医药、染料等行业。近年来对氨基苯甲酸作为一种潜在的高强度共聚物单体越来越受到重视。对氨基苯甲酸作为叶酸合成的前体之一,其合成在大肠杆菌体内由叶酸合成途径的pabA、pabB和pabC三个基因负责,催化分支酸合成对氨基苯甲酸。本研究以实验室构建的酪氨酸高产工程菌TYR002作为出发菌株,首先弱化双功能分支酸突变酶/预苯酸脱氢酶TyrA的表达,以减少酪氨酸积累,然后利用3种不同强度的组成型启动子分别调控pabA、pabB和pabC的表达。摇瓶发酵表明不同的组合调控模式下大肠杆菌发酵培养基中的对氨基苯甲酸积累量存在显著差异,最高可获得0.67 g/L的摇瓶发酵产量。进一步通过发酵条件优化和分批补料发酵,在5L发酵罐中获得了6.4g/L的对氨基苯甲酸产量。本研究为改善对氨基苯甲酸生物合成效率提供了重要理论参考。     

叶酸白蛋白靶向纳米粒的肿瘤细胞吸收及叶酸受体相关基因表达研究

实验选用叶酸受体表达阳性FR(+)卵巢癌细胞株SKOV3与表达阴性的FR(-)肺癌细胞株A549,通过肿瘤细胞对叶酸白蛋白靶向纳米粒的吸收及叶酸受体相关基因的表达,研究分析叶酸白蛋白靶向纳米粒叶酸受体吸收特征及叶酸受体胞吞途径的参与机制。结果表明:随着叶酸白蛋白靶向纳米粒给药时间的增加,SKOV3细胞FR1基因的表达显著增强,而A549细胞未见FR1基因表达。同时SKOV3细胞FR1基因的表达程度与细胞摄取叶酸白蛋白靶向纳米粒的量成正相关。叶酸代谢通路相关的基因(RFC、FPGS、GGH)表达,研究显示叶酸白蛋白靶向纳米粒能够启动细胞膜叶酸通道相关蛋白的表达。     

同型半胱氨酸对内皮细胞一氧化氮合酶系统的损伤机制及叶酸的拮抗效应

本实验探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)一氧化氮合酶(eNOS)的损伤机制及叶酸(FA)的拮抗效应。HUVEC原代培养,传至第3代后,将其与不同浓度Hcv(10μmol/L、30μmol/L、100μmol/L和300μmol/L)、FA(100μmol/L)或两者联合共同培养72h,用RT-PCR和免疫组织化学技术分别估测细胞eNOS mRNA水平及eNOS蛋白质量;高效液相色谱测定细胞内不对称二甲基精氨酸(ADMA)含量;并分别测定二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)、eNOS活性及一氧化氮(NO)含量。HUVEC与不同浓度Hcy培养72h后,eNOS mRNA和蛋白质表达皆受到抑制;eNOS活性降低;NO生成减少。同时,DDAH活性降低;细胞内ADMA含量呈剂量依赖性增加。加入FA后,eNOS蛋白质水平上调;eNOS活性增强;NO生成增多。同时,DDAH活性增强,ADMA蓄积减少;但eNOS mRNA表达没有改变。Hcy对内皮细胞eNOS的损伤机制涉及eNOS酶蛋白和eNOS的基因表达两个层面,其对eNOS酶蛋白的抑制机制可能通过DDAH-ADMA通路,FA可拮抗Hcy对eNOS酶蛋白的抑制作用,显示出对HHcy有一定的保护作用。但FA对HHcy所导致的eNOS基因表达的抑制无保护效应。     

妊娠中晚期孕妇膳食营养及体内叶酸、维生素D等水平与妊高症的关系

目的：了解孕妇在妊娠中晚期的膳食营养状况,分析叶酸、维生素D等水平与妊高症的关系。方法：选取山东大学齐鲁医院青岛市院区2017年8月-2019年8月收治的妊娠期高血压疾病（PIH,简称妊高症）患者106例作为观察组,根据妊高症分型分为三个亚组：妊娠期高血压组（38例）、轻度子痫前期（36例）、重度子痫前期（32例）,选取同期在我院住院的正常孕妇126例为对照组。采用24h回忆法统计孕妇膳食状况,观察和比较两组患者血清叶酸、同型半胱氨酸（Hcy）、维生素D、血清钙、体重指数（BMI）等指标,分析影响PIH的相关因素。结果：孕妇不同膳食结构中,谷类、乳类、蔬菜类、鱼虾类、水果类摄入量均不足,豆类和油脂类摄入量适宜,畜禽肉类和蛋类摄入过量;对照组患者血清中叶酸、维生素D以及血清钙水平明显高于观察组中各亚组患者,随着妊娠高血压程度的不断加重,观察组中各亚组血清中叶酸、维生素D以及血清钙水平呈明显降低趋势,各组间比较差异具有统计学意义（P<0.01）;重度子痫前期组患者血清Hcy水平最高,正常对照组血清Hcy水平最低,各组间比较具有明显差异（P<0.01）;对影响PIH的单因素分析中,两组患者在年龄、BMI、血清叶酸、维生素D、血清Hcy和血清钙水平等方面比较具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。Logistic回归分析显示,孕期BMI、血清Hcy为PIH的独立危险因素,叶酸、维生素D、血清钙为PIH的保护因素。结论：孕妇在妊娠中晚期的膳食营养结构不均衡,谷类、乳类、蔬菜类、鱼虾类、水果类摄入量均不足,畜禽肉类和蛋类摄入过量,营养结构有待改善。PIH的发生与维生素D、叶酸和血清钙水平密切相关,BMI、Hcy是影响PIH发生的独立危险因素,叶酸、维生素D和血清钙是PIH的保护因素。孕妇在妊娠期间补充叶酸、维生素D、血清钙和控制能量过度摄入,对预防和降低PIH的发生具有重要的临床意义。     

MTHFR基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗塞的关系

采用ＰＣＲ－ ＲＦＬＰ技术,检测了６２ 例动脉粥样硬化性脑梗塞患者和７９ 名对照者的Ｃ６７７Ｔ 突变的基因型。结果发现, ＭＴＨＦＲ基因Ｃ６７７Ｔ 突变型等位基因（Ｖ）频率在实验组和对照组中,有显著性差异（χ２＝ ４．４１,Ｐ＜ ０．０５）;三种基因型频率在两组人群中均无显著性差异。基因型频率的相对风险分析,ＡＶ基因型比ＡＡ 基因型患脑梗塞风险高１．７６ 倍;ＶＶ 基因型比ＡＡ 基因型患脑梗塞风险高３．２５ 倍。结果表明, ＭＴＨＦＲ 基因Ｃ６７７Ｔ 突变型等位基因与动脉粥样硬化性脑梗塞有一定的关联,突变基因型增加了动脉粥样硬化脑梗塞的发病风险。     

微生物分析法测定保健食品中叶酸

1942年,STOKSTAD首次成功地合成了叶酸,并阐明了叶酸的化学结构。半个世纪过去了,叶酸一直是学术界的研究热点。叶酸的化学名称为蝶酰谷氨酸,又叫维生素B11,通常意义上,叶酸指的是一组具有蝶酰谷氨的结构和相关生物活性的同效维生素,广泛存在于绿叶蔬菜中。其英文名称包括folic ac id,folate,folates,folac in,一般可以互用,近几十年来人们逐渐认识到它的重要性。由于叶酸参与体内高半胱氨酸的转化,因而其对防止血管硬化和阻塞有益;另外还发现叶酸可大量提供游离碳原子,是制造神经末梢和构成传递神经冲动的重要化学物质的原料。2000年F…