Validation and Application of Skeletochronology for Age Determination of the Ryukyu Ground Gecko,Goniurosaurus kuroiwae （Squamata： Eublepharidae）

Skeletochronology is a method commonly used for estimating the age of amphibians and reptiles in the wild. However, the number of lines of arrested growth （LAGs） does not necessarily reflect age in some species. We validated the applicability of this method to an endangered eublepharid gecko, Goniurosaurus kuroiwae, then inferred its longevity and age structures in wild populations. We classified young geckos into three groups using previously published data for early growth： Group 1 contained hatchlings before the first winter, Group 2 contained hatchlings after the first win- ter, and Group 3 included yearlings after the second winter. LAG numbers in these groups were then compared. All individuals in Group 1 possessed a single LAG, which was considered as a hatching line. Most individuals in Groups 2 and 3 possessed one and two additional LAGs, respectively （LAG1 and LAG2）, corroborating the notion that LAGs are formed annually. A few geckos exhibited fewer LAGs than expected. Analysis of variations in LAG and marrow cavity diameter demonstrated that in animals with fewer LAGs, endosteal resorption or fusion of hatching line and LAG1 had occurred. LAG2 was never lost by endosteal resorption and was identifiable by its diameter. Thus, the age of adult geckos could be determined by counting LAGs outward from LAG2. Application of this method to wild populations re- vealed that the longevity of this species is not less than 83 months, but that almost all individuals in fragmented habitats die before 50 months, suggesting lower population sustainability in such habitats.     

类别验证任务中否定加工的ERP研究

有研究提出了否定加工的两阶段模拟假说,认为否定加工的第一阶段是模拟被否定的状态,第二阶段是整合否定以模拟真实状态.为了对该假说进行检验,本研究采用ERP技术探讨了20名被试完成类别验证任务时的脑内时程动态变化.任务有4种条件：肯定类别对（例如,蔬菜-白菜）,肯定无关对（例如,蔬菜-蜜蜂）,否定类别对（例如,蔬菜-蜜蜂）和否定无关对（例如,蔬菜-白菜）.其中类别上画有一横线表示＂不是该类别的事物＂,例如,蔬菜表示＂不是蔬菜＂.结果表明,否定类别对比否定无关对和肯定类别对都引发了更负的N400,这说明,否定加工中建立了被否定状态的表征,支持了两阶段模拟假说.此外,肯定类别对比否定类别对引发了更正的LPC,这一结果揭示了两阶段模拟假说中第二阶段即整合否定模拟真实状态的神经机制.可能是因为肯定类别关系的加工涉及再认和记忆信息的提取,而否定类别关系的加工如两阶段模拟假说所预期的包含两个阶段,涉及推理过程,因而前者比后者引发了更正的LPC.     

HPV16/18假病毒中和抗体检测方法的验证

目的应用假病毒中和法建立检测血清HPV16/18中和抗体滴度检测方法并进行验证。方法分别采用不同批次假病毒以及不同代次细胞对不同滴度的HPV16/18阳性血清进行多次平行检测,考察这些因素对检验结果的影响;同时通过对抗HPV16/18双价阳性血清、抗HPV16单价阳性血清和抗HPV18单价阳性血清的检测进一步评估中和抗体检测法的准确性、特异性及重复性。结果不同批次假病毒和不同代次细胞对检验结果的影响均在4倍范围内,此外该检测法的准确性、特异性、重复性均在可接受标准范围之内。结论建立的假病毒法可满足中和抗体效价检测的要求,可用于评价疫苗的免疫效果。     

细菌小RNA识别研究方法进展

细菌小RNA(sRNA)是一类长度在50～500 nt的调控RNA,主要通过与靶标mRNA以不完全配对方式结合来发挥调控作用,sRNA参与细菌基因的转录、翻译、mRNA稳定、成熟和加工等多个过程,因此,sRNA的发现及功能注释对了解细菌的致病机制至关重要。该文将对研究sRNA的各种计算机和实验方法进行综述,阐述各种方法的优缺点,并讨论今后的发展方向。     

转基因玉米双抗12-5转化体特异性PCR方法验证结果分析

抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种,该品种于2020年1月21日获得农业转基因生物安全证书,具有广阔的应用前景。转化体特异性PCR方法是进行转基因生物安全监管的最有效的技术手段之一,可以对转基因产品进行身份鉴定。本研究组织8家实验室对研发单位提供的的双抗12-5转化体特异性定性、定量PCR方法进行了验证,验证结果显示定性与定量PCR检测方法均具有稳定性好、特异性强和灵敏度高的特点,定量PCR方法能精确地定量检测质量分数为5%和0.5%的双抗12-5样品,并且具有良好的重复性和再现性,符合相关标准的要求。本研究有助于后续标准方法的建立和完善,为我国转基因生物安全监管提供技术支撑和决策依据。     

PSDS 2.0: 一个基于GIS和多个模型的生物潜在分布地预测系统

根据对生物分布地预测模型和软件发展现状的分析和总结, 本研究在PSDS 1.0的基础上提出并实现一个基于GIS且具有多个代表性模型的生物分布地预测系统(PSDS 2.0)。PSDS 2.0系统继承了1.0的环境包络和聚类包络模型, 进一步引入了限制因子包络、马氏距离、支持向量机等新模型, 并针对本领域中模型比较与选择的难点增加了迭代交叉验证的多模型选择功能。系统还实现了灵活定制和评估伪负样本的功能, 通过用只需要正样本的I类模型预测的结果对随机产生的伪负样本进行评估, 减小其落入适宜地区的概率, 进一步提高需要正负样本的II类模型的准确率。GIS功能在PSDS 2.0中也得到加强, 被应用于数据准备及结果分析等重要环节。文章最后以白冠长尾雉(Syrmaticus reevesii)为例, 运用PSDS 2.0系统预测其在中国范围内的潜在分布地, 并对各种模型的预测结果进行评估和比较。     

一种验证孟德尔定律中F2性状分离比的新方法——显性观察法

在教学研究的基础上, 总结推导出了一种快速验证孟德尔遗传定律中多对相对性状F₂分离后各自性状比值的新方法--显性观察法。其原理是通过观察F₂代显性性状的表现种类数, 快速确定分离性状和各自对应的表现比值, 即以3为底数, 以某一个体中显性性状表现型的种类数为指数, 计算F₂后代各自性状的比值, 该方法简便易操作, 为教学和基层相关领域的科研节省了时间。     

凝胶条带内DNA回收测序评估DGGE可靠性

为了评估DGGE的可靠性,对DGGE条带中回收的DNA片段进行了测序比较分析,并引入了DGGE可靠性指数的概念评价其可靠性。结果显示同一条DGGE条带回收的DNA来自同一属的概率为64.7%,相同位置的DGGE条带可以被认为是同一OTU;不同的DGGE条带回收到类似的DNA序列（16S rDNA V3区差异小于4 bp）的概率为10.5%;DGGE可靠性指数为74.8%。以上结果表明尽管DGGE技术与理论预期存在一定的差距,但是DGGE技术基本能够反映微生物群落的多样性。       

顶空气相色谱法检测破伤风抗毒素中的甲苯残留量

目的建立检测破伤风抗毒素中甲苯残留量的顶空气相色谱法。方法参照《中国药典》三部(2015版)"残留溶剂测定法",采用Agilent DB-1301毛细管色谱柱(15.0 m×530μm×1.00μm)及氢火焰离子化检测器;顶空进样器各参数分别为:平衡温度70℃,平衡时间30 min,定量环温度80℃,传输线温度90℃,进样量1 m L;气相色谱仪各参数为:进样室温度100℃,柱温箱温度60℃,检测器温度220℃,载气氮气流速5 m L/min,采集时间5min;并对该方法的系统适用性、专属性、线性范围、准确度和精密度、检测限和定量限进行验证及初步应用。结果甲苯保留时间2.429 min,峰面积的RSD为1.9%,以甲苯色谱峰计算得到的理论塔板数N=12 900,甲苯色谱峰与其相邻色谱峰的分离度R=6.03。方法的专属性强,制品中的其他物质不干扰甲苯的出峰;标准曲线的范围为1.0×10-4%~2.0×10-3%,相关系数r大于0.99;加标试验的回收率分别为96.0%~102.9%、100.7%~111.0%,重复性和日间精密度RSD均小于5%。检出限为2.6×10-6%,定量限为1.0×10-5%。测定10批破伤风抗毒素成品和10批破伤风抗毒素原液,其甲苯残留量均低于检出限,远低于规定的限度0.089%。结论该方法简便、快速、准确度、灵敏度高、精密度好,适用于破伤风抗毒素类制品中甲苯残留量的检测。     

中间锦鸡儿CiABR17基因的克隆及表达分析

该研究采用blastn比对方法,从中间锦鸡儿干旱胁迫抑制消减杂交文库筛选出ABA响应蛋白17基因(ABR17)的EST序列。RACE扩增得到cDNA序列594bp,其中ORF为471bp,编码157个氨基酸,预测蛋白质分子量为16.44kD,等电点为4.93,平均疏水指数为-0.126,是一种亲水蛋白。实时荧光定量PCR检测发现,中间锦鸡儿CiABR17基因在脱水、NaCl和热胁迫下均有不同程度表达,说明CiABR17基因与中间锦鸡儿响应逆境胁迫有关;过表达CiABR17拟南芥株系的鲜重、干重和莲座直径均极显著高于野生型株系。