Cloning, sequencing and analyzing of the heavy chain V region genes of human polyreactive antibodies

The heavy chain variable region genes of 5 human polyreactive mAbs generated in our laboratory have been cloned and sequenced using polymerase chain reaction(PCR) technique.We found that 2 and 3 mAbs utilized genes of the VHIV and VHⅢ families,respectively.The former 2 VH segments were in germline configuration.A common VH segment,with the best similarity of 90.1% to the published VHⅢ germline genes,was utilized by 2 different rearranged genes encoding the V regions of other 3 mAbs.This strongly suggests that the common VH segment is a unmutated copy of an unidentified germline VHⅢ gene.All these polyreactive mAbs displayed a large NDN region(VH-D-JH junction).The entire H chain V regions of these polyreactive mAbs are unusually basic.The analysis of the charge properties of these mAbs as well as those of other poly-and mono-reactive mAbs from literatures prompts us to propose that the charged amino acids with a particular distribution along the H chain V region,especially the binding sites(CDRs),may be an important structural feature involved in antibody polyreactivity.     

HFRSV内影像型抗独特型人单抗重链可变区基因克隆

利用反转录－ＰＣＲ方法,从分泌肾综合症出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）内影像型抗独特型人单抗杂交瘤细胞系（Ｃ８）中,成功地克隆了抗ＨＦＲＳＶ１ｄ人单抗重链可变区基因,并将此基因重组入Ｍ１３噬菌体ＤＮＡ中,测定了此重链可变区基因全序列。经计算机分析,基因全长共３５１ｂｐ、编码１１７个氨基酸,氨基酸序列同源性分析发现所推得的该单抗ＣＤＲ２区与ＨＦＲＳＶＧ２蛋白Ｃ端有同源区,此区可能具有较强的抗原性。     

5’端非翻译区对LT—B基因表达的影响

ｍＲＮＡ５＇端非翻译区的不同结构可影响基因表达,为了改善编码人毒素源性大肠杆菌热敏感肠毒素Ｂ亚单位的ＬＴ－Ｂ基因的表达水平,我们把该基因置于ｐＢＶ２２０载体的ＰＲＰ１串联启动子游,构建了带有不同核苷酸组成的５＇端非翻译区重组体。这些重组体。这些重组体分别在大肠杆菌ＨＢ１０１和ＤＨ５ａ中表达。结果表明,起始密码前有两个连续串联ＳＢ序列的ＬＴ－Ｂ基因的表达水平低于只有单个ＳＤ序列下的表达水平,而翻译偶     

反义基因操作及反义分子的设计原则

和突变不同,反义基因操作能在不破坏目标基因的前提了调控基因的表达。因此,它既是阐明基因功能的新手段,又拓宽了通过基因工程改变植物品质和治疗疾病的途径。受天然反义RNA调控机理的启示,人们已能设计出更有效的人工反义分子。     

基因操作原理

即将由中国科技翻译出版社出版。本书是作者根据他在Warwick大学对生物系、微生物系及生物化学系的学位研究生讲授基因操纵课程时所用的讲义改写的。初学者阅读此书,可对遗传工程究竟是怎么一回事,有一个清楚的概念和初步了解;从事这项工作的     

狭缝引导配体1 3′UTR通过miR-34a-5p/SIRT1轴调节内皮细胞表型

在高等生物的进化过程中,mRNA的3′非翻译区(3′untranslated region, 3′UTR)序列显著增加,提示3′UTR在生物功能调节中可能发挥重要作用。我们发现狭缝引导配体1(slit guidance ligand 1, SLIT1) 3′UTR在肥厚型心肌病(HCM)患者心肌中水平降低,但其对肥厚心肌中血管功能调节的作用机制不清楚。利用腺病毒介导在主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells, HAECs)中过表达SLIT1 3′UTR,检测HAECs中一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthases, eNOS)和血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor, VEGFA)表达。分别采用划痕实验和基于Matrigel胶的管腔形成实验检测HAECs的迁移和成管腔能力。结果发现,过表达SLIT1 3′UTR会升高HAECs中p-eNOS、eNOS和VEGFA水平(P<0.01),并促进HAECs迁移和成管腔能力(P<0.01)。生物信息学预测提示,...     

神经肽前体的翻译后加工

神经肽前体的翻译后加工是神经肽生物合成中的重要环节,它具有顺序专一性、组织特异性以及生理调控性。     

相对的翻译

核糖体的两个结构，激起了结构生物学的讨论和发现热潮