与成纤维细胞共培养的肺泡II型上皮细胞的生物学特性

建立胎鼠肺泡II型上皮细胞(AECII)与肺成纤维细胞(LF)共培养模型,观察与LF共培养下AECII的生物学特性。倒置相差显微镜观察AECII形态和基本生长情况;RT-PCR和流式细胞术分别检测肺泡表面活性蛋白-C(SP-C)、水通道蛋白5(AQP5)mRNA及蛋白质表达;流式细胞术检测细胞周期及Ki67表达。结果显示,与LF共培养时,AECII能较好地保留其细胞形态,SP-CmRNA及其蛋白质表达明显增加,而AQP5mRNA及其蛋白质表达则明显减少;LF促进AECII增殖,使G2/M、S期细胞及表达Ki67 细胞的比率明显增多。结果提示,AECII与LF共培养时,能更好地保留其细胞形态、分化及增殖特性。     

Survivin和MMP-9在子宫上皮和间质细胞中的表达与子宫内膜异位症间的关系

目的研究Survivin蛋白和基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）在子宫腺肌症（ade-nomyosis,AM）、腹壁子宫内膜异位症（abdominal wall endometriosis,AWEMS）、卵巢子宫内膜异位症（ovary endometri-osis,OEMS）的在位、异位内膜的腺上皮细胞和间质细胞中的表达,并与对照组进行比较,探讨其在子宫内膜异位症（endometriosis,EMS）的发生发展中的作用。方法采用免疫组化法检测各组织标本中Survivin和MMP-9的表达。结果 （1）在正常子宫内膜组织中Survivin、MMP-9均呈弱表达或无表达。在EMS三个病例组中,无论是在位内膜还是异位内膜组织Survivin、MMP-9的表达均有不同程度的上调,分别与正常子宫内膜组织表达比较差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）在AM、AWEMS、OEMS三个病例组中,仅在增生期异位内膜腺上皮细胞和间质细胞中Sur-vivin、MMP-9的表达分别高于在位内膜同类细胞的表达,差异均有统计学意义（P〈0.05）;分泌期则呈不规律表达。（3）在AM、AWEMS、OEMS三个病例组中,限定相同组织部位、相同细胞类型,增生期与分泌期Survivin、MMP-9的表达水平差异无统计学意义（P〉0.05）且无周期性。（4）在AM、AWEMS、OEMS三个病例组中,限定相同生理期、相同组织部位比较腺上皮细胞与间质细胞Survivin、MMP-9的表达：腺上皮细胞显著高于间质细胞的表达,差异有统计学意义（P〈0.05）。（5）EMS三个病例组之间,限定相同生理期、相同组织部位、相同细胞类型,组间分别比较Survivin或MMP-9的表达水平：Survivin表达差异无统计学意义（P〉0.05）,异位内膜仅分泌期MMP-9在AWEMS腺上皮细胞的表达（4.45±0.18）和AM腺上皮细胞的表达（4.68±0.17）高于OEMS异位内膜腺上皮细胞的表达（2.13±0.12）,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 Survivin和MMP-9在EMS在位内膜和异位内膜腺上皮细胞和间质细胞中高表达可能是内异症发生发展的重要因素并有协同作用,在位内膜异常是EMS发病的决定性因素,腺上皮细胞高表达在EMS的发生发展中起主导作用,AM、AWEMS、OEMS三个病例组中的生物学特性不同可能受发病诱因、腹腔内环境及多种相关因子影响。     

肺上皮细胞自噬体在结核分枝杆菌感染中保护作用的分子机制

目的：构建Atg5．真核表达载体并瞬时转染肺上皮细胞细胞株,探讨自噬在结核分枝杆菌感染上皮细胞中保护作用的分子机制。方法：设计针对Atg5的RNAi序列,化学合成后经过变性,退火连接到pSilencerTM3．1-H1hygro真核表达载体,经测序验证其正确性。脂质体法瞬时转染真核细胞A549,免疫印迹法检测瞬时转染的效果。用结核分枝杆菌分别感染正常和自噬表达低下的A549细胞．通过检测LDH来观察细胞的坏死情况。结果：成功的构建了pSilencerTM3．1-H1hygro真核表达载体并建瞬时转染了A549细胞株,成功抑制了细胞的自噬功能。Atg5-细胞对结核杆菌的抵抗能力下降。结论：在自噬表达低下的细胞中,细胞对结核分枝杆菌的抵抗能力有明显下降。在结核分枝杆菌感染上皮细胞的过程中,自噬是一种保护机制。     

骨形成蛋白Ⅱ型突变受体基因转染对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨骨形成蛋白（BMPs）与口腔鳞癌的发生、发展的可能关系。方法将含有BMP-Ⅱ突变受体的真核表达载体转染入Tea8113舌癌细胞,筛选和鉴定后,构建稳定表达BMP-Ⅱ突变受体的细胞株tBRⅡ-Tea8113。对tBRⅡ—Tca8113细胞和Tca8113细胞分别进行MTT检测,流式细胞仪（FCM）分析、BrdU标记检测细胞的增殖活性及DNA合成;检测tBRⅡ-Tca8113细胞和Tea8113细胞的凋亡及细胞周期相关因子（CyclinD1,CDK-4,p27,p57）的表达。结果Tea8113细胞和tBRⅡ-Tea8113细胞的增殖指数MTT检测为0．47±0．01和0．35±0．008（t=22．953,P=0．000）,BrdU检测为12．0±3．4和23．0±1．9（f=6．918,P=0．000）,FCM检测为6.3和7．9;两组的凋亡指数为3．7±1．2和8．7±1．6（t=29．583,P=0．000）;细胞周期因子在Tca8113和tBRⅡ-ca8113细胞中的平均灰度测量值为CyclinD1（186．5±2．4和145．6±3．9,t=28．244,P=0．000）,CDK4（169．9±2．9和129．5±3．2,t=29．583,P=0．000）,p27（110．1±1．1和167．34-1．8,f=85．754,P=0．000）,p57（107．9±2．1和156．8±2．2,t=50．844,P=0．000）。结论BMPs及其受体可能在口腔上皮组织的恶变过程中有重要作用,研究结果为探讨BMPs信号在上皮性肿瘤中的作用提供了重要依据。tBRⅡ-Tea8113细胞的建立,进一步表明了BMPs及其受体在口腔上皮组织的恶变过程中有重要作用,并为进一步探讨BMP信号在上皮性肿瘤的恶变过程中的作用奠定了基础。     

拔除阻生智齿患者牙科焦虑的调查及分析

目的:了解综合医院口腔科拔除阻生智齿患者牙科焦虑的患病情况并进行相关因素分析。方法:采用牙科焦虑一般因素调查表、改良牙科焦虑量表(MDAS)及状态焦虑量表(S-AI)对300例口腔颌面外科门诊的拔除阻生智齿患者进行调查及评定,同时对引起牙科焦虑的相关因素进行分析。结果:拔除阻生智齿患者牙科焦虑的发生率为56.00%,有6项因素对牙科焦虑症的患病率有影响,差异有统计学意义(P<0.05),其中5项因素对MDAS得分影响较大。结论:牙科焦虑在拔除阻生智齿的患者中较普遍,有多种因素影响患者牙科焦虑的程度。     

牙周干预联合常规四联药物治疗对口腔及胃幽门螺杆菌根除效果的临床研究

探讨牙周干预联合常规四联药物对口腔及胃部幽门螺杆菌根除的效果, 为该类患者的治疗提供参考。

选择胃部H.pylori阳性转诊口腔科进行牙周健康状况及口腔H.pylori检查的患者140例, 随机分为观察组和对照组各70例。对照组患者采用常规四联药物治疗, 观察组在对照组的用药基础上给予牙周干预治疗。对比两组患者治疗前及停药1个月、6个月及12个月后的牙周临床指数和胃肠道症状; 记录并比较两组患者停药1个月、6个月及12个月后口腔H.pylori根除率和胃H.pylori根除率, 评估两组患者治疗不良反应。

停药1个月、6个月及12个月后, 两组患者牙周临床指数中GI、SBI、PD及CAL值和胃肠道症状评分(腹痛腹胀、恶心呕吐、反酸嗳气)较治疗前显著降低, 同时观察组患者均显著低于对照组(均P < 0.05)。观察组患者停药6个月及12个月后口腔H.pylori根除率和胃H.pylori根除率均显著高于对照组(81.43%vs 60.00%, 71.43%vs 48.57%, 75.71%vs 51.43%, 68.57%vs 41.43%;χ²=7.761、7.619、8.914、10.418, 均P < 0.05)。观察组和对照组患者的不良反应总发生率对比差异无统计学意义(4.29%vs 2.86%, P > 0.05)。

牙周干预联合常规四联药物能显著改善胃部H.pylori感染患者的牙周组织健康状况, 减轻其胃肠道症状, 并能有效降低其口腔H.pylori根除率和胃H.pylori根除率, 安全性良好。

     

益生菌辅助治疗牙周病的研究进展

牙周病是累及牙周支持组织的慢性感染性疾病。牙菌斑生物膜中的微生物及其代谢产物是其必不可少的始动因素,可导致口腔微生态失衡和宿主免疫反应,最终引起牙周病的发生发展。目前,牙周病的基础治疗主要是机械清除牙菌斑生物膜和牙石,但治疗效果具有局限性。益生菌通过产生抑菌物质、刺激局部免疫反应、与致病菌争夺黏膜受体和营养物质,从而改善口腔微生态平衡,促进牙周病的治疗。本文就近年来益生菌在牙周病治疗上的实验和临床研究、作用机制、安全性等进行综述,为将来益生菌辅助治疗牙周病的应用提供参考。     

口腔微生物群和人体健康

口腔微生物群作为人体微生物群的重要组成部分,其与人体健康之间的关系已成为各领域研究的焦点。口腔微生物群种类繁多、组成复杂,涵盖了细菌、真菌、古细菌和病毒等。近年来的研究显示,口腔微生物群的组成和比例与人体健康密切相关,会影响口腔疾病如龋齿、牙周病的发生。同时口腔微生物也是全身系统性疾病如肺炎、肿瘤和糖尿病等发生的危险因素之一。大量研究认为,口腔微生物群组成的改变、口腔微生物群之间的相互作用对疾病的发生有协同促进作用。本文聚焦于口腔微生物群的组成相关研究、口腔微生物组的最新进展,并对其与人体健康之间的关系进行综述。     

Sanger和Pyrosequencing测序法分析健康成人口腔菌群

目的 对比Sanger和Pyrosequencing测序法分析健康人口腔菌群组成。方法 收集6例健康成人唾液、舌背、黏膜、龈上及龈下菌斑并构建16S rRNA基因文库,分别用Sanger和Pyrosequencing测序法分析。结果 Sanger测序所得已知的序列有5,794条（占6,535总序列数88.7%）、75个属,396个序列划分操作分类单元（operational taxonomic units,OTUs,占总OTUs的61.4%）。Pyrosequencing测序所得已知的序列有10,771条（占11,103总序列数97.0%）、66个属,322个OTUs（占总OTUs的68.0%）。Sanger和Pyrosequencing测序法所得口腔菌群在门、属的水平分布趋势基本一致,但在种的水平分布差异显著。Sanger和Pyrosequencing测序法构建的口腔菌群文库均匀度值分别为0.016和0.007,说明Pyrosequencing分析口腔菌群物种数量分布比Sanger测序方法的文库均匀性稍差,但优势种更显著。结论 Pyrosequencing测序时所构建基因文库能代表口腔菌群的多样性且经济、省时,可以应用于口腔细菌物种的分析。     

口腔微生物与阿尔茨海默病相关性的研究进展

口腔微生物组是人体五大菌库之一,其微生态失衡不仅在牙周炎和龋齿等口腔疾病中发挥主要作用,还与全身诸多疾病紧密相关。阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease,AD）是一种神经系统退行性疾病,随着社会人口老龄化的加剧,其防治已成为严重的公共卫生问题。大量研究表明,AD与某些口腔致病菌及其微生态失衡显著相关。本文就口腔微生物与AD的关系作一综述,总结了口腔微生物影响AD的可能机制,并在此基础上初步推测不同的微生物与AD间的潜在关系。为进一步治疗和预防AD,人们除了关注AD患者大脑的病理改变外,还应关注患者的口腔微生态平衡。