异育银鲫口服不同剂量葡萄糖后的代谢反应

平均体重为 16 4± 12g的异育银鲫 (方正银鲫♀×兴国红鲤♂ )禁食四周 ,以使肝糖原含量充分下降 ,然后灌喂不同剂量的葡萄糖 ,研究葡萄糖负荷后的代谢反应。实验结果表明 ,不管口服剂量是多少 ,异育银鲫在口服葡萄糖后都出现持久的高血糖 ;口服后 1h血浆总氨基酸、甘油三酯和乳酸水平显著上升 ,然后迅速下降 ;肝糖原含量先降低 ,2h左右开始回升。血糖、总氨基酸、甘油三酯、乳酸及肝糖原的变化幅度也随口服剂量变化而变化 :血糖升幅随口服剂量增加而加大 ;在口服后 1h ,总氨基酸含量随着口服剂量的增加而增加 ,甘油三酯和乳酸含量随着口服剂量的增加而减少 ,而在口服后 2— 10h内 ,口服剂量越高 ,总氨基酸、甘油三酯水平越低 ,乳酸水平越高 ;肝糖原含量随着口服剂量的增加而减少。上述结果提示异育银鲫在口服高剂量葡萄糖之初的 1h内生长抑素和胰高血糖素水平较高 ,而胰岛素的分泌可能受到了抑制 ;推测当口服剂量较低时胰岛素则能正常分泌     

展望即到来的“分子农业”

在过去20余年里,植物生物技术领域中最值得重视的是多种转基因植物的建成,并已在一些国家大面积种植,转基因植物另一方面的进展是合成有医疗价值的多肽、蛋白质、包括抗体、抗体表位、复杂蛋白质等。这里主要介绍转基因植物生产的医疗用多肽、蛋白质,特别是作为口服疫苗在动物和临床试验的成功,预示这种新的用药途径将对第三世界人民的健康起到重大作用。由于转基因口服疫苗不需通过常规发展反应器,仅仅依赖于农业,因此有人提出“分子农业”一词,以显示其优越性。     

封闭带毒素

封闭带毒素（ZOT）是霍乱弧菌编码的第二个毒素,相对分子质量约45000,zot基因位于鞭毛噬菌体CTXΦ基因组中,ZOT通过激活复杂的细胞间一系列级联反应来调节紧密排列的上皮细胞结构,可逆地调节上皮细胞的通透性,从而影响大分子物质的吸收,ZOT及其人类组织类似物zonulin受体广泛存在于多种组织以及传代细胞中,ZOT与其上皮细胞受体的结合位点位于ZOT的118～299氨基酸之间,由于其独特的生物学性质,使用ZOT有可能开辟一种新颖的生物大分子药物口服给药新途径,给制药工业及疫苗工业展示了光明的前景。     

口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)的稳定性研究

目的评价细胞工厂工艺连续生产的口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)的稳定性。方法疫苗在-20℃放置24个月,检测病毒滴度、外观、抗生素残留量、无菌性,及对病毒血清型进行鉴别;2~8℃放置12个月检测疫苗稳定性;室温放置7周、37℃放置7 d检测加速热稳定性并冻融的稳定性。结果该疫苗-20℃可贮存24个月以上,2~8℃有效期可延长至12个月,且冻融不会影响疫苗的稳定性。结论疫苗质量稳定,各项检测结果均符合《中华人民共和国药典》三部(2010版)及企业《口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)注册标准》。     

0710合生元结肠靶向微生态调节剂体外释放及定位作用研究

目的将益生菌双歧杆菌与枸杞多糖提取物设计为口服结肠定位给药系统(OCDDS),制备0710合生元结肠靶向微生态调节剂,考查其体外释放行为及体内定位作用。方法以枸杞中多糖为指标,对制剂进行体外溶出实验,并利用X-射线跟踪技术验证0710合生元结肠靶向微生态调节剂在人体内的靶向性。结果该制剂在人工胃液2 h、人工小肠液4 h,几乎不释药,而在人工结肠液中6 h释药达到100%,符合中国药典2005年版对缓释制剂的规定,且体内实验在结肠中黏附性较好。结论0710合生元结肠靶向微生态调节剂在体外结肠液中释放良好,在体内结肠具有靶向性,达到制剂设计要求。     

中国急性弛缓性麻痹(AFP)病例中脊髓灰质炎病毒疫苗株VP1区基因变异的研究

为研究中国急性弛缓性麻痹(AFP)病例中脊髓灰质炎(简称脊灰)病毒分离株的分子特征,为中国继续维持"无脊灰野毒状态"提供理论依据,对2002年所有省级疾病预防控制中心送检的脊灰分离株,用PCR-RFLP法及ELISA法进行型内鉴定.用PCR-RFLP法筛查出与疫苗株相比有异常酶切图谱的毒株共24株,其中Ⅰ型毒株1株,Ⅱ型毒株21株,Ⅲ型毒株2株;用ELISA法筛查出与疫苗株相比有不同的抗原抗体反应的毒株共22株,其中Ⅰ型毒株7株,Ⅱ型毒株4株,Ⅲ型毒株11株,在7株Ⅰ型毒株中有3株为非疫苗类似株(NSL),其余为双反应毒株(DRV).随后对这46株毒株进行了全VP1区的基因序列分析.结果表明:2002年脊灰分离株都是疫苗株或疫苗衍生株,没有发现野毒株,中国继续保持着"无脊灰野毒状态";口服减毒活疫苗(OPV)株与其它野毒株在稳定性性质方面是类似的,即通常是不稳定的,在人体肠道内有很强的选择性;在人体肠道内,病毒复制产生的基因变异导致毒力升高,是引起疫苗相关麻痹病例(VAPP)的重要原因,但宿主本身的因素也有很大的作用;在局部地区有疫苗株的循环或脊灰疫苗衍生株(VDPV)的存在;最终消除疫苗株引起的AFP病例可能还需要脊灰灭活疫苗(IPV)的介入.     

口服补液盐联合米多君对小儿血管迷走性晕厥的疗效及血清电解质水平、Cor和BNP表达水平的影响

摘要 目的：探究口服补液盐（ORS）联合米多君对小儿血管迷走性晕厥（VVS）的疗效及血清电解质水平、皮质醇（Cor）和脑钠肽（BNP）表达水平的影响。方法：纳入2019年2月至2021年1月于我院儿科就诊的VVS患儿90例作为研究对象,采用随机数字表法将90例患儿随机分为对照组和研究组,每组45例。两组患儿均进行基础健康教育,对照组给予口服盐酸米多君片,研究组在此基础上加服ORS。比较两组患儿的临床疗效、HUTT转阴率、复发率、心率和血压变化、血清电解质水平以及血清Cor和BNP的表达水平变化,并记录研究期间两组患儿所发生的不良反应。结果：研究组总有效率高于对照组（P<0.05）。研究组总转阴率高于对照组,复发率低于对照组（P<0.05）。两组患儿治疗前后HR和SBP均无统计学差异（P＞0.05）。治疗后两组患儿的血清钠、钙、氯的浓度均显著升高,而磷、钾的浓度显著降低（P＜0.05）;与对照组相比,研究组患儿治疗后钠、钙、氯的浓度较高,而磷、钾的浓度较低（P＜0.05）。治疗后两组患儿的血清Cor和BNP的表达水平均显著降低（P＜0.05）;与对照组相比,研究组患儿治疗后均较低（P＜0.05）。两组患儿研究期间均未见明显不良反应。结论：ORS联合盐酸米多君对儿童VVS疗效显著,患儿血清电解质水平显著改善,血清Cor和BNP的表达水平均显著降低,且无明显不良反应,该治疗方案具有一定的实际应用价值。     

银鲫口服嗜水气单胞菌疫苗的免疫和免疫组化研究

室内恒温条件下(水温24±1℃)分别用微胶囊疫苗与全细胞疫苗口灌免疫银鲫,口灌免疫后每周取血和前、中、后肠肠黏膜,间接ELISA检测其抗体效价。结果发现:微胶囊疫苗组鱼血清抗体效价较高,峰值为1∶80,且维持时间较长;各肠段的黏膜抗体中,后肠黏膜抗体效价最高,微胶囊疫苗组峰值达1∶320,前肠的肠黏膜抗体效价也有一定的水平为1∶40;肠道免疫组化试验也得到相似结果:在不同时间对前、中、后肠切片进行免疫组化染色,从光镜下观察到肠黏膜外层和黏膜下层都有阳性着色,以包裹全菌苗为最多,未包裹菌苗较少。同时进行两组疫苗的池塘网箱免疫试验,结果表明:微胶囊疫苗组与全细胞疫苗组的相对百分成活率分别为61.1%和50%,微胶囊疫苗组略高于全细胞疫苗组;口服免疫后两组鱼血清中均能产生较高的抗体效价,在30d左右抗体效价最高达1∶512,能维持较长时间约8—10个月,但两者差异不显著。     

幽门螺杆菌napA基因在乳酸菌中的表达及免疫原性分析

本实验目的是在乳酸菌中表达幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori） 中性粒细胞激活蛋白(NAP),口服免疫小鼠后检测其免疫原性。在实验中利用了分子克隆技术构建携带nap基因的重组原核表达质粒pNICE:sec-nap,将重组质粒转化乳酸菌NZ9000株,筛选鉴定阳性菌落,诱导表达的NAP蛋白用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。将雌性ICR（CV级）小鼠随机分为4组,分别用PBS、携带空质粒的乳酸菌、携带pNICE:sec-nap的乳酸菌、灭活的H.pylori 灌胃。免疫7次后检测其特异性IgG和IgA的产生。成功扩增了nap基因并构建了重组原核表达质粒pNICE:sec-nap,转化乳酸菌NZ9000后经nisin诱导可表达Mr约17kDa的重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白量的9.5%,表达的蛋白能与兔抗H.pylori 血清特异性反应,具有良好的免疫原性。携带pNICE:sec-nap质粒的乳酸菌刺激产生的IgG水平明显高于携带空质粒组,与灭活H.pylori组没有明显的差异,但其刺激产生的IgA水平明显高于其他组。以上结果说明表达NAP蛋白的乳酸菌口服免疫小鼠后,能够刺激小鼠产生特异的IgG和IgA,对幽门螺杆菌疫苗的研究开发具有理论的意义。为乳酸菌作为抗原递送载体的研究和H.pylori口服疫苗的开发提供一定的实验基础。     

斑点叉尾鲖源海豚链球菌Srr蛋白海藻酸钠-壳聚糖口服疫苗的制备及其免疫效果研究

制备海藻酸钠-壳聚糖-海豚链球菌Srr蛋白微球疫苗, 并检测其对斑点叉尾鲙的免疫效果。采用乳化法利用海藻酸钠-壳聚糖包被Srr蛋白, 测定其包封率、载药率及包被蛋白的抗原性; 通过拌饲投喂免疫斑点叉尾鲙, 分为Srr组、Srr微球组、空微球组以及对照组, 间接ELISA法检测免疫后斑点叉尾鲙的血清抗体水平, 试剂盒检测多项血清非特异性指标; 于免疫后第4周利用海豚链球菌攻毒, 计算各组相对保护率, 并通过实时荧光定量PCR检测相关基因的表达量。结果显示, 通过乳化法制得形态为圆形或椭圆形、大小较为均一的微球疫苗, 粒径为(4.26±1.13) μm, 包封率为92.38%, 载药率为19.41%, Western-blot分析表明Srr蛋白微球具有较好的抗原性; Srr微球组的抗体效价峰值出现在第4周, 明显高于其他组, 血清总蛋白、T-SOD以及溶菌酶活力均显著或极显著高于其他实验组, 并获得60%的相对保护率。荧光定量分析结果显示, Srr微球组攻毒后24h和48h各免疫基因表达量均有所上调。Srr蛋白微球疫苗能够提高斑点叉尾鲙抵抗海豚链球菌的能力, 对海豚链球菌起到了一定的预防作用。