蛋白质N端豆蔻酰化修饰的基因工程表达偶联加工系统

对酵母ＮＭＴ基因在大肠杆菌中表达进行较详细的研究,进而构建了复制子为ｐ１５Ａ并含卡那霉素抗性基因的相容性表达质粒ｐＫＺＭＴ,将其与表达质粒ｐＣＺｍＣα１共转化进大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）Ｆ′,进行双质粒表达偶联加工修饰研究,其中ｐＣＺｍＣα１表达底物蛋白小鼠ｃＡＭＰ依赖的蛋白激酶催化亚基α（ＰＫＡ-ｍＣα）。ＳＤＳＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析表明,双质粒表达系统中,ＰＫＡ-ｍＣα都得到了稳定的高表达,尤其在２３℃低温诱导表达时,表达产物的可溶性部分明显增多;而酵母ＮＭＴ被控制在有利于活性功能的可溶性低水平表达。［^３Ｈ］ｍｙｒｉｓｔｉｃａｃｉｄ标记测定及放射自显影的结果显示,在大肠杆菌中表达的重组ＰＫＡ-ｍＣα被豆蔻酰化修饰。     

双水相电泳分离蛋白质的研究

近几年来,随着生物技术的迅速发展,制备型电泳技术的研究得到了重视。然而由于技术上的原因,大规模的制备型电泳技术的研究还未能取得突破。阻碍电泳放大的一个主要问题是由于电加热作用而导致的热对流对电泳分离的破坏。为解决这一问题,人们提出了许多方法。例如,在太空的微重力环境下进行电泳,应力稳定自由流动电泳,循环等电聚焦和区带电泳,色谱电泳和等电膜等电聚焦等。这些方法在电泳放大上都取得了一定的进展,但各有其局限性。最近,Clark提出利用双水相的液液界面阻止热对流的设想,为开发大规模的制备型电泳技术开辟了一条新途径、Raghava Rao等在两种双水相体系上施加电场后成倍地缩短了分相时间。Levine和Bier采用U型管电泳装置研究了双水相体系中血红蛋白的电泳迁移率,观测到界面有阻滞作用。Clark在柱型电泳装置中进行了一组双水相萃取肌红蛋白的简单实验。在10mA的恒电流下电泳40min之后,肌红蛋白的分配系数为7.5,而当电场反向后,分配系数变为0.04,界面阻力并不显著,两者结论并不一致。     

离子导入法和渗透促进剂并用对裸鼠皮肤角质层影响的ESR研究

通过测定５－唑烷氮氧自由基硬脂酸（５－ＤＳＡ）标记裸鼠皮肤角质层的ＥＳＲ谱,研究离子导入法与渗透促进剂１００％月桂氮酮（１００％ＡＺ）、５％月桂氨　酮／丙二醇溶液（５％　ＡＺ／ＰＧ）和１０％油酸／丙二醇溶液（１０％ＯＡ／ＰＧ）并用对裸鼠皮肤角质层的影响。离子导入法处理皮肤后,标记物序参数降低,各向同性超精细分裂偶合常数增大,表明低密度电流能够引起皮肤角质层细胞间脂质排列有序性降低,流动性增大,极性增大;离子导入法与渗透促进剂并用处理皮肤后,序参数进一步降低,各向同性超精细分裂偶合常数进一步增大,表明二者对皮肤角质层的影响具有协同作用。     

地高辛精标记酪氨酸羟化酶RNA探针的制备研究

为制备用地高辛精（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ,Ｄｉｇ）标记的酶氨酸羟化酶（ＴｙｒｏｓｉｎｅＨｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ,ＴＨ）ＲＮＡ探针,本研究用分子生物学技术重组质粒ＰＧＥＭＴＨＩ,即分别将携带Ｔ７和Ｓｐ６启动子的ＰＧＥＭ－３ｚｆ质粒和携带ＴＨ基因的ＰＫＳＴＨ质粒用限制性内切酶消化并行分离纯化,得到带Ｔ７和ｓｐ６启动子的ＤＮＡ片段和ＴＨ基因片段;经Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接后转入大肠杆菌,得到ｐＧＥＭＴＨ１重组克隆。经小量提取质粒井用酶切分析检测,证实其确有ＴＨ基因且方向正确。将此质粒再经限制性内切酶消化则得到线状ＤＮＡ片段,用Ｔ７ＲＮＡ聚合酶转录合成带有Ｄｉｇ标记的高比活度的单链ＲＮＡ探针;经斑点杂交试验证实该探针具有较高的可靠性。这将为基因治疗帕金森氏病动物模型的疗效检测提供有效手段。     

DNA遗传标记技术在林业生产中的应用

林木种子及苗木鉴别技术的准确性和可靠性是提高营林造林质量的关键环节,传统的种苗鉴别技术的局限性往往使之不能有效鉴别林木种子的品种及种源。ＤＮＡ遗传标记技术则能提供稳定、准确、可靠的种及品种特异性标记,因而成为林业生产上极具潜力的品种鉴定手段,本文综述了目前国际上ＤＮＡ遗传标记技术的研究进展,并讨论了开展我国林木种菌ＤＮＡ鉴定技术研究的若干设想。     

双功能抗体介导的胃癌杀伤效应

将诱变的αＣＤ３杂交瘤（ＴＫ~－）与ＰＤ４杂交瘤（ＨＧＰＲＴ~－）融合,获得分泌双功能抗体（ＢｓＡｂ）的四体杂交瘤Ｃ３．ＢｓＡｂＣ３可分别与ＣＤ３分子及胃癌相关抗原Ｐ４０反应．体外杀伤试验证实,当效靶比为４０：１,ＢｓＡｂＣ３浓度为１ｍｇ／Ｌ时,其杀伤效应可达７７．６％．该杀伤效应具有明显的特异性,仅Ｐ４０阳性表达的靶细胞可被溶解,体内杀伤试验证实,裸鼠接种胃癌细胞后５ｄ,以ＢｓＡｂＣ３活化的外周血淋巴细胞（ＰＢＬｓ）经局部皮下注射处理,可使移植胃癌完全消退（５／５）．这一明显的治疗作用可能与局部注射途径有关,可供临床应用参考．     

新疆双距螯蜂属一新种（膜翅目：螯蜂科）

本文记述新疆螯蜂科二个种,－为黑腹单节螯蜂Ｈａｐｌｏｇｏｎａｔｏｐｕｓｏｒａｔｏｒｉｕｓ（Ｗｅｓｔｗｏｏｄ）,另－为新种：晶额双距螯蜂Ｇｏｎａｔｏｐｕｓｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｕｓｓｐ．ｎｏｖ．     

光亲和标记鉴定玉米根脱落酸结合蛋白

光亲和标记鉴定玉米根脱落酸结合蛋白吴忠义,陈珈,朱美君（北京农业大学生物学院,１０００９４）关键词结合蛋白;光亲和标记;ＡＢＡ;受体;微粒体脱落酸（ＡＢＡ）作为一大类植物激素,在高等植物的生长发育以及对逆境的适应过程中发挥着重要作用。在探讨激素作用的...     

应用光敏生物素标记核酸探针鉴定分枝杆菌的研究

用光敏生物素标记非结核分枝杆菌临床分离株及标准分枝杆菌全染色体ＤＮＡ制成探针,与已知标准牛分枝杆菌（ＢＣＧ株）及不同种的非结核分枝杆菌ＤＮＡ杂交,可快速将分支杆菌鉴定到种,同时以大肠埃希氏菌做阴性对照,显示良好的特异性和准确性。此种方法具有鉴定速度快、操作简便、稳定性好及对人体无害等特点,适用于结核杆菌和非结核分枝杆菌的菌种鉴定。