青春期丙烯酰胺暴露对小鼠肺组织氧化损伤的影响

目的 探究丙烯酰胺(acrylamide, ACR)对小鼠肺组织的损伤及其可能机制。方法 以4周龄SPF级雄性小鼠为实验动物,随机分为对照组和ACR组(10 mg/(kg·d)组和20 mg/(kg·d)组),每组8只。对照组给予常规饮用水;ACR组按小鼠每日饮水5 mL来配制ACR的染毒浓度,每3 d更换1次,连续处理4周。实验结束后取肺组织制作切片,进行组织病理学分析;利用试剂盒检测其氧化损伤的相关指标;进一步利用免疫荧光与Western Blot技术检测Nrf2-ARE通路相关蛋白表达。结果 与对照组相比,随ACR摄入浓度的增加,小鼠体重逐渐下降(P<0.01);组织病理学分析发现,ACR组小鼠肺组织出现细支气管上皮肥大,肺泡上皮增生及肺泡腔面积明显减少,20 mg/(kg·d)组病理学改变更为明显;氧化应激指标检测发现,与对照组相比,随着ACR摄入浓度的增加,肺组织中GSH-PX活性逐渐下降(P<0.05)、SOD活力逐渐下降(P<0.05)、CAT活力逐渐下降(P<0.01),而MDA的含量明显上升(P<0.01);免疫荧光结果显示,与对照组相比...     

从非变性聚丙烯酰胺凝胶回收纯化DNA样本

介绍一种从非变性聚丙烯酰胺凝胶中回收和纯化目标DNA片段的方法,经比较回收纯化前后PCR产物的电泳结果,表明该方法具有简单快捷和效率高的优点。     

七株聚丙烯酰胺降解菌对PAM的降解性能评价

研究了从油田产聚合物污水和污泥中分离到的7株聚丙烯酰胺（PAM）降解菌对纯PAM的降解效果。结果表明,PAM微生物降解的过程中,会伴随有pH的降低。由于7株菌组成的微生物群落对PAM的生物降解作用,使得培养基中的PAM的运动粘害怂650．mm^2．／s降低至100mm^2／s左右。添加液蜡或酵母膏等导致微生物菌群的共代谢作用,可加快PAM的生物降解。     

小鼠晶体蛋白质组的双向电泳和质谱鉴定研究

目的应用双向电泳和质谱技术研究5周龄小鼠晶体蛋白质组。方法提取小鼠晶体总蛋白,进行固相pH梯度（IPG）等电聚焦双向电泳,胶体考马斯亮蓝R-250染色,使用PDQuest7．30图像分析软件分析电泳图像。选择主要蛋白点胶上酶解,应用基质辅助激光解析电离飞行时间／飞行时间（MALDI—TOF／TOF）仪器进行串联质谱（MS／MS）鉴定。结果上样量为882μg和190μg时,分别检测370±41蛋白点（n=3）和57±5个蛋白点（n=3）。高上样量能够较好地分离晶体低丰度蛋白,如念珠状纤维结构蛋白BFSP;低上样量可很好地分离高丰度蛋白-晶体蛋白（包括αA、αB;βA1～βA4;βB1～βB3;γA～γF和γS等）。质谱鉴定得到1种细胞骨架蛋白和16种高丰度晶体蛋白。结论双向电泳和质谱技术有效考察了晶体总蛋白质,为分析白内障形成过程中蛋白质的表达改变提供了新的方法和途径。     

DGGE和T-RFLP在堆肥微生物群落结构研究中的应用

对堆肥微生物种群分布及其动态变化的研究进行了分析,论述了分子生物技术中的变性梯度凝胶电泳和末端标记限制性片段长度多态性的原理和特点,以及用于研究堆肥微生物的群落结构演变规律,为分析和筛选堆肥中的微生物提供更加有效、快速的信息,促进堆肥技术的发展。     

转cry1Ac/cpti基因水稻对土壤氨氧化细菌群落组成和丰度的影响

【背景】氨氧化细菌是驱动硝化作用的关键微生物,其群落多样性变化对土壤氮素转化具有重要意义。转基因作物可能通过根系分泌物和植株残体组成的改变对土壤微生物群落产生影响。【方法】本研究通过田间定位试验,利用特异引物进行PCR DGGE (聚合酶链反应—变性梯度凝胶电泳)和荧光定量PCR,分析了种植转cry1Ac/cpti双价抗虫基因水稻第3、4年土壤中氨氧化细菌群落组成和丰度的变化。【结果】水稻各生育期（分蘖期、齐穗期和成熟期）内,转cry1Ac/cpti基因杂交稻Ⅱ优科丰8号（GM）的土壤氨氧化细菌16S rRNA基因群落组成、多样性指数与其对应的非转基因杂交稻Ⅱ优明恢86（CK）间均没有显著差异;以DGGE条带为基础的氨氧化细菌群落组成的冗余分析（RDA)显示,GM和CK的土壤氨氧化细菌群落组成只与水稻生育期存在显著相关性（P=0.〖KG-*8〗002和0.〖KG-*8〗018）;同时,水稻各生育期内土壤氨氧化细菌16S rRNA基因丰度在GM和CK间也没有显著差异,但均随水稻生长而变化且在齐穗期达到最高（P<0.〖KG-*8〗05）。【结论与意义】稻田土壤氨氧化细菌的群落组成与丰度在水稻不同生育期存在差异,但在转cry1Ac/cpti基因水稻和非转基因水稻间没有显著差异,即一定时期内种植转cry1Ac/cpti抗虫基因水稻不会影响土壤氨氧化细菌的群落组成和丰度。     

DGGE技术对南美白对虾养殖水体中微生物多样性的研究

以上海市金山区水产养殖基地的水样为试验材料,测定2011年一个养殖周期内7、8、9月不同养殖环境中水样的理化指标,并利用变性梯度凝胶电泳( denaturing gradient gel electrophresis,DGGE)的方法对养殖水体的微生物多样性进行分析.结果表明,不同月份中各个水样的微生物种类相似度在39％以上;不同养殖模式下养殖水体中微生物种类丰富,7、8月中各个取样点的DGGE条带在20条左右,其中以排水沟为最多;而9月为15条左右,以土池为最多.试验结果说明,养殖前中期水体微生物系统较稳定,后期微生物种类表现出大的差异性,各个池塘微生物种类减少但数量显著,需要在后期加大防病控病机制.另外,大棚养殖模式较开放的土池养殖更有优势,其中微气泡增氧机和绿色水生植物的引入,为建立更稳定健康的养殖模式提供参考.     

丙烯酰胺神经系统毒性机制

丙烯酰胺(acrylamide,ACR)是公认的神经、致癌、遗传和雄性生殖毒物。高温(120 oC)烹饪富含淀粉食物会产生ACR及致癌性已在近年引起世界卫生组织(WHO)和联合国粮农组织(FAO)的关注,本文就ACR的性质、危害、代谢、对神经行为的影响和神经毒性机制的研究状况方面进行综述,以期为ACR对神经系统毒性作用的特点、机制及危险度评定和防治提供科学依据。     

肥胖患者HFA小鼠模型的建立

目的研究肥胖患者的肠道菌群在无菌小鼠体内的定植规律。方法选取20只无菌KM小鼠,接种肥胖患者的粪便,构建菌群人源化(HFA)动物模型,利用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)评价患者肠道菌群在无菌小鼠体内的定植规律。结果 HFA小鼠菌群平均丰富度(richness,S)为12.04±3.68,肥胖患者的条带S为24,为HFA小鼠S的2倍;肥胖患者Shannon指数(H')为3.02,HFA小鼠平均H'为2.46±0.33;HFA小鼠与人肠道菌群的总相似度为26%;大部分雌性HFA小鼠与雄性HFA小鼠在聚类分析图上分离,且雄性HFA小鼠与患者更为相似。结论HFA小鼠体内能部分模拟肥胖患者的微生物区系,且与患者性别相同的小鼠模拟得更好。本实验建立的HFA模型为肥胖与肠道菌群关系的进一步研究提供新的选择。