羊输卵管液中发情相关糖蛋白的性质研究

哺乳动物输卵管卵管液为受精和早期受精卵的发育提供了一个理想的生理生化环境。人们对输卵管液的成分已进行了初步研究,其中发情相关糖蛋白（EGP）是被研究的成分之一。EGP仅存在在排卵核受精前后的输卵管液中。当受精卵进入子宫区,输卵管液中的EGP就消失了。显然,EGP是与哺乳动物的早期发育过程密切相关。尽管人们对EGP的确切生理功能尚不清楚,但作为第一步,首先弄清EGP的理化性质是十分重要的。本文目的在于研究羊输卵管液中EGP的理化性质。本文采用单向（ID）、双向（2D）SDS－聚丙烯胺凝胶电泳（PAGE）和等电聚胶电泳（IEF）,结合Western blot技术对EGP的性质进行了[研究。由于单克隆抗体及花生凝集素（Peanut Agglutinin)和EGP相结合的专一性很高,不必事先对EGP进行纯化就可直接进行分析。我们的结果证明羊EGP包括两种蛋白质,一种是酸性蛋白,它的等电点为数4．5;另一种是碱性蛋白,其等电点是8：0;这两种蛋白基的分子量相同,都是10kD。从不同物种间EGP这些理化数据上比较,羊和狒狒的非常接近,但和其他动物的有很多不同。我们认为来自不同动物的EGP可能是一类性质相同的蛋白质,具有相同的生理功能,但其分子受糖基化的程度是不同的。本研究使我们对生殖过程的了解使有所增加,也对寻求一种更有效的早期胚胎体外培养基有所帮助。     

诺卡氏菌属GS-17耐热茁霉多糖酶的提纯和性质

诺卡氏菌属GS-17(Nocardia sp.GS-17)的耐热茁霉多糖酶(Pullulanase EC.3.2.1.41)的粗酶液经中空纤维柱超滤浓缩、羟基磷灰石柱层析和Pullulan-Sepharose 6B亲和层析,得到凝胶电泳均一的纯酶,比活提高264倍.酶作用最适温度为55℃,最适PH6.2,分子量140000,等电点pI为6.0.该酶水解茁霉多糖、支链淀粉和可溶性淀粉,但不水解糖原.酶在50℃作用于茁霉多糖的米氏常数K_m为0.90mg/ml,最大反应速度V_(max)为57μmol·min~(-1)·mg~(-1).Zn~(2 )、Fe~(3 )、Hg~(2 )、Cu~(2 )、Pb~(2 )和环状糊精对酶有抑制作用,Ca~(2 )对酶有激活作用.经蛋白质侧链化学修饰研究表明,色氨酸残基位于酶的活性位区.该酶是由1129个氨基酸残基组成的单肽链,酶的N末端序列经测定为:Ala-Gly-His-Gly-Pro-Asp-Val-Gln-Asp-Gly-     

大肠杆菌β-D-半乳糖苷酶的定位突变及突变酶的动力学性质

利用人工合成的寡核苷酸探针,将编码大肠杆菌β-D-半乳糖苷酶(EC3.2.1.23)的Lac Z基因中537位Glu密码子GAA分别用GAC(Asp)、CAA(Gln)、GTC(Val)来替代,替代后的突变酶的催化活性显著降低.同天然β-D-半乳糖苷酶相比,作用于ONPG底物时,突变酶的k_(cat)值分别为0.13%(Asp-537)、0.0006%(Gln-537)、0.0035%(Val-537),但它们的K_m值并无明显改变.无论是天然酶还是突变酶,底物类似物IPTG是一个强有力的抑制剂,而过渡态类似物2-脱氧-2-氨基-半乳糖和L-核糖只对突变酶有微弱的抑制作用.活化剂叠氮钠的激活作用小于β-D-半乳糖苷酶的Glu-461突变酶.催化甲醇成酯反应的能力小于天然酶.突变酶对热更不稳定.以上结果表明Glu-537残基是该酶催化反应的必需基团.     

染色体动粒与细胞有丝分裂

染色体动粒与细胞有丝分裂杨新林,王永潮（北京师范大学生物系细胞室,北京１００８７５）关键词动粒,有丝分裂真核细胞由间期进入有丝分裂期时伴随着一系列事件的发生,其中最显著的变化之一是有丝分裂纺锤体的形成。有丝分裂纺锤体至少由两类微管组成：一类是星状微管...     

宋内氏痢疾菌侵袭相关基因的克隆与表达

用粘粒PJB8为载体,构建了宋内氏痢疾菌I相大质粒基因库。用菌落原位杂交,Western blot方法从文库中筛选到1株表达IpaA,B,C,D 4种蛋白的重组子。经重组质粒酶切和Southern blot等方法对宋内氏菌和福氏2a痢疾菌的侵袭相关基因片段作了初步比较分析。     

枸杞果实铁型超氧物歧化酶的纯化及性质

枸杞果实Ｆｅ－ＳＯＤ粗提液经硫酸铵盐析、离子交换柱层析及凝胶过滤,纯化到电泳单班点均一程度。纯化的Ｆｅ－ＳＯＤ分子量为４４．６ｋＤ,亚基分子量为２２．０ｋＤ。金属元素分析表明,每分子酸含１个Ｆｅ原子。该酶在紫外区最大吸收值为２７８ｕｍ。Ｈ２Ｏ２明显抑制该酶活性,ＫＣＮ对酶活性无影响。该酶氨基酸组成与高等植物和蓝绿藻的Ｆｅ－ＳＯＤ相似,但它具有较高甘氨酸,酸性氨基酸与碱性氨基酸比值高于高等植物而与低等植物及原核生物相近。     

重组IL－6与IL－3或／和GM－CSF合用对正常BN大鼠粒单系体外造血的调控效应

本研究探讨了重组人ＩＬ－６与大鼠ＩＬ－３和／或小鼠ＧＭ－ＣＳＦ结合对正常ＢＮ大鼠粒单系体外造血的调控效应。结果表明,ＩＬ－６在１０００－４０００Ｕ／ｍｌ呈剂量依赖性刺激粒系造血祖细胞集落形成及骨髓细胞的ＤＮＡ合成,集落以ＧＭ型为主,其刺激活性低于ＩＬ－３或ＣＭ－ＣＳＦ。ｌＬ－６与ＩＬ－３和／或ＧＭ－ＣＳＦ的结合对粒单系集落形成及ＤＮＡ合成无协同或相加作用,甚至出现拮抗效应,但却显著增大集落。提示ＩＬ－６可能具有双向调控作用,促进早期造血细胞的增殖,拮抗其它因子对晚期粒单系造血的刺激作用;具有重叠生物效应的这３种细胞因子在调控造血时,它们之间的相互作用应是顺序的而不是同时的。     

不同树种混交林及其纯林对土壤理化性质影响的研究

对针阔混交林土壤理化性质的研究表明,针阔混交林比针叶树纯林对土壤的改良作用要好,它使土壤总孔隙度增加２—１９％,水分含量增加６—３１％,枯枝落叶年凋落量增加２—２００％;土壤养分含量全Ｎ、ＮＨ４－Ｎ、代换性Ｃａ、代换性Ｍｇ和腐殖质含量分别增加４５—７５％、３３—８２％、５５—８５％、４４—８４％和３７—４６％．     

侵染新疆甜菜的两种病毒分离物的研究

在新疆甜菜的根部和叶片分离到两个球状病毒分离物。从病毒形态、生物学及物化性质等研究结果证明这两个分离物实是一种病毒。病毒粒体力２０面体,直径约２８ｎｍ,回接到甜菜上产生环斑和沿脉线纹最后形成坏死斑。此外还侵染苋色藜,昆诺阿黎,番杏,菠菜等,引起局部坏死斑。在普通烟,心叶烟,菜豆,黄瓜,蕃茄上无症状侵染,病毒致死温度为７０℃,１０分钟。体外存括期１３天以上,冻干病叶７年后仍有侵染力。通过ＰＥＧ沉淀、差速离心、琼脂糖柱层析及蔗糖梯度离心,可得到较高浓度的纯化病毒,病毒的紫外吸收最低值在２４５ｎｍ,最高值在２６０ｎｍ。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定,病毒外壳蛋白的分子量为２．７×１０￣４道尔顿,病毒基因组核酸为三个组份,分子量分别为３．０８ｋｂ,１．２８ｋｂ和０．８５ｋｂ。在琼脂双扩散实验中,能与番茄黑环病毒（ＴＢＲＶ）抗血清产生较弱的沉淀线,与黄瓜花叶病毒（ＣＷＶ）、烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）、烟草坏死病毒（ＴＮＶ）、香石竹环斑病毒（ＣａＲＳＶ）的抗血清不发生反应。     

菜心溶菌酶的提纯及酶学性质

菜心（ＢｒａｓｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓＬ．ｓｓｐ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓｖａｒ．ｕｔｉｌｉｓ）叶子高速捣碎后,滤液经酸碱处理,硫酸铵分步沉淀,凝胶柱层析等步骤分离纯化溶菌酶,酶比活力达３４１４．６Ｕ／ｍｇ,纯化倍数为１９７．４。菜心溶菌酶在较宽的温度或ｐＨ值范围均有活性,最适温度为６０℃,最适ｐＨ值为５．８,底物Ｋｍ值为８７μｇ／ｍＬ。该酶对热和酸碱的稳定性较高,巯基和酪氨酸残基不是该酶活性中心的必需基团。