一种乌鳢与斑鳢线粒体PCR-RFLP鉴定方法

为了高效的鉴别乌鳢与斑鳢,采用PCR-RFLP技术,对乌鳢与斑鳢开展分子生物学鉴定方法研究。通过比对乌鳢和斑鳢线粒体全序列,发现1处单核苷酸多态性位点,可以明确区分两个物种。利用1对引物对乌鳢与斑鳢线粒体基因组该区域进行PCR扩增,用限制性内切酶EcoR I分别对扩增产物进行酶切,并用1.5%的琼脂糖凝胶检测酶切结果。PCR-RFLP检测结果显示,斑鳢的PCR扩增产物被EcoR I酶切后生成两个不同大小的片段,分别为315 bp和875 bp,乌鳢则保持不变。由此可将乌鳢与斑鳢在酶切图谱上鉴别出来。     

不同发育阶段的斑腿树蛙蝌蚪对敌敌畏遗传毒性的敏感性

敌敌畏是我国农田中使用最普遍的有机磷杀虫剂,它通过干扰对神经传导起重要作用的胆碱酯酶的活性,起到接触和摄入毒杀昆虫的作用,也对当地水生动物及种群造成很大威胁。本文以广泛分布于我国南方农田区域的斑腿树蛙蝌蚪为研究对象,用碱性单细胞电泳方法比较了暴露于不同浓度(2.08,4.16,6.24,8.32,10.40mg/L)的敌敌畏溶液中三个发育阶段的遗传毒性的差异。结果表明:敌敌畏溶液暴露24h,对早期和中期阶段的蝌蚪造成极显著的DNA损伤(P<0.01),甚至在敌敌畏浓度低达2.08mg/L的溶液中也产生显著的损伤(P<0.05);统计分析表明,DNA长宽比率与敌敌畏剂量之间呈显著的线性关系,早期阶段和中期阶段的相关系数分别为0.950(P<0.01)和0.954(P<0.01)。对于后期阶段的蝌蚪,所有浓度的敌敌畏溶液都未导致明显的DNA损伤,作者认为进入变态阶段的蝌蚪对敌敌畏的敏感性明显下降。结果同时也表明,早期和中期阶段的斑腿树蛙蝌蝌是一种监测环境遗传毒性的合适指示生物。     

腺病毒介导的Her2基因RNAi载体的构建和鉴定

目的:构建腺病毒介导的Her2基因RNAi栽体.方法:构建含有Her2基因片断的siRNA质粒Her2-pSuppressor,通过特异性酶切将目的基因与穿梭载体pshuttle相连,再通过特异性酶切位点将目的片断与腺病毒DNA相连,并用PCR和酶切鉴定方法进行筛选和鉴定,获得重组腺病毒DNA.以Pac Ⅰ酶切线性化后转染包装含有腺病毒E1的HEK293细胞.以软琼脂平板上的空斑数量计算重组腺病毒的的滴度.结果:Xba Ⅰ Mlu Ⅰ双酶切鉴定Her2a-RNAi/pShuttle和Her2b.RNAi/pShuttle阳性重组子获得304bp的目的片段,重组腺病毒载体Adeno-Her2a-RNAi和Adeno-Her2b-RNAi经PCR扩增出同样大小片断,经线性化后用脂质体法转染293细胞,观察到细胞病变效应.病毒滴度达1.2× 108PFU/mL.结论:成功构建了Adeno-Her2-RNAi,为肿瘤的基因治疗奠定了良好的基础.     

二斑叶螨为害对菜豆生理指标的影响

二斑叶螨(Tetranychus urticae)是为害菜豆的重要害虫。本文研究了二斑叶螨不同密度和不同时间为害对菜豆各种生理指标的影响。结果表明:在二斑叶螨2头·叶-1的低密度和为害少于5 d的短时期内,菜豆叶片叶绿素a、叶绿素b和叶绿素总含量变化不大,但随着二斑叶螨为害时间的延长和密度的增大,叶绿素含量下降明显增加;总糖和还原糖的含量与二斑叶螨的为害程度关系密切,即为害时间越长、受害程度越严重,还原糖降低幅度越大,总糖的含量则先升高再降低;随着二斑叶螨为害程度的加重,菜豆叶片中全磷、全钾损失显著,全氮含量变化不显著。     

粟胡麻斑病菌有性世代的研究

诱发粟胡麻斑病菌(Cochliobolus setariae)有性世代的条件:培养温度23—24℃,Sach培养基(pH 不予调整),培养基物稻草杆段。粟胡麻斑病菌有性生殖的方式为异宗配合,病菌菌株间有性杂交的亲和性较低。粟胡麻斑病菌和玉米小斑病菌(Cochliobolus heterostro-phus)的种间杂交,产生不育的子囊。     

丽斑麻蜥胚胎物质和能量的利用及孵出幼体的特征

在所有可能影响有鳞类爬行动物卵孵化的环境因子中,温度的影响最为显著。孵化温度不仅能影响孵化期、孵化成功率和胚胎畸形率(Overall,1994),而且还影响孵出幼体的形态特征和功能表现(Van Damme et al.,1992;Ji and Bra a,1999;Bra a and Ji,2000;计翔等,1999;潘志崇、计翔,200     

金属螯合亲和层析的应用研究进展

金属螯合亲和层析是近30年来出现的一种新型的分离纯化技术,它以配基简单、吸附量大、分离条件温和、通用性强等特点,逐渐成为分离纯化蛋白质等生物工程产品最有效的技术之一.其在蛋白质、酶和核苷酸纯化以及蛋白质分析等方面具有广泛的应用.而随着研究的进一步深入,其新应用也越来越广泛的被发现.     

饥饿对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)幼体发育的影响

对刚孵化的中华绒螯蟹第一期的蚤状幼体经不同时间的饥饿后再投喂,发现饥饿可以明显降低幼体的存活率和延长幼体的发育期。实验表明:对中华绒螯蟹第一期的蚤状幼体的饥饿时间(t)和发育期长(D)呈线性关系(D=4.6303+1.3226t r=0.970p<0.01)。对于中华绒螯蟹第一期的蚤状幼体,当起始饥饿时间超过了4d,再予以投饵,幼体均不能恢复正常的发育和蜕皮功能,得出中华绒螯蟹的不可恢复点(the point of no-return,PNR)大约为4d。通常以产生50%的幼体死亡的饥饿期即PNR₅₀,来表明幼体对饥饿的抵抗能力,实验得出中华绒螯蟹第一期的蚤状幼体的PNR₅₀大约为48h。     

芪明颗粒联合玻璃酸钠滴眼液治疗儿童中度干眼症的疗效及对泪液氧化应激和炎症因子的影响

摘要 目的：探讨芪明颗粒联合玻璃酸钠滴眼液治疗儿童中度干眼症的疗效及对泪液氧化应激和炎症因子的影响。方法：选取2019年8月~2021年12月期间来贵阳市妇幼保健院就诊的干眼症患儿,共计90例。入选的患儿根据随机数字表法分为对照组（玻璃酸钠滴眼液治疗）和观察组（芪明颗粒联合玻璃酸钠滴眼液治疗）,各为45例,两组均治疗3个月。对比两组疗效、临床指标、泪液氧化应激指标、炎症因子指标和不良反应。结果：观察组93.33%的临床总有效率较对照组68.89%高,差异有统计学意义（P<0.05）。两组不良反应发生率对比无差异（P>0.05）。观察组治疗3个月后泪膜破裂时间（BUT）、泪液分泌试验（SIT）较对照组高,角膜荧光染色（FL）评分较对照组低（P<0.05）。观察组治疗3个月后超氧化物歧化酶（SOD）高于对照组,丙二醛（MDA）、过氧化脂质（LPO）低于对照组（P<0.05）。观察组治疗3个月后白细胞介素1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白介素-8（IL-8）低于对照组（P<0.05）。结论：儿童中度干眼症采用玻璃酸钠滴眼液联合芪明颗粒治疗,可有效降低患儿的氧化应激和炎症反应,且安全性较好。     

虎斑夜鳽分布与亚群态势研究

本世纪以来对虎斑夜鳽分布地点的新发现,表明该种从滨海到内陆漫布于中国长江以南广大地区,并向北渗透直逼东洋界北限秦岭-淮河一线;作者据此将各地的虎斑夜鳽初划为11个亚群,提出目前该种存有3个相对健康而稳定的亚群,即黄山-天目山亚群、南岭亚群和广西亚群,且每个亚群的分布范围均至少不会小于5000km2,其中以黄山-天目山亚群的记录由历史至现今相对最为长久而完整,进而提出今后在上述诸亚群范围之外还会有新的发现.文中指出,尽管近期对虎斑夜鳽分布状况有了新认识,目前仍可视该种的受胁等级为濒危.