柑桔原生质体辐射诱变筛选抗寒再生植株

用１１６１Ｃ／ｋｇ软Ｘ射线辐射“Ｐａｇｅ”桔柚（ＣｉｔｒｕｓｒｅｔｉｃｕｌａｔａＢｌａｎｃｏ×Ｃ．ｇｒａｎｄｉｓＯｓｂ．ｃｖ．Ｐａｇｅ）胚性愈伤组织分离的原生质体,经－１１℃低温选择后,将存活的原生质体培养再生植株。研究表明,“Ｐａｇｅ”桔柚胚性愈伤组织原生质体在４１２８Ｃ／ｋｇ辐射剂量处理后几乎不能恢复分裂;２０６４Ｃ／ｋｇ辐射时分裂频率低,即使分裂也难以发育为胚状体;而１１６１Ｃ／ｋｇ辐射后,经－１１℃低温处理仍有１０２％～１６９％的分裂频率,且部分细胞团能发育为胚状体。辐射的原生质体培养成胚状体后,经低温筛选,在改良的生芽培养基和生根培养基中萌发成为植株。再生植株中检测出２株的叶片原生质体的低温半致死温度（ＬＴ５０）分别比对照低１．９６℃和１６８℃。     

禾本科植物原生质体培养及研究进展

植物原生质体培养是高等植物细胞工程和基因工程的重要基础之一。许多遗传操作,如体细胞杂交、细胞质重组和直接的 DNA 摄入等,都依赖于原生质体的再生。这种再生在双子叶植物中已不是一件困难的事。然而,多年来禾本科植物原生质体培养一直被认为是个十     

植物原生质体培养研究进展

自从Ｃｏｃｋｉｎｇ(196 0 )用酶法首次分离出有活性的原生质体 ,1971年Ｔａｋｅｂｅ等首次从烟草叶片分离原生质体 ,经培养获得再生植株 ,原生质体的研究和应用进入了一个新阶段。1　原生质体培养影响因子的研究1 1　培养基种类及成分不同植物原生质体培养的基本培养基不尽相同。培养基种类影响到原生质体的分裂频率、植板率以及小愈伤组织的出现等[1,2 ] 。潘增光[3 ] 等比较了 4种培养基 (ＭＳ、ＭＴ、改良ＭＴ、ＢＨ3)对苹果叶肉原生质体培养的影响 ,结果表明 ,只有在改良ＭＴ培养基中能观察到多细胞团形成 ,而在ＭＳ、ＭＴ、ＢＨ3作为…     

黑木耳交配型的研究

从黑木耳Auricularia auricula沪3菌株的子实体收集,分离,鉴定得到157株单孢子萌发的单核菌丝体,以其中73株孢子单核体为材料进行交配实验,经过三配交配反应,结果表明,木耳的交配型符合四极性交配系统的分布规律。根据四种交配反应情况把73株孢子单核体分为四组,并从四组中挑选出B17,B177,B101,B65作为四种交配型的标准菌株;与此同时,从沪3菌株的双核菌丝体制备的原生质体中获得53株原生质单核体,对这些单核体进行交配,确定出两种亲本交配型,以Y150（A1B1）和Y121（A2B2）作为标准菌株,将两个亲本交配型标准菌株与四个孢子单核体标准菌株进行交配反应,初步确定出四种孢子单核体的交配型分别为：B17（A2B2）,B177（A1B1）,B101（A2B1）和B65（A1B2）。     

小麦体细胞杂交研究进展

小麦细胞融合的研究开展较晚,但近年来,由于小麦原生质体培养及植株再生技术的突破,已成功获得小麦与４种近缘间禾草不对称体细胞杂种再生植株及多个物种的杂种细胞系。     

蓝色犁头霉原生质体的制备与再生

研究了氢化可的松生产菌蓝色犁头霉原生质体的形成与再生。通过对溶解酶系统的选择,影响原生质体形成的因素如渗透压稳定剂、酶浓度、菌龄、菌丝培养基和培养方式等因素进行考察,发现以0．4mol/L NH4Cl做为稳定剂、2．5mg/mL溶壁酶和5mg/mL纤维素酶组成的混合酶液溶解菌丝,4h后原生质体量可达10^6cell/mL。通过显微镜观察原生质体的形成过程以及在高渗培养基上的再生情况,再生率为15．6％。     

吖啶橙失活处理应用于不对称融合初步探讨

马铃薯栽培种和野生种叶肉原生质体经过吖啶橙（ＡＯ）处理后,暗培养两天,再光照４ｈ而失活．失活程度取决于ＡＯ处理时间、ＡＯ浓度、光照时机等．四倍体失活浓度高于二倍体,处理后马上光照失活效果最强烈,８ｄ后光照其小细胞团同未光照处理相差不大。ＡＯ失活的栽培种ＮＯ７同罗丹明６Ｇ（Ｒ６Ｇ）失活的Ｓｏｌａｎｕｍｂｕｌｂｏｃａｓｔａｎｕｍ融合后可以发生代谢互补恢复分裂,已得到假定的杂种小愈伤组织．     

烟草花粉原生质体与叶肉原生质体的融合及培养早期变化

用ＰＥＧ—高Ｃａ高ＰＨ法诱导抗卡那霉素的烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ）品系Ｎ３６４＋Ｋｍ＋花粉原生质体和黄花烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｒｕｓｔｉｃａ）叶肉原生质体融合。幼嫩花粉原生质体和叶肉原生质体之间的融合体培养启动胚胎发生分裂,经卡那霉素筛选后,少数多细胞团存活并形成小愈伤组织。成熟花粉原生质体与叶肉原生质体之间的融合体则仅产生管状结构。这一结果表明,作为融合一方的花粉原生质体的发育时期对融合产物的发育途径有重要影响。     

基因工程

852171 DNA片段链的分开及其从非变性聚丙烯酞胺凝胶中的分离〔英〕/James,R.…了Anal.Bioehem一1954,140(2)一456一458〔译自DBA,1984,3(21),84一09915〕 报道利用尿素和温和加热快速而定量地变性双链DNA(d sDNA)的一个技术。利用DNA聚合酶和适当的““PdNTP,通过填充反应将带有5产延长末端的DNA片段的3/末端加以标记,没结合的标记混合物通过SephadexG一50柱并用SDS一EDTA洗脱除去。标记的dSDNA加入固体尿素,65℃保温3分钟,接着在上聚丙烯酸胺凝胶前快速冷却变性。变性的互补DNA链在丙烯酞胺与双丙烯酸胺比率为60,1的非变…